玉米赤霉烯酮对睾丸间质细胞的毒性作用

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1、玉米赤霉烯酮对睾丸间质细胞的毒性作用研究生：甄建伟学科：临床兽医学导师：刘宗平教授卞建春教授下．建吞教发扬州大学兽医学院2012年4月甄建伟：玉米赤霉烯酮对睾丸间质细胞的毒性作用中文摘要玉米赤霉烯酮(ZEA)是由镰刀菌等真菌产生的一种霉菌毒素，广泛存在于动物饲料和人类的食品中，具有生殖与发育毒性、免疫毒性，对肿瘤发生也有一定影响，对动物的生产性能和人类的健康具有较大的潜在威胁。我国玉米赤霉烯酮污染严重，影响也越来越广泛。近年来，玉米赤霉烯酮对雄性动物生殖系统的危害越来越受到人们的重视。研究发现，玉米赤霉烯酮中毒可导致雄性动物乳腺肥大并呈雌性化、包皮水肿，性欲减退、睾

2、丸萎缩和精液数量减少且质量降低。但到目前为止，人们对玉米赤霉烯酮雄性生殖毒性仍缺乏全面的认识，尤其是在分子水平的认识远远不够。为进一步揭示玉米赤霉烯酮对雄性动物的生殖毒性作用，本研究在建立睾丸间质细胞(Leydigcell)毒性实验体外模型的基础上，从细胞和分子水平对玉米赤霉烯酮的睾丸Leydig细胞毒性作用进行了探讨。本研究通过MTT法确定了ZEA对睾丸Leydig细胞的作用浓度：对原代培养的SD大鼠睾丸Leydig细胞加入10U／mlHCG，ZEA染毒，ELISA法测定了ZEA对Leydig细胞睾酮分泌的影响作用；通过单细胞凝胶电泳法测定了ZEA对睾丸Leydi

3、g细胞DNA的损伤作用：通过流式细胞术测定了ZEA对睾丸Leydig细胞凋亡率的影响以及利用Westernblot技术测定了ZEA对睾丸Leydig细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl．2表达量的影响。结果表明：①随着ZEA剂量的增加，细胞相对活率降低，各剂量组之间均有显著性差异(P<0．05)，当ZEA浓度为10一ml时，细胞相对存活率为54．49％，接近半数致死浓度(LD50)，因此将实验的染毒浓度确定为1pg／m1、59∥ml、10州ml和209∥ml；@ZEA对睾酮的分泌有抑制作用，随着染毒浓度的增加(0蚓ml、19∥ml、10吲ml、20心ml作用12h)和染毒

4、时间的增长(59∥mlZEA分别作用oh、1h、6h、12h、24h)，睾丸Leydig细胞睾酮分泌量呈明显的下降趋势(P

5、上升趋势(P

6、effectsontumorigenesis，SOithasagreatpotentialthreattoanimalperformanceandhumanhealth．InChinaZEAcontaminationisgraveness，andtheeffectismoreandmorewidely．Inrecentyears，moreandmoreattentionhasbeenpaidonthetoxiceffectsofZEAtomalereproductivesystem．ThestudiesrevealthatZEApoisoningcanleadmal

7、eanimalstohypermastiaandgetfeminization，preputialedema，hyposexuality,orchiatrophyandreducethequantityandqualityofsemen．Butasyet，themalereproductivetoxicitycausedbyZEAespeciallyonthemolecularlevelhasnotabsolutelycleared．ToexplorethemalereproductivetoxicitycusedbyZEAfurther,ontheground