玉米赤霉烯酮对大鼠睾丸支持细胞骨架及功能蛋白abp等分泌的影响

《玉米赤霉烯酮对大鼠睾丸支持细胞骨架及功能蛋白abp等分泌的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、’？＇＇．－＾．．？？；．．－．麥级！鸣可，．．．．、＾辦巧ｗ＾＾；ｖ叫＞．社巧每ｒ為＇ＩＶ－－－．．？一，．ｆ－：■．‘？■＿：Ｖ＾：ｉ＾＾：＾产ｙ＾緩叫＾聲常穿參＇．每＇．；‘：ＹＡＮＧＺｍｎｉＵＮＩＶＥＲＳ．ＩＴＹ：／．．；１｜Ｙ，－ｖ／＇岭＇＿Ｊ：’‘一－’＇．．：．片令，：＼．户繁宁，茲寒餐＇硕壬学住冷丈我乂ｉ号儀旷；／；‘’’＇＇．’心（学术型）Ｖ女＼；衣赴＾町擎皆ｖＷ冰＂；批鴻ｒ去Ａ法部，；，／，ｋ米赤霉席Ｓ对大鼠睾丸支持

2、细胞骨架片ｒ衣聲！韓巧ｆ１：及功能蛋白ＡＢＰ等分泌的影响＜巧皆矜：邸泛－．：＇＇．ｆ蠻呵心巧，．卓：：輸／郑王龙谭％＇；作曲：；：苗．等黎翻顯讀．＇苗職常、－襄視．］苗；‘’指导教师姓名：卞建春教授，扬州大学２２５００９，江苏扬帅１，‘｛Ｖ言戸蠻、‘！；礎’＇＇ＩＶ申请学位级别：硕去学科专业名称：临床兽區学：义迎＇论文提交日期１５４２０１５／；２０年月论文答辩日期；年６月句；４，．＼知＼：？学位授予单化扬州大学学位授予日期．：２０１５年６月；；．．满心．：答辩委员会主

3、席＇：航里进卽．，咬．糸Ｖ味：．营耗’■－．‘勺，，，＼－气■：ｉ＇．．，為‘＼巧于巧？＞ＶＶ．．＾－Ｖｉ：＞ｖ：．’ｉＶ’＇－＇：节＾睾；．义：占材．或扛；巧乂．询＾＇－＇＂－Ｖ／？；－；．Ｖ：ｉ；Ｎ＾＊一＇、’ｖ’‘．■’、ｉ＇＇八‘，’；．式＊；、ｙ‘砖ｉ．＼，户．：冶故ｖ苗？乂、，、：、一．．＇＂处女＇八冷鴻矜啼＾Ｋ令，：产令＾皆也玉米赤霉稀酬对大鼠睾丸支持细胞骨架及功能蛋白ＡＢＰ等分泌的影响ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆＺｅａｒａｌ

4、ｅｎｏ打ｅｏｎ化ｅｃｙｔｏｓｋｄｅｔａｌｓｔｒｕｃｔｕｒｅａｎｄ化６ｓｅｃｒｅｔｉｏｎｏｆｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｒｏｔｅｉｎｓＡＢＰｉｎｒａｔｓｅｒｔｏｌｉｃｅｌｌｓｐ研究生：郑王龙学科：临床善医学导师；卞建春教授扬州大学兽医学院２０１５年６月郑王龙：玉米赤霉巧厕对大鼠睾丸支持细胞骨架及功能蛋白ＡＢＰ等分泌的影响Ｉ中文摘要一玉米赤霉帰丽（ＺＥＡ）是由镶刀菌等真菌产生的种霉菌毒素，广泛存在于动物饲料和、人类的食品中。研究表明，ＺＥＡ具有生殖发育毒性遗传毒性、免疫毒性

5、、致癌性。ＺＥＡ可导致雄性动物的雄激素分泌下降，雄性动物帷性化和性欲降低，及影响精子的生长发育，而睾丸支持细胞在生殖和精子发生过程中发挥着关键作用。但是到目前为止，人们对ＺＥＡ的雄性生殖毒性仍缺乏全面的认识，尤其是对ＺＥＡ的雄性生殖毒性的分子机理知之甚少。鉴于此，本研究通过建立ＺＥＡ与睾丸支持细胞体外模型，检测ＺＥＡ对支持细胞骨架结构和功能蛋白分泌的影响，从分子水平上探讨ＺＥＡ对睾丸支持细胞的毒性机理。本试验原代睾丸支持细胞为对象，通过膀酶和胶原酶的消化分离支持细胞，利用台盼蓝。本试验通过ＭＴＴ，袖红

6、０Ｗ及ＦＳＨＲ免疫焚光对分离的细胞进行活率和纯度鉴定法确定了ＺＥＡ的染毒浓度及染毒时间；通过激光共聚焦显微镜检测ＺＥＡ对支持细胞骨架－ｔｕｂｕ－蛋白ａｌｉｎ，Ｆａｃｔｉｎ和细胞核的形态结构影响，利用透射电子显微镜观擦ＺＥＡ对支持－ＰＣＲ－细胞线粒体，内质网，高尔基体等超微结构的影响；利用ＱＲＴ、Ｗｅｓｔｅｒｂｌｏｔ、ＥＬＩＳＡ－等实验技术检测ＺＥＡ对支持细胞ＡＢＰ、Ｉｎｈｉｂｉｎｐ、ＦＳＨＲ、Ｖｉｍｅｎｔｉｎ、Ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ和Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ等功能蛋白分泌的影响。１．睾丸支持细胞的分离培

7、养及鉴定。采用膜蛋白酶和胶原酶对睾丸组织进行二步消，化，可Ｗ有效地分离到支持细胞通过台盼蓝染法测定细胞获得的大鼠睾丸支持细胞活率在９５％Ｗ上：利用油红０染色法和ＦＳＨＲ免疫巧光法对分离的睾丸支持细胞进行纯度鉴９５％定，获得的大鼠睾丸支持细胞纯度在Ｗ上。２。．ＺＥＡ对單丸支持细胞骨架及超微结构的影巧ＭＴＴ法确定本试验的ＺＥＡ染毒浓度为ＯＡ／ｍＬ、５／ｍＬ、１０ｉ／ｍＬ、２〇＿／ｍＬ，染毒时间为２４１ｉ；ｊｇ雌｜ｇｎｇ激光共聚焦显微镜观察显ａ－ｂｕ－ａｃｉｎ示，支ｔｕｌ虹和Ｆｔ，随着ＺＥＡ染毒浓度的升高持细胞等

8、晉架蛋白和细胞核的损伤程度加大，染毒组细胞核呈新月状，形式凹陷，严重可见核碎裂；透视电镜观察显示，ＺＥＡ、、可Ｗ破坏支持细胞的内部结构，包括线粒体出现脊脱落甚至消失内质网出现模糊水肿和断裂、细胞质内的空泡及脂肪滴破损。