乌司他丁改善重症急性胰腺炎大鼠t淋巴细胞凋亡线粒体机制

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1、万方数据学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：趁日期：如／工年厂月／／日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论

2、文，并编入有关数据库。保密U，在——年解密后适用本授权书。本论文属于不保密匿孑。(请在相对应的方框内打“√”)杉粥学位论文作者导师签日期：210／s-年／月，，日同期：乙纠L年／．月，，同万方数据天津医科大学博士学位论文中文摘要目的：观察乌司他丁对重症急性胰腺炎大鼠T淋巴细胞凋亡的影响，证实乌司他丁的直接免疫调节效应；通过分析乌司他丁对重症急性胰腺炎大鼠脾淋巴细胞氧化应激水平及线粒体凋亡信号通路等的影响，阐释其改善T淋巴细胞凋亡的分子机制。方法：清洁级Wistar大鼠36只，随机分为(n-12)：(1)假手术对照(Sham)组；(2)重症急性胰腺炎(SAP)模型组；

3、(3)乌司他丁治疗组。采用胆胰管逆行注入5％牛磺胆酸钠的方法制备大鼠SAP模型，乌司他丁治疗组在制作SAP模型后经尾静脉缓慢注射乌司他丁1万U／Kg体重。术后24小时首先采用直接免疫荧光法对CD4+和CDs+T淋巴细胞进行标记，再应用Annexin．V／PI双染法标记凋亡细胞，流式细胞仪检测各组大鼠CD4+、CDs+T淋巴细胞比例及各亚群凋亡细胞比例；以2，7一二氢二氯荧光素二乙酸酯(DCFH．DA)为荧光探针检测各组大鼠淋巴细胞内活性氧水平，羟胺法检测血清超氧化物歧化酶活力，硫代巴比妥酸法检测血清丙二醛含量；以罗丹明123为探针，流式细胞仪检测各组大鼠淋巴细胞线粒

4、体膜电位，采用酯化钙黄绿素和氯化钴共孵育的方法检测线粒体通透性转换孔开放水平。结果：1、与假手术对照组相比，SAP模型组CD4+T淋巴细胞比例、CD4+／CD8+T淋巴细胞比值均显著下降(P<0．01)，同时CD4+T、CD8+T淋巴细胞亚群凋亡细胞比例均显著升高(P<0．01)，尤以CD4+T淋巴细胞为著，乌司他丁治疗组CD4+T淋巴细胞的凋亡比例显著降低(P<0．01)，CD4+T淋巴细胞比例和CD4+／CD8+T淋巴细胞比值则显著回升(P

5、显著低于假手术对照组(P<0．01)，乌司他丁治疗组淋巴细胞内ROS水平和血清MDA含量显著下降(P

6、提高血清SOD活力及降低血清MDA含量，从而通过有万方数据天津医科大学博士学位论文效提高机体对氧自由基的清除能力，降低淋巴细胞凋亡程度，减轻氧化应激对SAP大鼠免疫功能的影响；3、乌司他丁通过打断ROS与线粒体损害间的恶性循环，阻断线粒体凋亡信号通路，从而实现其减少淋巴细胞凋亡，改善机体免疫功能的作用。关键词：乌司他丁重症急性胰腺炎免疫抑制细胞凋亡氧化应激线粒体万方数据天津医科大学博士学位论文AbstraotoNeetive：ToinvestigatetheinfluenceofulinastatinonapoptosisofTlymphocytesinratswi

7、thsevereacutepancreatitis，confirmingitsdirectimmunoregulativeactivity；ToelucidatethemolecularmechanismofulinastatinunderlyingitsroleofreducingapoptosisofTlymphocytesinratswithsevereacutepancreatitisbyanalysingtheeffectofulinastatinonoxidativestresslevelandmitochondnalapoptosispathway