msm人群中hiv感染者tim-3受体与其配体gal-9对nk细胞功能的影响

《msm人群中hiv感染者tim-3受体与其配体gal-9对nk细胞功能的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、-中文论著摘要·№M人群中HIV感染者Ti盯r3受体及其配体GaI-9对眦细胞功能的影响目的人类免疫缺陷病毒(huIl】aniiimm_lodeficiencyvirus，HIV)感染可引起以CD4"T细胞减少为主要特征的获得性免疫缺陷综合征(acquiredimmunodeficiencysyndrome，AIDS)。T细胞免疫球蛋白区和黏蛋白区(Tcellimmunoglobulindomainandmucindomain，Tim)基因家族包括3个成员：Tim—l、Tim-3和Tim-4。Tim一3主要表达在己分化的CD4+1型辅助性T细胞(Thl)和CD8+1型

2、细胞毒性T细胞(CrL)，少量表达于Thl7细胞。后续研究发现Tim-3在固有免疫系统的细胞，尤其是在NI(细胞有较高表达。Tim-3是T细胞重要的负性调控因子，可使T细胞功能减退进而加重慢性病毒感染。在HIV感染中，Tim-3在CD8+T细胞的表达量增加，使病毒特异性CD8+T细胞的增殖和分泌细胞因子能力都降低，导致CD4+T细胞计数的降低和病毒载量的升高。Tim-3的配体一半乳凝集素一9(galectin-9，Gal一9)，是一种S型外源性凝集素，广泛表达于多种免疫细胞，通过与Tim-3的结合诱导Tim-3"T细胞的死亡。尽管表达于T细胞的Tim-3可负向调控细胞

3、功能，但表达于固有免疫细胞的Tim-3在免疫调节方面的作用目前仍存在争议。有研究显示，表达在树突状细胞和巨噬细胞的Tim-3能够增强炎症反应。自然杀伤细胞(natrualkillercell，NI()属于淋巴细胞的一个亚群，是固有免疫应答中一类重要的效应细胞，主要通过细胞毒性作用和分泌细胞因子发挥抗病毒、抗肿瘤作用。HIV一1感染者外周血NI(细胞胞内储存的穿孔素和颗粒酶A减少、活化与抑制性受体表达异常，使HIV感染者NI(细胞细胞毒性下降从而影响机体对病毒的清除。目前，Tim-3对NI(细胞产生何种影响还不明确，Tim-3+NK细胞的研究仅见几篇报道，且局限在健康人

4、群和慢陛乙型肝炎等少数几种疾病。在HIV感染中Tim-3及其配体Gal_9对NI(细胞是否发挥作用、作用机制如何以及对疾病进展有何影响尚无明确结论，相关报道仅有2篇，有待更为系统l生的深入研究。近年来MSM(menwhohaveSeXwithmen，MSM)人群中的HIV感染者己成为我国HIV新发感染主体，且此人群中HIV感染者疾病进展较快。因此，本研究拟探索MSM人群中HIV感染者Tim-3及其配体Gal-9对N1(细胞细胞因子(IFN—v)分泌和脱颗粒(CDl07a)功能的影响，为明确HIV感染的致病机制提供依据。材料与方法1、研究对象本研究共选取实验对象41例，

5、其中，HIV抗体阴性的健康人13例；根据中华人民共和国国家HIV／AIDS诊断标准，选择未接受过抗逆转录病毒治疗的IlIV慢陛感染者28例。(1)HIV抗体阴性健康人(HIV-negativenormalcontrol，NC)：13例入选标准：HIV抗体阴性健康人群，血常规及肝功正常、乙型肝炎表面抗原及抗丙型肝炎抗体阴性，无免疫系统疾病。(2)HIV慢性感染者：28例入选标准：均来自中国医科大学附属第一医院红丝带门诊MSM人群的lily感染者，未接受HAART治疗，感染时间一年以上。其中按CD4-T细胞数量高低分为两实验组，其中CD4一T细胞数量大于350细胞／u1为

6、高CD4组(CD4high)，小于350细胞／u1为低CD4组(CD4low)，高CD4组(CD4high)15例，低CD4组(CD4low)13例。2、CD4‘T细胞绝对计数在绝对计数管中加入20ulCD4／CD8／cD3TriTEsT试剂，再用逆向加样法加入50ul混匀的待测抗凝全血，在室温下避光染色15分钟，然后加入1XBD免洗溶血素450u]，在室温下避光溶血15分钟，再用FACSCalibur流式细胞仪中的MultiSET软件进行检测并自动分析，获得CD4tT细胞数量的绝对值。3、HIV病毒载量测定采用Roche公司TheCOBAS@AmpliPrep⑩／C

7、OBAS@TaqMan@HIv-1Test，v2．02试剂盒在COBAS@TaqMan@系统进行全自动PCR反应体系制各及病毒载量检测。检测下限为20拷贝／m1。4、NI(细胞Tim-3及其配体Gal一9表达的检测用抗CD3一FITC、CD4一PEcy7、CDl6一PerCP、CD56一PEcy7、Lineage—FITC(、HLA—DR—PerCP、Tim-3一PE和Gal一9APE(或Gal一9一PE)荧光抗体对冻存复苏后的外周血单个核细胞(PBMC)进行表面染色，室温避光20分钟，PBS洗涤一遍，用1％的多聚甲醛固定细胞，上机检测NI(细胞Ti