实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎小鼠模型建立和观察

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1、实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎小鼠模型建立和观察【摘要】目的研究实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎（EAU）的小鼠模型的发生规律及特征。方法6〜8周BIO.RIII小鼠，用人源性IRBP肽161-180与完全弗氏佐剂混合注射于小鼠建立模型。观察小鼠眼部表现，小鼠眼球病理切片，光镜观察记录不同时间点小鼠的炎症情况。结果EAU小鼠视网膜炎症出现在第14〜21天，表现为结膜充血，前房混浊，虹膜后粘连，眼底视网膜水肿充血。病理切片见玻璃体腔炎症细胞，视网膜水肿，各层结构紊乱,炎症浸润，血管周围炎，网膜内肉芽肿等。结论用IRB

2、P161-180肽成功诱导BIO.RIII鼠建立EAU模型，为人类葡萄膜炎的研究奠定了良好的实验基础。【关键词】实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎；小鼠;IRBP肽葡萄膜炎是一种累及葡萄膜、视网膜、视网膜血管及玻璃体的常见眼病，其病程长，治疗棘手，在致盲眼病中有重要地位［1］。自身免疫性葡萄膜视网膜炎（EAU）的动物模型是研究葡萄膜炎的重要工具，但国内动物模型主要建立在大鼠，本文以BIO.RIII小鼠为动物，通过免疫IRBP肽建立EAU小鼠模型，通过临床表现、病理切片对其炎症程度进行观察分级，为葡萄膜炎的研究奠定了基

3、础。1材料与方法1.1动物BIO.RIII实验小鼠6〜8周龄，体重18〜24go小鼠动物的实验操作符合动物伦理委员会的标准。1.2EAU小鼠模型的建立与观察人源性IRBP肽161-180由上海生物有限公司委托合成。IRBP肽与弗氏佐剂1:1混合，适龄BIO.RIII小鼠麻醉后皮下注射，并给予腹腔注射1.0?g白喉毒素。对照组小鼠皮下注射磷酸缓冲溶液。通过裂隙灯观察小鼠眼前节情况并予记录，直接眼底镜观察眼后段情况。小鼠在免疫后处死，取出眼球，病理切片，H-E染色。参照Caspi.等［2］评分如下：0.5分，局部单核

4、细胞浸润至视网膜；1分，单核细胞浸润至血管旁及玻璃体腔；2分，视网膜内肉芽肿形成，闭塞性血管炎伴视网膜脱离，光感受器层丢失；3分，以上伴视网膜色素上皮层内肉芽肿，视网膜下新生血管；4分，3分的病变侵犯更深更广范围。2结果2.1EAU的临床表现建立EAU的小鼠表现为双眼结膜睫状充血，角膜混浊水肿，羊脂状KP形成，前房混浊，虹膜后粘连，玻璃体混浊渗出，眼底视网膜水肿，血管充血，黄白色渗出物。2.2EAU的病理改变正常小鼠玻璃体腔透明，视网膜结构清晰，排列规则。EAU小鼠玻璃体腔大量炎症细胞及渗出，视网膜水肿，各层结构

5、紊乱，视神经纤维层和视网膜节细胞层增厚，见炎症细胞，闭塞性血管周围炎，层间可见肉芽肿形成，部分见视网膜脱离，视锥视杆层明显皱褶，部分消失，按上述标准给予评分。小鼠注射IRBP后，通过病理切片记录炎症出现、髙峰及消退的时间，小鼠视网膜炎症出现第14〜21天，炎症5〜6周开始消退。3讨论葡萄膜炎为我国致盲眼病的防治重点，但其发病机制仍不清楚。近年来葡萄膜炎的动物模型作为研究的重要组成部分得到重视。本文以B10.RIII小鼠为研究对象，首次系统性研究了小鼠EAU模型的临床表现、发病时间和病理特征,为葡萄膜炎研究奠定了良

6、好的实验基础。我国葡萄膜炎的模型多建立在大鼠上，采用Lewis或Wistar大鼠，用提取的S抗原免疫动物。大鼠模型发生时间早，炎症1〜4d达髙峰，6〜9d消退，炎症程度重，更趋向一种急性炎症反应［3］。而人类葡萄膜炎多为慢性，具有明显的反复性。以往研究也用过猪、猴等动物，但都与人类有较大差异，且遗传背景不清，不能对其展开深入研究。近交系小鼠是现在科研中最为常用的实验动物，其遗传背景清楚，相关实验资源丰富。小鼠EAU模型需具有一定遗传背景，并非所有品系小鼠均可成功诱导。本研究中采用BIO.RIII小鼠，IRBP肽诱

7、导的葡萄膜炎发生时间晚，持续时间较长，病理表现光感受器层部分破坏，这些特征均说明小鼠可更好地模拟人类葡萄膜炎的发生。且小鼠的实验资源丰富，故小鼠EAU模型的建立为研究人类葡萄膜炎的奠定了良好的实验基础。参考文献[1]Sheu,SJ.Updateonuveomeningoencephalitides.CurrOpinNeurol,2005,18(3)：323-339.[2]ChanCC.Pathologyofexperimentalautoimmuneuveoretinitisinmice・JAutoimmun,1

8、990,3(3)：247-255.[3]WildnerGM.Diedrichs-MohringThurauSR.Ratmodelsofautoimmuneuveitis.OphthalmicRes,2008,40(3-4)：141-144.