建立c57bl6小鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎模型

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1、温州医学院硕士学位论文论文题目：答辩委员会主席：答辩委员会成员：论文答辩日期：川。西、＼cl2温州医学院硕士学位论文目录IIIIIlllIIIIIIIflfY2397499中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4hbstractS⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．6材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．14讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．20参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．25致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．37学位论文独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．41温州医学

2、院硕士学位论文中文摘要目的采用人工合成的视黄醇类结合蛋白(InterphotoreceptorRetinoidBindingProtein，IRBP)和百日咳杆菌的毒素(PurifiedBordetellapertussistoxin，PTX)，建立C57BL／6小鼠的自身免疫性葡萄膜炎模型(experimentalautoimmuneuveoretinitis，EAU)，为腺苷A2A基因敲除对小鼠自身免疫性葡萄炎影响研究建立模型。方法1．实验动物：选雌性C57BL／6小鼠43只，6-12周龄鼠(体重20—259)，分为5批次，每批均随机选用l~2只小鼠作为阴性对照组。2．视黄醇类结

3、合蛋白(IIlte叩hotoreceptorRetinoidBindingProtein，IRBP)序列GPTHLFQPSLVLDMAKVLLD，由人工合成。3．建模操作：小鼠全麻后，研究组：取IRBP与完全弗氏佐剂(Freund'scompleteadjuvant，rCA)按1：1体积混合得到混合液，分别在小鼠的颈部，尾根部，双胸侧部4个点，皮内注射300pg，然后腹腔注射不同剂量的纯化的百日咳杆菌的毒素(PTX)。阴性对照组小鼠，同样四个位点皮内，腹腔注射PBS。注射2周开始观察小鼠眼底、眼前节炎症反应并记录。注射第21天处死小鼠，取眼球。固定、石蜡包埋、视网膜组织切片、HE染色

4、。结果1．实验鼠34只。实验21天时仍然存活30只，眼球取样60只眼，阴性对照9只，死亡小鼠中，PTX500ng组小鼠死亡4只，PTX200ng组350ng组小鼠死亡0只。2．HE上建模成功的特征：视网膜层次紊乱、增厚，视网膜外核层和或内核层皱褶，视网膜各层炎症细胞浸润。3．确定EAU建模成功35个眼球，占比58．3％。其中轻度(0．5分)18只，中度(1-2分)13只，重度(3—4分)4只。PTX500ng组18只眼，评分在0．5分或以上16R，成模率88．9％；PTX200ng宝H，成模率仅为33．3％。PT350ng组，成模率为83．3％4温州医学院硕士学位论文结{仑IRBPI

5、豁PT350ng诱导c57BL／6小鼠建立自身免疫性葡萄膜炎的动物模型的成模率达到83％，可以作为进一步诱发自身免疫性EAU的实验的参考条件。关键词实验性自身免疫性葡萄膜炎；动物模型；百日咳杆菌的毒素：C57BL／6小鼠，A2A基因敲除温州医学院硕士学位论文AbstractsTheestablishmentofC57BL／6miceexperimentalautoimmuneuveitismodelObjective：UsingsyntheticInterphotoreceptorRetinoidBindingProtein(IRBP)andPurifiedBordetellaper

6、tussistoxin(PTX)establishmentofC57BL／6micewithautoimmuneuveitismodelforadenosineA2AknockoutmodelonEAUinflammatoryimpactstudy．Methods：1．ExperimentalAnimals：SelectfemaleC57BL／6mice43，6．12．week。oldmice(bodyweight20-259)weredividedinto5batches，eachbatchwererandomlychosenfrom1to2miceasanegativecontr

7、olgroup．2·Retinoidbindingprotein(InterphotoreceptorRetinoidBindingProtein，IRBP)sequenceofGPTHLFQPSLVLDMAKVLLDthebythesynthetic．3·Modelingoperations：Aftergeneralanesthesia，thestudygroup：TakeIRBPwithcompleteFreund’sadjuvant(FCA)toob