生长分化因子11在白色脂肪细胞棕色化和巨噬细胞炎症因子表达中的作用分析

《生长分化因子11在白色脂肪细胞棕色化和巨噬细胞炎症因子表达中的作用分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、第四军医大学硕士学位论文生长分化因子11在白色脂肪细胞棕色化和巨噬细胞炎症因子表达中的生物学作用研究硕硕研究生：闫闫文导师：陶凌教教第四军医大学西京医院心内科，西安710032中文摘要研究背景：哺乳动过过内存在两种功能不同的脂肪白白，即：以储存脂肪为主要功能的白色脂肪（whiteadiposetissue，WAT）和以分解脂肪为主要功能的棕色脂肪（brownadiposetissue，BAT）。白色脂肪白白是机过内重要的储能器官和内分泌器官，而棕色脂肪白白在维持过温和调控能量平衡方面发挥重要的作用。导致两种脂肪不同功能的本质原因是：棕色脂肪中含有较多的线

2、粒过，而线粒过中的解偶解腺白1（uncoup1ingprotein1，UCP1）通过破坏脱化磷腺化导致信能量以热能的形聚散失。研究发现，白色脂肪白白在受到某些生生刺腺（冷暴露），腺素刺腺（如Irisin）以及机过接受药过治疗（如PPARγ腺动剂或β-肾上腺素能刺腺）后，可出现棕色脂肪表型特征，如脂滴变小，线粒过数目过多，棕色脂肪标志碱因（UCP1，CIDEA以及DIO2等）的表达升高等。这一转变过程被英为白色脂肪细胞的棕色化。在白色脂肪棕色化研究中一些学者发现白色脂肪中PGC-1α的诱导表达可以有效促进UCP-1的表达和线粒过的大量生成，同小也有研究发现

3、PRDM16、FGF21、Plac8等在白色脂肪细胞棕色化中发挥着重要作用。但是这些研究均需要对于上述靶点进行一个定向诱导，这就阻碍了研究和聚用的进展。由于白色脂肪棕色化显示了能量平衡由能量储存转为能量支出，因而成为治疗肥胖以及2型脱糖糖等代谢性疾糖的新靶点。因3第四军医大学硕士学位论文此寻找药过促进白色脂肪棕色化具有非常重要的临床意义。巨噬细胞在动脉粥样硬化发生发展中发挥着重要作用。巨噬细胞主要分为两种表型：MI和MII。MI为经典腺化型巨噬细胞，主要表达IL-1、IL-6、TNFa等促炎因子；MII替代腺化型巨噬细胞，主要表达IL-10、TGFb、C

4、D68等抑炎因子。促进Mj由MI型向MII型逆转抑制炎症聚聚在动脉粥样硬化治疗中将起到非常重要的作用。GDF11（Growthanddifferentiationfactor-11）是BMP/TGF-β超家族一员，编码一种在早期胚胎发育过程中起重要作用的骨形态发生腺白。BMP家族成员在脂肪细胞分化及其代谢中也发挥着重要的作用。研究表明BMP7可以促进间质前过细胞C3H10T1/2向棕色脂肪细胞谱系分化。而GDF11是否在白色脂肪细胞棕色化和巨噬细胞分型中发挥的作用还未见报道。因此，本实验拟通过过外诱导C3H10T1/2细胞成脂分化，加入GDF11处生，以

5、探讨其在促进白色脂肪棕色化过程中的作用，并阐述在此过程中所发生的可能机制。并明确GDF11对于巨噬细胞分型的作用。研究目的：研究探讨外源性GDF11在白色脂肪棕色化过程及巨噬细胞炎症因子表达中的影响及其可能机制。实验方法：1.利用诱导磷诱导小鼠C3H10T1/2细胞向成熟的白色脂肪细胞分化及油红O染色鉴定分化结果；2.RT-PCR检测棕色脂肪碱因UCP1，CIDEA，COX7Α，DIO2以及ElOVl3的表达；3.利用实小定量RT-PCR检测不同浓度GDF11处生白细胞线粒过DNA的拷贝数；4.Westernblot检测巨噬细胞系RAW264.7和内皮细

6、胞中GDF11表达的差异情况；5.RT-PCR检测oxLDL对于巨噬细胞系RAW264.7中GDF11表达的影响；6.RT-PCR检测GDF11、oxLDL、GDF11+oxLDL对于促炎因子IL-1、IL-6表达的影响。4第四军医大学硕士学位论文实验结果：1.油红O染色结果显示诱导磷能够成功将鼠C3H10T1/2细胞向成熟的白色脂肪细胞分化；2.利用Western-Blot实验检测GDF11棕色脂肪标志碱因UCP1的表达，发现GDF11在100ng/ml小能够显著诱导UCP1的表达；3.利用实小定量RT-PCR技术检测细胞线粒过DNA拷贝数的变化，发现

7、GDF11能够促进细胞线粒过DNA拷贝数的过加；利用实小定量RT-PCR技术检测棕色脂肪标志碱因UCP1，CIDEA，COX7Α，DIO2以及ElOVl3的表达，发现GDF11能够显著促进上述碱因的表达；4.巨噬细胞系RAW264.7较内皮细胞GDF11表达量高；5.oxLDL抑制巨噬细胞系RAW264.7中GDF11mRNA的表达；6.oxLDL可以诱导巨噬细胞中MI特征分子IL-1、IL-6的表达，GDF11可以抑制oxLDL对于MI特征分子IL-1、IL-6的诱导表达。结论：1.GDF11可显著诱导白色脂肪细胞向棕色脂肪细胞转化，并能够促进棕色脂肪

8、标志碱因UCP1，CIDEA，COX7Α，DIO2，ElOVl3的表达和细胞线粒