生长分化因子9与生长分化因子9B在卵巢组织中的表达与调控研究

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1、原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。论文作者签名：盟日期：兰坚：生6关于学位论文使用授权的声明本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编

2、本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名：查L导师签名再三娅f期：塑翌生；山东大学硕士学位论文生长分化因子一9与生长分化因子一9B在卵巢组织中的表达与调控研究专业妇产科生殖医学研究生李春艳导师陈予江中文摘要目的本实验通过观察生长分化因子一9(GDF一9)与生长分化因子一9B(GDF一9B)在不同发育阶段的小鼠卵巢组织中的表达及促卵泡生成素(FSH)对其表达的影响，研究GDF一9与GDF一9B在卵泡形成和卵巢发育过程中的作用及其表达调控机制，探讨GDF一9与GDF一9B在卵巢中自分泌及旁分泌作用机制及与生殖功能的关系，进一步探讨其临床应用前景。研究方法卵巢

3、标本取自不同发育阶段(出生后5天、10天、15天、20天、25天、30天)的小鼠及注射孕马血清(PMSG)24小时的性成熟小鼠，对照组不给予PMSG；分离性成熟小鼠卵泡体外培养，培养液中加FSH(IOOIU／L)，对照组不加FSH72小时后收集卵泡取卵母细胞。所取的卵巢组织分别行免疫组化比较GDF一9蛋白的表达、原位杂交比较GDF一9BmRNA的表达，所取的卵母细胞行免疫组化比较GDF一9蛋白的表达。结果1．出生后小鼠的卵巢开始发育，卵泡的生长启动，逐渐从始基卵泡发展到初级卵泡、次级卵泡及成熟卵泡，GDF一9蛋白的表达从早期初级卵泡开始，直至成熟卵泡，其表达开始的时间与

4、初级卵泡出现的时间一致。GDF一9B与GDF一9有相似的表达模式，从晚期初级卵泡开始。2．共取20只小鼠的卵巢组织制片，免疫组化共计数370个卵泡，孕马血清组较对照组GDF一9蛋白的表达增强，差异有显著性：原位杂交共计数卵泡362个，孕马血清组GDF一9BmRNA的表达无显著性差异。3．卵泡培养后共收集卵母细胞58个，培养液中加FSH32个，对照组26个，免疫组化示培养液中加FS[I组GDF一9蛋白的表达较对照组增强，差异有显著性，山东大学硕士学位论文与体内实验的结果一致。结论卵泡生长启动后，GDF一9与GDF一9B在卵泡发育的各个时期均有表达，歹l：始的时间与初级卵泡

5、出现的时间一致，FStt可以在体内、体外均增加GDF9的表达，不影响GDF-9B的表达。关键词；生长分化因子卵巢表达调控卵泡山东大学硕士学位论文TheExpressionandRegulationofGDF-9andGDF-9BinMiceOvaryABSTRACTObjectivesGrowthdifferentiationfactor一9(GDF一9)andit’shomologuegrowthdifferentiationfactor一9B(GDF9B)，bothoriginatingfromtheoocyteplayamajorroleinearlyfoilic

6、ulogenesis．TofurtherinvestigatetheexpressionandtherelatedmodulatorymechanismsofGDF一9andGDF一9BweexaminedtheirexpressionduringovarianmorphogenesisandtheinfluencesofFSHontheexpressionbothinvivoandinvitro．MethodsMouseovarieswerecollectedon5day，10day，15day，20day，25dayand30dayafterbirthandafte

7、r24hoursofinjectionPMSGfromsexmaturemice，themiceinjectedNSascontr01．WedissectedfolliclesfromtheovariesofmaturemiceandculturedinvitrowithorwithoutFSH(IOOIU／L)for72hours．Thenoocytescollectionwasperformed．GDF一9proteinWSSdetectedbyimmunohistochemistrywhileGDF一9BmRNAbyinsituhy