瑞氏染色含紫黑色颗粒细胞铁染色57例临床观察

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1、瑞氏染色含紫黑色颗粒细胞铁染色57例临床观察幸建英，童华波，汪彦屿，吕纯莉（遵义医学院附属医院检验科，贵州遵义563003）2在细胞病理学检验中，镜下部分含有紫黑色颗粒的吞噬细胞形态上与黑色素瘤细胞极为相似[1]，分辨困难。本研究收集了多部位不同样本，应用细胞病理学检验与细胞铁颗粒染色方法的结合，进行其间的鉴别探讨，现报告如下。1材料与方法1.1观察对象收集我院2002年11月至2008年3月行细针穿刺细胞学检查找到细胞质中含有紫黑色颗粒细胞的患者57例，其中男性33例，女性24例，年龄9个月至78岁。分为黑色素瘤组和非黑色素

2、瘤组。黑色素瘤组共8例，来源于腹水3例、颈部包块3例、大腿包块2例；非黑色素瘤组共49例，其中可疑恶性肿瘤10例，确诊为恶性肿瘤25例，非恶性肿瘤14例均来源于机体多部位穿刺物。1.2方法细胞学检查：胸水、腹水等穿刺液，经离心沉淀后取其白细胞层（或沉淀物）涂片制成薄膜，肿块组织穿刺物直接推片制成薄膜，经干燥、固定、瑞氏-姬姆萨染色，低倍镜观察，油镜下确认。按文献[1]铁染色方法进行操作。油镜下观察10～100个（因细胞数多少而定）含紫黑色颗粒吞噬细胞细胞质中铁颗粒染色情况，判断其阴性（细胞质中无蓝绿色颗粒）或阳性（细胞质中有蓝

3、绿色颗粒），分别计数阳性百分率；同时按细胞外铁标准[1]将铁染色结果分为5级：0分，细胞质内无蓝绿色颗粒；1分，细胞质内有少量蓝绿色颗粒或偶见铁小珠；2分，细胞质内有较多量的蓝绿色颗粒易见铁小珠；3分，细胞质内有多量的蓝绿色颗粒及铁小珠；4分，细胞质内有多量的蓝绿色颗粒及铁小珠充满整个细胞质。各级百分率与其级数的乘积的总和计算其积分。2结果黑色素瘤组铁染色均为阴性（图1），积分为0分；来源于机体多部位不同组织穿刺物的非黑色素瘤组49例铁染色均显示不同等级的阳性反应，部分为强阳性反应（图2～4），其积分和阳性反应情况见表1。表1

4、非黑色素瘤组（阳性组）含有紫黑色颗粒细胞铁染色结果例数积分≤100分101～199分≥200分≥200分频度率阳性百分率(%)阳性积分均数（分肺穿物、支纤镜刷检物1234510.266156肝穿物61236.165190肾穿物10012.0100360面颈部包块穿刺物701612.392282乳腺穿刺物40048.298328胸水93248.274201心胞积液30036.199303腹水4404068158卵巢囊肿30036.183253合计497132959.23　讨论单核细胞在血液中停留一定时间后，进入周围组织分化为吞噬

5、细胞。机体组织广泛存在具有吞噬功能的吞噬细胞；肝脏的巨吞噬细胞是一种特定的巨噬细胞能吞噬胃肠道进入门静脉系统血液中的细菌；肺泡组织中的吞噬细胞，通过吞噬作用将随着吸气进入肺泡的多种尘埃颗粒纳入细胞体内，成为含紫黑色颗粒的尘细胞；左心衰竭、肺淤血时，某些吞噬细胞吞噬了红细胞并将其分解破坏形成棕黑色含铁血黄素颗粒的吞噬细胞,因与充血性心力衰竭有关而称为心力衰竭细胞；局部陈旧性出血，红细胞破坏溶解血红蛋白被吞噬细胞吞噬而形成含紫黑色颗粒的含铁血黄素细胞。黑色素瘤是一种高度恶性肿瘤[2]，90%原发病变发生在皮肤。早期可通过淋巴、血道

6、转移；患者常因转移病灶前来就医。若能早期诊断、正确治疗，很多患者是可以治愈的。黑色素瘤细胞多表现为双向分化，形态多样、大小不一，部分细胞质中可见多少不等、粗细不一、染色较深的紫黑色颗粒且常覆盖于细胞核上（做免疫组化染色，若HMB-45阳性可以诊断）[3]；约有15%的黑色素瘤不含或含极其少量黑色素称为无色素性黑色素瘤。镜下低分化无色素性黑色素瘤细胞与其他肿瘤细胞比较无典型特征性标志。经镜下观察紫黑色颗粒并不是黑色素瘤细胞所特有，在多部位穿刺物涂片中含有紫黑色颗粒的细胞（图4），形态上与黑色素瘤细胞（图3）2极其相似，因此，镜检

7、时仍不能单凭细胞中含有紫黑色颗粒而断定是否黑色素瘤细胞。本实验选择了非黑色素瘤组含有紫黑色颗粒细胞49例与黑色素瘤组8例进行铁染色对比实验，发现非黑色素瘤组标本均呈不同程度的铁染色阳性反应，面颈部包块、卵巢囊肿、乳腺包块、三腔积液等标本涂片中含紫黑色颗粒细胞的铁染色呈强阳性反应，蓝绿色颗粒充满整个细胞质，阳性百分率为74%～99%，多为3～4分，积分＞200分；而8例黑色素瘤患者黑色素瘤细胞铁染色均呈为阴性，阴性率为100%。说明黑色素瘤细胞中的紫黑色颗粒是由黑色素所形成，不含铁元素，铁染色呈阴性，而非黑色素瘤患者含紫黑色颗粒

8、细胞为吞噬细胞（如含铁血黄素细胞、心力衰竭细胞、尘细胞、kuffer细胞等）吞噬了或多或少的含铁物质，随着吞噬含铁物质量的多少，铁染色反应显示不同等级的阳性率及积分；吞噬含铁物质量愈多，阳性率、积分愈高，提示含铁血黄素细胞的可能性就愈大，伴有陈旧性出血的可能性亦愈大。通过实验