瑞氏染色教程文件.doc

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1、精品好文档，推荐学习交流瑞氏染色瑞氏染色是目前最常用而又最简单的染色方法。1原理：瑞氏试剂中之酸性伊红和碱性美篮混合经化学作用后，变成中性之伊红化美蓝，久置后，经氧化而含有天青。此三种染料分别和细胞核及浆中的NH3+和COO-等结合，使细胞核及胞浆着色。由于系中性染料，又有缓冲液调节酸碱度，所以细胞受染后，蓝红等颜色都较适中，核染质、胞浆及其中之颗粒显色较为清楚。2试剂配制：1、瑞氏试剂瑞氏染料（粉）1克，加不含醋酮之甲醇600毫升溶解过滤后即成。混合方式可将瑞氏染料置于研钵内，加适量甲醇混合研磨，使染料溶解，将已溶解的液体倒入清洁玻

2、瓶，再放入甲醇继续溶解剩下染料，直至染料及甲醇均用完为止，然后过滤，以深色中性之玻璃瓶储备待用。亦可将1克染料一次加入600毫升甲醇中，盛深色玻璃瓶内，塞好瓶口，置于温暖而黑暗之处或37度温箱内，每日振荡5min，连续7天以上，然后过滤储备用。染液宜久置后使用，通常存放愈久，染色效果愈好。2、缓冲液由1%的磷酸氢二钠和1%的磷酸二氢钾各30毫升加蒸馏水1000毫升配成，或以上两药各1克加2500毫升左右蒸馏水制成。以石蕊试纸检验、调整酸碱度，使PH在6.5-7之间即可。仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢5精品好文档，推荐学习交

3、流缓冲液亦可永新鲜蒸馏水或煮沸后密闭保存的蒸馏水。如蒸馏水与空气过多接触，则可因吸收空气中之二氧化碳而使PH值变低，影响染色，故不宜使用。3、染色步骤1将已编号之涂片水平置于染色板或者染色架上，涂片两端各划一道蜡笔线，主要防止染液外溢。2滴加瑞氏染色液。其多少依标本所占面积大小而定，一般为4-8滴，至染液将标本完全盖住为止。染液不宜过少，否则，甲醛挥发后，易产生沉淀；不可过多，以免因过盛而流失，影响染色。31-2分钟后，滴入缓冲液（染液与缓冲液的比例约为1：1.5，冬季1：1，夏季1：2）。以气囊向玻璃片上轻轻打气，使染液和缓冲液混合

4、均匀，一般不宜口吹起，以免呼出二氧化碳改变缓冲液酸碱度而影响染色。4自缓冲液滴入10-15分钟后，用自来水冲洗。冲洗时应将玻片持平，以流水滴入使染液及缓冲液自玻片边缘溢出，染料沉淀即随水浮去。冲洗时，切忌水力过大，以免将标本并染液同时冲走；冲洗前切不可先将染液倾去，否则沉淀将附于标本上不能除去，染色时间与染液的性质、酸碱度、气温等关系甚大，因此应灵活掌握。最好先冲洗一张，于低倍镜下初步检查，如细胞核浆分明，颗粒清楚，表示染色满意，此时，始可将其余涂片全部冲洗。如染色过浅，则需延长染色时间。仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢5精

5、品好文档，推荐学习交流5冲洗、待干、镜检。如天冷或空气湿度大，可用吸水纸吸水加快干燥速度。但切忌用力重压或擦拭，以免将标本中的细胞成分擦去或破坏。4优缺点其主要优点是染色方法简单、省时、易于推广，且染色较清晰，特别是胞浆及其中颗粒受染良好。根据我们的体会，在细胞学检查中，除个别情况外，瑞氏染色基本上可以解决绝大部分常见病的诊断问题。其不足之处是核染质及核膜的结构往往不如巴氏染色清楚。5染色不佳的原因及纠正方法1染色过深A表现镜下细胞变小，核与浆均呈深蓝或蓝黑色、结构不清，红细胞呈碱性色。B原因染色时间过长；染液过多或缓冲液过少；染液或

6、缓冲液偏碱；夏季染色过程中甲醇挥发。C纠正用甲醇脱色后重复染色。亦可用甲醇或瑞氏染液脱色数秒后冲洗，再行镜检，脱色时间根据具体情况决定。2染色过浅A表现胞浆、浆内颗粒及核均不着色或着色过浅，红细胞亦不着色。B原因染色时间过短；染色液过少或缓冲液过多；染液或缓冲液偏酸C纠正按原染色步骤重复染色。仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢5精品好文档，推荐学习交流3染色偏碱较常见A表现红细胞呈蓝色或绿色，细胞核、细胞浆及颗粒染色深，结构不清。酸性颗粒亦蓝染，淋巴细胞呈灰色。B原因基本与染色过深之原理相同，玻璃片偏碱、冲洗时间不足亦为可能之

7、原因。C纠正如染色过碱，可于其中加1%醋酸少许，或将涂片浸于95%酒精数秒中，然后冲洗。4染色偏酸较少见A表现镜下一片红色，胞核及嗜碱性颗粒亦红染或不着色。B原因染料放置过久或与空气接触后甲醛氧化而成甲酸；玻片或缓冲液偏酸。C纠正新旧染液混合使用，借以调整其PH值，或于染液中加1%碳酸钠适量。5沉渣过多；主要表现为涂片是那个大量颗粒状深染之渣滓。A原因染液与缓冲液混合不均；冲洗前已将染液、缓冲液倾去；染色液未过滤；或天热干燥时，染液中甲醇挥发。B纠正加甲醇使沉淀颗粒溶解，再行复染。附件2编制与使用说明一、《业主项目部标准化管理管控记录

8、表》是业主项目仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢5精品好文档，推荐学习交流部对项目建设关键环节的管控记录用表，共计50个记录表格，内容涵盖业主项目部十项重点工作，二十个关键管控节点。管控记录表应用是推动项目过程管