实验九-抗酸染色教程文件.ppt

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1、实验九 抗酸染色临床病原生物学教研室一、实验目的:1.掌握抗酸染色的原理和方法2掌握结核分支杆菌痰涂片的报告方法。三、实验材料:细菌:结核杆菌染液:石炭酸复红液、3%盐酸酒精、碱性美兰溶液其它:接种环、酒精灯、载玻片等四、实验方法:1、细菌涂片的制备1)涂片:20mm*25mm薄涂片或20mm*15mm厚涂片2)干燥:自然干燥3)固定:火焰固定四、实验方法:1、细菌涂片标本的制备涂片干燥固定2、染色3、油镜观察1)初染:用玻片夹夹持涂片标本,滴加石炭酸复红2-3滴,在火焰高处徐徐加热,切勿沸腾,出现蒸汽即暂时离开,若染液蒸发减少,应再加染液,以免干

2、涸,加热5-10分钟,待标本冷却后用水冲洗。2)脱色:3%盐酸酒精脱色30’’~1’;用水冲洗。3)复染:用碱性美兰溶液复染1’,用水冲洗后用吸水纸吸干。五、实验结果:结核杆菌呈红色,常堆积成团,排列无序,偶呈分枝状生长。背景及非抗酸性细菌呈兰色。六、注意事项:1、无菌操作2、涂片厚度要适中3、固定4、冲洗5、染色时间6、初染加热的温度,勿沸腾准备细菌:卡介苗染液:抗酸染液(2套/室)其它:载玻片(1张/人)、结核分枝杆菌示教片(1张/人)痰标本8盒

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