细胞dna定量分析的其它用途

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1、细胞DNA定量分析的其它用途细胞DNA定量分析早期诊断肺癌常规痰细胞学检查诊断肺癌敏感性很低•肺癌发达国家中病死率最高•没有广为接受的方法进行筛查及早期诊断•常规痰细胞学检查仅能得到10%-23%的阳性结果，即使是最有经验的细胞学医师，阳性率只可能达到20%-30%。常规痰细胞学检查和DNA定量分析的比较性研究•痰标本来自833个体，其屮◊肺癌177例◊非典型增生98例◊无异常发现者558例•标本来自5个不同城市的7家医院◊临床诊断◊无异常发现：至少胸部x光检查正常◊肺癌非典型增生者均由病理学检查证实•双盲法分组

2、研究，评估常规法、DNA定量法和两种方法联合使用可检出的痰细胞中细胞DNA定量分析能提高肺癌的检出率常规细胞学敏感性特异性DNA定量分析敏感性特异性腺癌14%90%60%90%早期腺癌14%90%45%90%细胞DNA定量分析早期诊断肺癌标本种类•痰•支气管灌洗物和刷取物细胞DNA定量分析系统检测胸腹水中的癌细胞腹水细胞学检查鉴别癌性和炎性腹水•腹水细胞学检查在鉴别癌性腹水和炎性腹水中起着关键性作用•63例腹水标本被包括在研究中•50〜100ml腹水经离心后制片，巴氏和DNA染色•每例至少有4000个腹水细胞核接

3、受DNA立量分析细胞DNA定量分析用于炎性和癌性腹水的鉴别诊断较常规细胞学方法更客观.敏感腹水性质例数炎性细胞（％）2倍体细胞（％）异倍体细胞（％）炎性腹水急性炎症446.8±6.646.0±8.00.4±0.1慢性炎症746.0±1.674.0±18.00.5±0.8结核性158.8±1.176.0±3.80.6±0.2癌性腹水恶性间皮瘤45.8±1.066.0±11.03.4±1.6转移性肿瘤334.8±1.072.0±3.99.7±1.0对炎性和癌性腹水的正确诊断率炎性腹水癌性腹水常规细胞学检查88%84%

4、DNA定量分析100%92%细胞DNA定量分析的其它用途•使用细胞DNA定量分析对消化道、泌尿道、口腔及咽喉的脱落细胞进行肿瘤的诊断也已经获得令人满意的结果•乳腺包块和甲状腺包块的细针穿刺物也是DNA定量分析的合适标本核酸检测技术基本概念定义：通过检测与疾病相关的DNA或RNA来检测和诊断疾病简史：核酸检测技术是分了诊断领域中的重要组成部分，经历了前多聚酶链（PCR）期，PCR期和后PCR期。Jiff核酸技术的发展过程分期吋段主要技术平台前PCR期1976-1985核酸杂交技术PCR期1985-1995PCR扩增

5、技术后PCR期1995-今DNA芯片等高通量技术最活跃的几人领域：•传染病和感染性疾病◊各种病原的检测、耐药基因检测及分子流行病学调查•血液病学和肿瘤学◊早期诊断、确诊、转移和复发的监测，预警，预后推测、耐药基因推测及化疗效果评估等•遗传病◊家谱分析、诊断及遗传趋势分析等•鉴定试验◊亲缘鉴定、移植物抗宿主免疫反应监测，刑事证据学等。多聚酶链反应一PCR基本原理：多聚酶链反应是一项根据DNA互补原理，使用耐热DNA聚合酶催化由引物起始链延长反应而复制新DNA分子的体外核酸扩增技术。PCR反应的精髓是在短时间内扩增出

6、大量的特定DNA片片I业匚断。一个拷贝数的目的基因30个1~3小时十亿个扩增产物PCR的使用引起病原学检测的一场革命：•引起人类感染的病原仅有5%可以通过人工培养等常规方法进行检测•以PCR和杂交技术为代表的分子诊断技术有望检测其它95%的感染病原PCR是目前检测感染病原的最敏感技术样本中病原的数目110,1001,00010,00095%80%60%酶联免疫或探针敏感性比例(%)人类乳头状瘤病毒的检测人类乳头状瘤病毒人类乳头状瘤病毒(Humanpapillomavirus,HPV)是一组包括100余个亚型的DN

7、A病毒，很多亚型与皮肤粘膜的良性及恶性病变有关。在人类生殖道已经分离和鉴定出40余个亚型，其中至少有15个亚型被确定与宫颈癌密切相关，他们被称为高危人类乳头状瘤病毒(HighRiskHPV,简称HRHPV)人类乳头状瘤病毒与宫颈癌人类乳头状瘤病毒是最先被确定的致癌病毒之一，主要引起生殖道和肛门癌。持续携带HRHPV诱发宫颈癌的病理学现象已经被广泛接受，而分子检测技术的使用证实5〜20%女性携带HRHPV,35岁以上的女性多为持续携带，而HRHPV也与宫颈癌恶性变的程度密切相关。因此，在英、美等发达国家，HPV的检

8、测己经成为宫颈癌普查常规的一部分，HRHPV的检出被作为宫颈癌预警、监测、早期诊断及病情进展的重要指标。高危亚型人类乳头状瘤病毒与宫颈癌细胞形态分期的关系细胞形态分形例数HPV(%)HRHPV(%)HRHPV：LRHPV正常和良性变(CINO)402196(48.8)150(83.3)5:1轻度不典型增生(CIN1)199133(66.8)109(8&6)8:1重度不典型