药学毕业论文不同产地山药rdnaits区序列的比较

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1、XX大学毕业论文不同产地山药rDNAITS区序列的比较姓名:2014年6月25日不同产地山药rDNAITS区序列的比较【关键词】山药;,,ITS区序列;,,聚合酶链反应摘要:目的分析怀山药与其它产地山药的rDNAITS区序列的差异,为山药的基源鉴定和詁质评价提供分子依据。方法采用PCR扩增纯化后直接测序的方法测定不同产地山药的rDNA基因ITS核甘酸序列并作序列同源性分析。结果8种产地山药的ITS1片段长度均为165bp,ITS2片段长度均为158〜160bp,5.8S片段长度为均为159bp。8种不同产地的山约ITS1和ITS2区分别有6个和9个碱基变异。结论利用IT

2、S区序列的差异鉴别不同产区的山药提供了依据。关键词:山药;ITS区序列;聚合酶链反应ComparisonofRibosomalDNAITSSequenceofRhizomaDioscoreaeinDifferentGeographicalRegionsAbstract:ObjectiveTodistinguishDioscoreaeuoppositaThunb・fromdifferentgeographicalregionsbycomparingRibosomalDNAITSsequence.MethodsDirectPCRsequencingwasusedtodete

3、ctthehomologyofrDNAITSsequence.ResultsEightDioscoreaeoppositaThunb.wereobtainedfromdifferentgeographicalregionsbyPCRtechnology.SequenceanalysisshowedthatITS1was165bp,ITS2was158〜160bpand5.8Swas159bp.Therewere6varioussitesinITS1and9varioussitesinITS2・Conclusionltprovidesthebasisforidentify

4、ingDioscoreaeoppositaThunb.fromdifferentgeographicalregionsaccordingtothevariationoftheITSsequences.Keywords:DioscoreaeoppositaThunb.;ITSsequences;PCR山约RhizomaDioscoreae为薯预科植物薯预DioscoreaoppositaThunb.的块茎,屈多年生缠绕草本植物。是我国最大众化的传统保健食品之一,除了少数热带地区外,几乎各地都有栽培,可分山地生、平地生、也冇野生的。山药集中产于河南、陕西、山东等地区;在诸多

5、品种中,以河南的“怀山药"最负盛名,其品质优良,既是食用的佳蔬,乂是入药的道地的材,为历史上著称的“四大怀纱9之一。山药具冇补脾养肺、生津益肺、补肾涩精的功能,主治脾虚食少、久泻不止、肺虚喘咳、肾虚遗精、带h丿求频、虚热消渴等症。目而,道地药材多为栽培种植生产,曲于种种原因,这些品种之间质量参差不齐,各品种的种质资源在形态特征、产量、质量及抗病性等方面均有较大差异,各品种间遗传背景、亲缘关系诣不清楚,传统的优良品种很难确定。长期以来的这些和关研究大多限于形态、化学、药效等方而,多停留在利用现代仪器分析技术对道地药材质量优劣进行比较和评价,很少从生物学水平上,特别是从分

6、了生物学水平上对道地药材的形成机理进行深入的探讨。因此,为了鉴定和评价道地药材品种内性状的变异和品质差异及不同种质之间的亲缘关系,克服用传统鉴别方法不易区分品种的缺点,亟待分子生物学技术对山药种质资源进行研究。随着DNA分析技术的发展,PCR测序方法已经被应用到了屮药品种鉴别领威[1],在釆用传统形态学、化学方法很难鉴别不同产地的山药情况卜,虽然rbcL,ISSrRNA序列标记不失为一种有效的分子手段,但是由于叶绿体rbcL和核rDNA基因比较保守,进化速率远低于叶绿体赖氨酸一tRNA内含子成熟酶基W(matK)和核糖体非编码转录区(ITS)基因[2]高等梢•物核糖体D

7、NA(rDNA)的每个重复单位从亍端开始,包括外转录间隔IK(externaltranscribedspacer,简称ETS)>18S基因、第一内转录间隔区(internaltranscribedspacer1,简称ITS1)、5.8S基因、第二内转录间隔区(ITS2)和26S基因,重复单位之间为基因间隔[x(intergenicsoacer,简称IGS)称为非编码区(non・transcribedspacer,NTS)。rDNA的编码区序列(18S、5.8S和26S基因)选择压大,属高度保守区。非编码区序列(如IGS,NTS)是高变区,

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