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1、不同山药种质资源的尿囊素含量比较研究福建中医药2011年4月第42卷第2期FujianJournalofTCMApril2011.42(2)?方与药?不同山药种质资源的尿囊素含量比较研究黄玉仙1,2易骏,昊岩斌,郑燕枝,雷伏贵,华树妹,栗康迳'(1.福建农林大学作物遗传育种与综合剁用教育部重点实验室,福建福州350002;2.福建生物工程职业技术学院,福建福州350002;3.福建教育学院理科部,福建福州350001;4.福建中西医结合研究院,福建福州350108;5.三明市农业科学研究所,福建沙县365509)摘要:目的评价不同山药种质资源的品质.方法HPLC法
2、色谱柱:Daiso斛SP-ODS.BPC∞柱(5岫,250×4.60mm),流动相5%～1o%甲醇溶液;检测波长:224nnl;流速:1mIJmin;柱温:25℃.结果尿囊素在0.10r7～3.852ug范111内与峰面积呈良好的线性关系,尿囊素的平均加样回收率为105.1%,KSD为2.7%(n=6).尿囊素含量在2%以上的种质资源来自河北保定山药(2.057%);含量在1%～2%之间的是山东兖州(1.389~,6),山西平遥(1.222%),江西上饶(1.065%);来自福建的山药尿囊素含量均在1%以下,其中福建长汀和福建建瓯山药尿囊素含量较高(分剐为0.64
3、9%和0.552%).结论HPLC法可用于山药中尿囊素含量的测定;不同种质来源的山药品质差异较大.提示临床用药应注意不同的种质来源,同时也为山药的引种提供依据.关键词:种质资源;山药;尿囊素;高效液相中图分类号:R284.1文献标志码:A文章编号:1000—338X(2011)02--0O50l一03山药为薯蓣科植物薯蓣(DioscoreaoppositeThtmb.)的干燥块茎,有健胃,补肺,固肾,益精的功能,主治脾虚泄泻,久痢,虚劳咳嗽,消渴,遗精等证[i】.历代本草记载药用山药分布较广,除了少数热带地区外,几乎各地都有栽培[z1,但不同产地山药的品质差异较大
4、,影响山药的临床用药.药材的品质不仅与产地的生态环境,采收季节和加工方法等有关,而且还与药材种质密不可分【.因此,本文在同一生态环境条件下.对相同采收时间和加工方法的不同种质资源山药开展品质评价,为山药临床用药和引种提供依据.尿囊素是山药的活性成分之一,具有修复上皮组织,促进皮肤溃疡和伤口愈合,生肌等作用,与山药的功效密切相关,在山药中含量较高,常作为活性成分评价山药品质】.1材料和仪器1.1材料1.1.1试药尿囊素对照片(中国药品生物制品检定所,批号l1150I1--200202),甲醇(色谱纯),其它试剂均为分析纯.1.1.2药材1.1.2.1来源本实验是在我
5、们对实验材料进行了分子标记研究分析的基础上选取的.确保植物基源收稿日期:2010-11-22基金项目:福建省自然科学基金(2010J07370):福建省教育厅科技项目资助(JA10278)作者简介:黄玉仙(196),女,在读博士研究生,副教授,主要从事作物遗传育种研究.通讯作者:粱康迳(1954一),男,研究员,博士生导师,主要研究作物遗传育种.E-mail:lia,w,kj._2005@126.c0m相同.2009年6月引种在福建省三明市农业科学研究所试验田.经福建农林大学张大鹏教授鉴定为薯蓣科植物薯蓣(Dioscoreaoppos~eThtmb.).1.1.2
6、.2加工于2009年12月采收块茎,除去非药用部分,水清洗干净,切成厚约0.5cm薄片,并迅速在60℃条件下干燥至恒重,置真空干燥器保存.1.2仪器高效液相色谱仪(DAD检测器,A#lent一12oo,美国Agilent公司),MIUI—Q型超纯水器(厦门精艺兴业科技有限公司),KQ一500E型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司),电子天平(AR2130,美国奥豪斯),微量天平(CP225D,德国赛多利斯).2方法和结果2.1色谱条件色谱柱:DaisogelSP—ODS—BPCls柱(5m,250nlln×4.60mm);流动相:5%～1O%甲醇溶液;洗脱程序:
7、5%～1O%甲醇溶液梯度洗脱10min;检测波长:224nln;流速:0.5mL/min;进样量:l0L;柱温:25℃.参照《中华人民共和国药典)2OLO年版一部附录ⅥD项高效液相色谱法[刚,分别吸取对照品溶液与供试品溶液各1OL,注入高效液相色谱仪.2.2对照品溶液制备精密称取干燥恒重舶尿囊素对照品1.07rag,置5mL容量瓶中,用甲醇溶解,定溶至刻度,摇匀.浓度为0.214ms/mL.HPLC分析,结果见图1和图2.从图1和图2可见,尿囊素与其它组分能达到较好分离.2.3供试品溶液制备取不同种质资源的山药粉末(过40目筛)约O.5g,精密加入70%甲醇25L
8、,称重,摇
