药学毕业论文甘肃不同产地当归its序列分析

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1、XX大学毕业论文甘肃不同产地当归ITS序列分析2014年6月25日甘肃不同产地当归ITS序列分析作者：楚惠媛，金建文，李海龙，李沛清，陈彻，安方玉【摘要】目的建立甘肃产当归功效的分子系统学基础，为甘肃产当归“道地性”提供分子依据。方法采用PCR技术获得ITS基因，进行测序，经软件进行统计分析,计算各样本间的遗传距离。结果甘肃岷、漳两县当归ITS序列差异极小，在0.0000〜0.0083之间，岷县5个样品与漳县DG9号样品在586位都为C,589位都为T,而漳县其他3个样品在这2个位点分别为T和Go结论

2、ITS序列特征可以作为当归种间鉴别的有效分子标记，当归ITS序列第586位和589位2个位点碱基可能成为“岷当归"的碱基鉴别位点。【关键词】当归；ITS；序列分析；道地性；廿肃Abstract：ObjectiveToestablishthebasisofmolecularsystematicsofAngelicafromdifferentareasofGansuprovincesoastooffermolecularbasisofidentificationGansu-producedAngelica

3、withgeoherbalism.MethodsTheITSgeneofAngelicawasobtainedbyPCRandsequencedtobeanalyzedbyDNAStarsoftwaretocalculatethegeneticdistanceamongdifferentspecimens・ResultsTheITSsequenceofAngelicabetweenMinCountyandZhangCountyofGansuProvinceshowstrivialdifferences

4、withtherangeof0.0000〜0.0083.All5MinCounty-producedAngelicaspecimenshavesamebasesat586sitewith“C"and589sitewith“T"withZhangCounty-producedAngelicaDG9specimen,whereasthe586siteand589sitebasesoftheother3ZhangCounty-producedAngelicaspecimensare"TPand“G"resp

5、ectively.ConclusionTheITSsequencecharacteristicscanberecognizedaseffectivemolecularmarkerofAngelica,andboth586sitebaseand589sitebaseoftheITSsequenceofAngelicacanberecognizedasidentificationbasesofMinCounty-producedAngelica.Keywords:Angelica；internaltran

6、scribedspacer；sequenceanalysis；gcohcrbalism；Gansu当归为伞形科多年生草本槓物当归［Angelicasinensi（Oliv.）Diels］的干燥根。我国当归主产于甘肃东南部，以岷县产量多、质量好，其次为云南、四川、陕西、湖北等省，均为栽培。甘肃产的当归，个大质优，称嗪好或洒归”，销往全国并大量出口。药材道地性研究已经成为中医药科研的重要课题，但由于道地药材与非道地药材在形态和生药上基本一致，所以传统方法亦不能满足道地药材的现代研究。道地药材是一个地域性现

7、象，其产生除了与栽培方法、生态环境、加工方法有关外，还与物种居群的遗传特异性有关。在植物系统与进化研究中，核酸分子量是最基本的进化单位，能反映进化本质；核酸的基本序列是一元变化的，通常为点突破,趋同效应极小，以核酸分子为指标确定的系统化关系不受主观因素彫响。所以，近些年分子鉴定技术在屮药研究屮不断应用，此方法也已成为屮药材道地性研究的重要手段。ITS序列作为种以下分子鉴定的重要序列，其在中药道地性研究中也得到了广泛研究。1材料与方法1」药材来源本试验所用药材均为2005年采自廿肃省岷县及漳县地区农民种

8、植的当归种子，自然干燥后备用,经甘肃中医学院张西玲教授鉴定。见表1。表1甘肃不同产地当归药材（略）1.2ITS序列扩增以已经发表于genebank中的当归ITS序列为标准,设计一对引物，引物序列为:ITS正,5'-TTGTCGAATCCTGCAATAGC；ITS反，5'-TCGAAGCGCACAGAGTATG（引物由上海生物工程技术服务有限公司合成）。PCR反应采用上海生物工程技术服务有限公司提供的即用型PCR扩增试剂盒,反应体系为50pL,其中2xMa