酶联法检测hbv抗-hbc假阳性分析

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1、酶联法检测HBV抗-HBc假阳性分析孙桂利（牡丹江心血管病医院检验科157000）【摘要】目的：鉴别并纠正酶联免疫吸附法（EUSA）检测乙型肝炎抗-HBc过程中出现的假阳性结果。方法:在乙型肝炎“两对半”临床检测标木中随即挑选抗-HBc阳性的标木620份,分别用科华公司和荣盛公司的试剂（均为ELISA法）复查抗-HBc。结果:在620份标木中用科华公司的试剂检测到抗-HBc阳性标木482份，用荣盛公司的试剂检测到抗-HBc阳性标木498份，二者符合率为94.8%。其中114份标木用两种试剂复查后抗-HBc均为阴性。结论:用EUSA竞争法检测抗-HB

2、c,由于非特异吸附和操作等原因易山现假阳性结果，尤其对于抗-HBs和抗-HBc同时阳性的标木应该复查抗-HBc。【关键词】酶联免疫吸附实验抗-HBc乙型肝炎假阳性【中图分类号】R446.61【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2014）08-0162-02我国是乙型肝炎病毒（HepatitisBvirus,HBV）感染高发IX,据佔•计约1.2亿人携带HBV病毒［1］。HBV感染人体后血清会山现乙型肝炎病毒表面抗原阳性，患者血清中一般会同时出现乙型肝炎病毒核心抗体（抗-HBc）阳性。若患者从HBV感染状态中恢复，一些患者血清中抗-HBc

3、将伴随HBsAg消失；另一些患者则HBsAg消失，但核心抗体仍保持阳性，但血清中会同时出现乙型肝炎病毒表面抗体阳性或（和）乙型肝炎病毒e抗体阳性。但临床上少数患者在检测HBV标志物时往往会出现血清单项抗-HBc阳性，目前对血清单项抗-HBc阳性的临床意义仍不完全清楚。笔者对2010年5月至2012年9月间620份抗-HBc阳性的标木进行了复查，现报告如下。1材料与方法1.1临床资料我院2010年5月至2012年9月间门诊及住院患者620份抗-HBc阳性的标本。1.2试剂HBs-Ag、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc常规批量检测试剂盒均

4、购自科华生物技术有限公司。HBs-Ag、抗-HBs、HBeAg检测试剂盒为“夹心法”，抗-HBe和抗-HBc检测试剂盒为“竞争法”。抗-HBc复查试剂盒分别购于科华生物技术有限公司和上海荣盛生物技术有限公司，为“竞争法”。1.3方法常规检测：采集静脉血，在标本凝固后离心(3000g,5min)，乙肝“两对半”五项指标同吋批量检测，HBs-Ag、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc五块板条冋时加入待检血清，标本全部加入约需30min，然后再加入酶标记的相应抗体，即酶标抗体的加入滞后于血清标本约30min。其余步骤严格按说明书操作。抗-HBc

5、复查实验：每次“两对半”常规检测后，挑选抗-HBc阳性的标本，高速离心(5000g,10min),然后分别用科华生物技术冇限公司和上海荣盛生物技术冇限公司的试剂盒复查抗-HBc,严格按说明书操作。基本保证血清与酶结合物同吋加入。1结果620份标本分别用两种方法复查抗-HBc的结果.在620份标本中用科华公司的试剂检测到阳性标本482份，用荣盛公司的试剂检测到阳性标本498份，二者符合率为94.8%。其中114份标本用两种试剂复查后均为阴性，占18.4%。尤其是“两对半”结果为HBsAg(-)、抗-HBs(+)、HBeAg(-)、抗-Hbe(+或-)

6、、抗-HBc(+)模式的标本，抗-HBc假阳性率高达51.0%。2讨论HBV病毒于1998年被国际病毒命名委员会正式划归到新的肝DNA病毒科,属正嗜肝病毒属，它是乙型病毒性肝炎的病原体。在我国一般人群中HBsAg阳性率为9.1%。HBV基因组是不完全闭合环状双链DNA,长链为负链，约含3200bp,完全闭合。短链长度可变，呈半环状［2】。抗-HBc并非保护性抗体，它可随HBV病毒慢性感染而长期存在。对一些感染过HBV而恢复的个体，其血液中抗-HBc会存在数年，并往往伴随抗-HBs阳性或（和）抗-HBe阳性。在临床上少数个体在检测HBV标志物时往往会

7、出现血清单项抗-HBc阳性，一些学者认为血清单项抗-HBc阳性是个体既往感炎HBV却未能产生抗-HBs所致，近来研究表明血清单项抗-HBc阳性是HBV隐性感染的一•种表现。酶联免疫吸附竞争一步法是检测血清抗-HBc最常用的方法，操作简便，反应时间短。其反应原理是加入待测标本中的抗-HBc和HRP标记的抗HBc竞争结合微孔板上固相抗原，通过底物显色。在临床检验过程中，标本检测通常是成批的，医院每天检测乙肝五项患者都在百人以上，因此在实际操作中加入第一个标本和加入最后一个标本，即使是熟练的检验人员，加样吋间相隔一般也在20min以上，另外加入试剂及混匀

8、等都冋样存在吋间差异，这都会造成假阳性结果。国内各厂家试剂盒灵敏度不同，检出阳性率也不尽相冋，可能导致了临界值标本产生阳性