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时间:2018-11-29
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1、1万方数据2万方数据目录英文缩略词表……………………………………………………………1中文摘要……………………………………………………………2英文摘要………………………………………………………………4前言………………………………………………………………………6正文第一部分实验材料……………………………………………………………8实验方法……………………………………………………………10实验结果……………………………………………………………17实验讨论……………………………………………………………20实验结论……………
2、………………………………………………22第二部分实验材料……………………………………………………………23实验方法……………………………………………………………25实验结果……………………………………………………………30实验讨论……………………………………………………………32实验结论……………………………………………………………37全文结论……………………………………………………………………38参考文献……………………………………………………………………39致谢………………………………………………………………
3、……43文献综述……………………………………………………………………443万方数据英文缩略词表PI3Kphosphoinositide3-kinase磷脂酰肌醇3-激酶 PKBproteinkinaseB蛋白激酶B SCISpinalcordinjury脊髓损伤 ASAstrocyte星形胶质细胞 CSPGsChondroitinsulfateproteoglycans硫酸软骨素蛋白多糖 TGF-β1Transforminggrowthfactor-β1转化生长因子-β1 CNSCentralnervoussys
4、tem中枢神经系统 BBBBasso-BeattleBresnahanlocomotorRatingscaleBBB评分 LY294002LY294002[2-(4-morpholinyl)-8-phenyl-4H-1-benzopyran-4-one] 2-(4-吗啉基)-8-苯基-4氢-1-苯并毗喃-4-酮PBSPhosphatebufferedsolution磷酸盐缓冲液 GFAPGlialfibrillaryacidicprotein质纤维酸性蛋白 HEHematoxylinandeosin苏木素和伊红
5、DMSODimethylsulfoxide二甲基亚砜 EDTAEthylenediaminetetraaceticacidsodium乙二胺四乙酸二钠 BSAbovinefibroblastgrowthfactor牛血清白蛋白 FBSfetalbovineserum胎牛血清 HRPhorseradishperoxidase辣根过氧化物酶 NF-κBnuclearfactor-κB核转录因子-κB PCNAproliferatingcellnuclearantigen增殖细胞核抗原 TBStris-buffered
6、salineTris缓冲盐溶液1万方数据LY294002对脊髓损伤后胶质瘢痕形成的影响摘要目的:使用PI3K-Akt信号通路的特异性抑制剂LY294002干预体内外脊髓损伤模型,WesternBlot方法检测CSPGs、GFAP表达量,探讨LY294002对脊髓损伤后胶质瘢痕形成的影响。方法:(1)将60只体重200~250g(200±8g)的SD大鼠,雌雄不限,随机分为3组,每组20只,钳夹法构建SD大鼠T10脊髓损伤模型,A组为假手术组,仅行椎板切除不损伤脊髓,于术后6h内行鞘内注射DMSO;B组为治疗组,于
7、损伤6h内行鞘内注射溶解于DMSO的LY294002;C组为对照组,于损伤6h内行鞘内注射DMSO溶剂,采用BBB评分标准于SCI后1、2、4周分别对各实验组动物进行后肢运动功能评估;(2)分别于损伤后1、2、4周取大鼠脊髓组织,提取蛋白,通过WesternBlot方法检测各实验组CSPGs蛋白表达水平;(3)提取新生1~2d的SD新生大鼠脑组织,利用连续差速传代法培养星形胶质细胞,取免疫组化及免疫荧光鉴定为95%以上的第三代AS细胞用于后续试验。将AS细胞种板后分成4组,A组加入LY294002及完全培养基,B
8、组加入DMSO及完全培养基,C组于TGF-β1诱导后加入含LY294002的培养基,D组TGF-β1诱导后加入DMSO及培养基,倒置显微镜下观察细胞形态并拍片。提取AS细胞蛋白,WesternBlot方法检测各实验组CSPGs及GFAP蛋白水平。结果:(1)体内试验SD大鼠T10脊髓损伤造模成功,病理显示脊髓组织明显充血,神经元变性。手术后,假手术组大鼠后肢BBB评分短时
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