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时间:2018-11-29
《survivin+sirna、hsp70双基因转染对肝癌细胞系hepg2内源survivin及hsp70表达影响》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、内蒙古医学院硕士学位论文SurvivinsiRNA、HSP70双基因转染对肝癌细胞系HepG2内源Survivin及HSP70表达的影响姓名:张荣繁申请学位级别:硕士专业:免疫学指导教师:新燕20070501缩略语英文全称Basepair中文全称碱基对一印一蛳ComplenmataryDNA3一((3一ClDl∞‘d。pq)yI)dimetb,kmm瑚i0)pIDlⅪn∞d蜘cacidDeoxyrihonudeotidetriphosphateDiethyldWoeartxraateDL—Dithiothreito
2、lMegengerRNA哳矧densitymlacrylarmmgdeleetrophoresisPolymera∞chainreactionPhenylmet]mnestdfonylfluoride_。I∞dperminute互补DNA3一(3一(胆酰胺丙基)二甲氨基】丙磺酸内盐脱氧核糖核苷三磷酸焦磷酸二乙醇=硫苏糖醇信使RNA光密度值聚丙烯酰胺凝胶电泳聚合酶链式反应苯甲基磺酰氟转每分钟Reversetranscripmse—polymemsechainscIdimdodecoylsalinere“on反转录聚
3、合酶链式反应十二烷基磺酸钠=二8l|:二二?~smallinterferiIIgRNAN。N,N’,N’一Teu'amet_hyledlylenedisminePd曲l口”glycolsorbitanmono]aurate小干涉RNAN,N,N’,N’一四甲基=乙肢三羟甲基氨基甲烷吐温一20Trishydro㈣e内蒙古医学院学位论文原创性声明郑重声明:本人所呈交的学位论文是在导师指导下,独立进行研究所取得的研究成果。除文中特别加以标注引用的内容外,本论文内容不包含其他个人或集体已经公开发表或撰写过的研究成果。对本文
4、的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人学位论文与资料若有不实,愿意承担一切相关的法律责任。论文作者签名抠萃缒泗7年∑月搿日学位论文版权使用授权书本人完全了解学院有关保留、使用学位论文的规定,同意学院保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版。学院享有发表、复制、查阅、借阅及申请专利等权利。可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。同时本人保证:毕业后发表、使用学位论文以及结合学位论文研究课题再撰写的文章,作者署名单位一律为内蒙古医学院。论文作者签名箍璋錾多甙.7年5月≯扩日
5、曙导狮币名、/超叫馘夕玉≥中文摘要目的探讨survivinsiRNA、HSP70双基因转染对肝癌细胞系HepG2内源survivin、HSFT0表达的影响,为进一步深入研究survivinsiRNA、HSP70双基因对肝癌细胞系HepG2生物学特性的影响奠定实验基础。方法1、常规培养肝癌细胞系HepG2。2、将已构建的真核表达载体(plgES2一EGFP—survivinsiRNA、plRES2一EGFP—HsIy70)用脂质体介导转染肝癌细胞系HepG2,转染72小时,收集各组细胞,利用倒置荧光显微镜观察转染
6、后的细胞,通过RT—PCR、westeril—blot检测转染后细胞中survivinmRNA、survivin蛋白及HSP70蛋白表达的变化。结果1、转染真核表达载体与转染空载体的肝癌细胞系HepG2于倒置荧光显微镜下可见绿色荧光。2、转染真核表达载体的HepG2细胞与转染空载体的HepG2细胞和未转染的HepG2细胞相比,survivinmRNA和sur-vivin蛋白表达水平降低,而HSP70蛋白表达升高。结论1、survivinsiRAN与HSP70双基因转染成功。2、survivinsiRNA能干扰HepG
7、2内源survivin的表达,HSP70能上调HepG2细胞HSP70蛋白的表达。关键词SurvivinsiRNAHSP70肝癌细胞EffectofsurvivinsiRNAandHSP70genestransfectionontheexpressionoftheendogenoussurvivinandHSPTOinhepatomacarcinomacelllineHepG2cellsObjectiveToexploreeffectofbothofsurvivinsiRNAandHSP70geneson
8、theendog—eEIOUBsurvivlnandHSP70expressioninhepatomaGⅡcinDmacelllineHepG2cellsandestab-lishexperimentalbaseforfurtherstudyingtheeffectofbothofsurvlvinsiRNAandHSPT0ge
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