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时间:2018-11-27
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1、异基因造血干细胞移植患者外周血TCRVβ亚家族克隆性增殖动态变化及其与GVHD的关系作者:贾新颜,王健民,李扬秋,陈少华,章卫平,陈莉【摘要】本研究观察异基因造血干细胞移植(alloHSCT)患者外周血T细胞受体(TCR)Vβ亚家族克隆性增殖的动态变化,分析T细胞的克隆性演变与GVHD的关系。利用RTPCR方法扩增70例次alloHSCT后患者(其中17例次出现GVHD)外周血单个核细胞中24个TCRVβ基因的互补决定区3(CDR3),PCR产物经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度,确定T细胞的克隆性。结
2、果表明:移植患者T细胞增殖一般都经历由单克隆向多克隆演变的过程,在移植后60-90天时,逐渐由单克隆转为单克隆和多克隆表达大致各占一半。120天以后,无GVHD患者大多转为多克隆性表达;而GVHD患者受免疫抑制剂和GVHD的影响,直到1年以上仍有部分呈单克隆表达趋势。GVHD患者发生GVHD或靶器官受累最明显的时候,外周血TCRVβ亚家族的表达主要呈现单/双克隆的表现,而经过免疫抑制治疗病情好转后,部分患者出现由寡克隆表达转为多克隆增殖趋势。结论:移植后早期患者尤其是合并GVHD的患者,T细胞呈克隆性增殖和T细
3、胞受体的倾向性利用;随着造血和免疫的恢复,TCRVβ亚家族表达重新恢复趋向正常的多克隆性演变。【关键词】造血干细胞移植ClonalKiicProliferativeChangeofTCRVβSubfamiliesinPeripheralBloodofPatientsTransplantedatopoieticStemCellsandItsRelationtoGVHDAbstractThisstudyicchangeofclonalproliferationofTcellreceptorVsubfamiliesi
4、nperipheralbloodofpatientsrecEIvedallohematopoieticstemcelltransplantation(alloHSCT)andtoanalyzetherelationshipbetononuclearcellsamplesfrom70cases(17GVHDpatients)undergoingalloPBCSTpatientsentaritydeterminingregion3repertoireanalysisofTcellreceptorVβgene)
5、usingreversetranscriptasepolymerasechainreaction(RTPCR).Theproductsationfrommonoclonetopolyclone.Atday60-90afterHSCT,halfofthecasesonoclonalandtheremaindersostofpatientsainedmonoclonalafteroneyearbecauseofimmunosuppressiveagentsandGVHDitself.Theperipheral
6、bloodofGVHDpatientsmainlyexpressedmonoclone/bicloneatthetimeoftargetorgandamageconspicuously,aftermedicationintervention,partialmonocloneorbiocloneexpressedTCRVβsubfamiliesiliescanreturntonormalpolycloningalongatopoiesisandimmunityinpatients.Keyopoieticstemc
7、elltransplantation;GVHD;TcellreceptorVβsubfamily;Tcellclonality;genescanT淋巴细胞的活化需要两个信号:第一信号通过T细胞受体(TCR)抗原多肽MHC复合物,此过程是受MHC限制的;第二信号是由多种共刺激分子提供。TCRβ链V区基因亚家族分布和克隆性分析是了解肿瘤性或抗原特异性T细胞以及免疫功能重建情况的重要方法。TCR在重排的过程中,不同克隆所形成的抗原受体互补决定区3(plementarydeterminingregion3,CDR3
8、)的长度和碱基序列的不同[1],决定了TCR的特异性。应用RTPCR基因扫描方法分析TCRVβ24个亚家族的CDR3长度,是目前检测T细胞克隆性的一种比较灵敏和精确的方法[2]。我们应用此法动态地观察了异基因造血干细胞移植(alloHSCT)患者外周血T细胞增殖的克隆性演变,并分析其与GVHD发生的关系。材料和方法病例选择选取我院行异基因造血干细胞移植术的急性、慢性白血病患者27
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