神经节苷脂对大鼠缺血后脑水肿脑组织中aqp4mrna表达的影响论文

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1、神经节苷脂对大鼠缺血后脑水肿脑组织中AQP4mRNA表达的影响论文【摘要】目的探讨神经节苷脂对大鼠缺血后脑水肿脑组织中AQP4mRNA表达的影响。方法线栓法复制脑缺血大鼠模型，于缺血后6h、1、3、5、7d观察模型大鼠脑组织含水量及AQP4mRNA的表达。结果手术组大鼠脑组织水含量及AQP4mRNA的表达于6h后升高，3d达高峰，较假手术组和神经节苷脂组显著升高（P0.05）。结论神经节苷脂能够降低脑梗死大鼠脑组织水含量及AQP4mRNA的表达，减轻脑水肿。【关键词】脑水肿；水通道蛋白4；神经节苷脂【Abstract】ObjectiveToo

2、bservetheeffectofGM1onexpressionofAQP4mRNAafterischemicbrainedemainrats.MethodsTheratmodelofcerebralischemicRNAinedaftercerebralischemicat6h,1d,3d,5d,7d.ResultsThebrainRNAofsurgerygroupincreasedat6handreachedthepeakat3d,theyabyreducingbrainRNA.【Keya;AQP4;GM1神经节苷脂(GM1)系细胞膜的重要成分之

3、一，在中枢神经系统中最丰富，具有促进神经再生、神经轴突生长、突触形成和恢复神经支配功能。研究表明GM1对缺血神经元具有保护作用，其机制之一为减轻脑水肿［1］。水通道蛋白（aquaporinAQP）是近年来发现的一组与水通透有关的细胞膜转运蛋白.freelm处切口，用直径0.26mm的鱼线插入颈内动脉，深度18～20mm，结扎颈内动脉。假手术组颈内动脉不插鱼线。鱼线插入组鱼线插入并固定后腹腔注入鱼线插入（10mg/kg，）以后每24h一次。1.3指标检测1.3.1脑组织含水量测定：取大鼠右侧脑组织称湿重，后于95～100℃烤箱中烘烤24h后称干重，按如下

4、公式计算脑组织含水量百分比：脑组织含水量=（湿重-干重）/湿重×100%。1.3.2AQP4mRNA的测定：分别对各组脑组织制备匀浆，采用Trizol提取脑组织总RNA,紫外分光光度仪测定RNA含量，采用MMLV试剂盒中步骤将RNA逆转录成cDNA,再将cDNA进行PCR扩增，取扩增产物进行电泳，用凝胶图像分析系统进行电泳条带光密度分析，计算AQP4产物和βactin产物光密度积分的比值，作为AQP4mRNA表达的指标。1.4统计学处理各实验组数据用±s表示，多组之间采用单因素方差分析。采用SPSS13.0统计软件进行统计学处理。2结果表1各实验

5、组脑水含量的变化（略）注：与假手术组相比，△P0.05；与手术组相比，▲P0.052.1脑组织水含量测定结果手术组脑组织水含量于6h开始升高，3d达高峰，而后下降，7d仍高于正常。GM1组与手术组比较，各时间点脑组织水含量均显著下降（P0.05），见表1。2.2AQP4mRNA的表达手术组脑组织AQP4mRNA的表达较假手术组明显升高，差异有统计学意义（P0.05），GM1组与手术组比较，各时间点脑组织AQP4mRNA的表达均明显下降，差异有统计学意义（P0.05）。见表2。表2各实验组AQP4mRNA的变化（略）注：与假手术组相比，△P0.0

6、5；与手术组相比，▲P0.052.3脑组织水含量与AQP4mRNA表达的相关分析由表1和表2分析得出：r=0.776，P0.01，提示水含量与AQP4mRNA的表达正相关。3讨论本实验采用线栓法致大鼠脑缺血，诱发脑水肿，与脑梗死后水肿形成的病理生理过程相似。脑组织水含量于6h开始升高，3d达高峰，而后下降，7d仍高于正常。手术组各时间点脑组织水含量均高于假手术组（P0.05）。水通道蛋白是一个高选择性、低活化能转运水分子的跨膜通道蛋白家族。目前已鉴定出至少11种水通道蛋白,依次命名为AQP0～10。AQP家族可分两类:一类只允许水分子通过,属于选择

7、性水通道,包括AQP0、1、2、4、5、6;另一类AQP则同时允许水分子和其他的中性小分子(如甘油,尿素)通过,包括AQP3、7、9。AQP4广泛存在于脑星形胶质细胞膜的足板、蛛网膜下隙、血管周围的胶质细胞、室管膜细胞、脉络丛上皮及下丘脑的视上核、室旁核及海马齿状回和小脑。由于星形胶质细胞是血脑屏障(BBB)的重要组成部分,.freelRNA在缺血后第1天表达轻微上调,第3天达到高峰,第7天仍处于较高水平,与磁共振监测的脑水肿变化相一致，从而说明了AQP4参与了缺血后脑水肿的形成。国内对脑卒中后脑水肿与AQP4表达的研究发现［68］,AQP4蛋

8、白的表达和脑水含量呈正相关,AQP4表达上调是形成细胞内水肿的关键因素,在脑缺血/再灌注损伤中