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1、茶多酚联合重组人血管内皮抑制素(恩度)对人肺腺癌A549抑制作用研究论文.freelanlungadenocancergroanEndostatinInjection(Endostar).Toofferthefoundationolecularmechanism.MethodsAfterculturedandpropagation,humanlungadenocancerofA549plantedonBALB/cnudemice.Teapolyphenols,Endostaranddrugbinationsorfu
2、nctioninedethods.ResultsThetumorcontrolrateofteapolyphenolsgroup,Endostargroupandtorallerthanthatofmodelgroup(P0.01).TheaveragetumorallerthanthatofteapolyphenolsgroupandEndostargroup(P0.05).ConclusionTeapolyphenols,.freelanlungadenocancer,butdrugbinationhadnos
3、ignificantinhibitioneffect.Keyanendostatininjection(Endostar)；drugbination；humanlungadenocancerofA549恩度(Endostar)是国内首例重组人血管内皮抑制素,它是通过抑制血管内皮细胞迁移来抑制肿瘤新生血管形成。恩度联合NP(长春瑞滨加顺铂)化疗方案治疗初治或复治的Ⅲ/Ⅳ期非小细胞肺癌有一定疗效。近年来研究证明,茶多酚对肿瘤血管生成有明显的抑制效果,其作用机制是调控血管生成因子表达1-6。为探讨重组人血管内皮抑制素与茶
4、多酚联合应用抗肿瘤效应,并深入研究茶多酚抗肿瘤新生血管生成机制,我们在既往研究基础上,复制了移植性人肺腺癌(A549)肿瘤动物模型,观察了单用茶多酚、恩度以及茶多酚联合恩度对A549肿瘤抑制率,探讨联合用药的增效作用。1实验材料1.1动物与细胞系BALB/C-nu裸鼠40只,6～8周龄,SPF级,雌雄各半,中国医学科学院肿瘤研究所实验动物室繁育并提供,生产合格证号：京动许字(1999)第015号；动物合格证号：SCXK京2004-0006,在动物实验中心屏蔽系统辅以洁净层流柜环境中饲养。人肺腺癌(A549)细胞系,
5、中国医学科学院肿瘤研究所检测中心常规保存并提供。1.2药物茶多酚系江西绿康天然产物有限责任公司惠赠,纯度98%；恩度由烟台麦得津生物工程股份有限公司惠赠,批号20060903。1.3仪器超净工作台系苏州宏瑞净化科技有限公司生产(型号：SCEM培养液培养,细胞长满单层后用0.25%胰蛋白酶消化,培养液吹打、离心,收集细胞用PBS稀释,调细胞浓度至1×107个细胞/mL,每只小鼠以0.2mL接种于右腋皮下,肿瘤长至体积约为1000mm3时移植。2.2造模及分组选择生长状态良好、肿瘤无破溃的荷瘤裸鼠,断颈处死,在净化工作
6、台内,无菌条件下完整剥离瘤结,用生理盐水洗去血渍,剪开瘤结,清除中心坏死组织,充分匀浆制成肿瘤细胞悬液,并加生理盐水稀释细胞数至1×107/mL。取细胞悬液0.2mL,在30min内分别接种于裸鼠右腋窝皮下。10d后肿瘤体积约在100～300mm3之间时(40只裸鼠造模全部成功),按性别、肿瘤体积大小随机分模型对照、茶多酚、恩度、茶多酚加恩度组与茶多酚加1/2剂量恩度5组,每组8只,称重标号。2.3给药模型对照组：生理盐水每天0.2mL/10g腹腔注射；茶多酚干预组：茶多酚每天按20mg/kg(生理盐水配制成1mg
7、/mL)给药,每天0.2mL/10g腹腔注射；恩度干预组：恩度每天按3mg/kg(生理盐水稀释成0.15mg/mL)给药,每天0.2mL/10g腹腔注射；茶多酚加恩度组：茶多酚每天按20mg/kg(浓度为2mg/mL)给药,恩度按每天3mg/kg(浓度为0.3mg/mL)给药,每天各0.1mL/10g腹腔注射；茶多酚加1/2剂量恩度组：茶多酚每天按20mg/kg(浓度为2mg/mL)给药,恩度每天按1.5mg/kg(浓度为0.15mg/mL)给药,每天0.1mL/10g腹腔注射。分组当天开始给药,每天1次,连续14
8、d。2.4计算方法药物处理前、处理后每4d用毫米游标卡尺测量肿瘤长、宽最大垂直直径。按如下公式计算肿瘤体积：肿瘤体积(mm3)＝(肿瘤长径×肿瘤短径2)/2。用药结束后2d处死裸鼠,取出肿瘤,称重。按公式计算肿瘤抑制率：抑瘤率(%)＝(对照组平均瘤重－治疗组平均瘤重)/对照组平均瘤重×100%。2.5统计学方法采用SPSS13.0统计软件进行数据处理。干预治
