midkine在食管鳞癌中的表达及其与微血管密度的关系论文

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1、Midkine在食管鳞癌中的表达及其与微血管密度的关系论文王琼，赵永年，刘钧，朱治键【摘要】目的研究MK在食管鳞癌中的表达及与肿瘤血管形成的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测45例食管鳞癌组织中MK的表达，同时以CD34标记微血管内皮细胞测定微血管密度（microvesseldensity，MVD）。结果45例食管鳞癌组织中MK阳性表达率为77.8%，MK阳性的食管鳞癌组织MVD为40.43±6.27，MK阴性的食管鳞癌组织MVD为31.34±3.89.freelousCellCarcinomaandCorrelationidkineinesophagealsquamouscellc

2、arcinomaandtherelationtoangiogenesis.MethodsAImmunohistochemicalSPtechniqueesophagealsquamouscellcarcinoma，Microvesseldensity（MVD）inedinendothelialasCD34.ResultsPositiveMKImmunostaininga，MVDapositiveforMKanegativeforMK(P＜0.01)．ConclusionOverexpressionofMkinesophagealcarcinoma,andcorrelationa.Key

3、a;Midkine;Angiogenesis0引言近年来，有报道Midkine(MK)对肿瘤新生血管生成具有明显的调控作用1。在国内，MK与食管鳞癌血管生成的有关报道较少。我们在对贲门癌血管生成及食管癌MK观察的基础上2,3，应用免疫组化方法检测45例食管鳞癌组织中MK表达及与微血管密度的关系，初步探讨MK与血管生成的可能关系。1资料与方法1．1资料收集川北医学院附属医院病理科2003年1月～6月间具有完整临床病理资料的手术切除食管鳞癌45例。男性35例，女性10例，年龄38～72岁（平均57.9岁）。组织学上：高分化鳞癌17例，中等分化22例，低分化6例。术前均无放疗、化疗及其他治疗

4、史。另选10例正常食管组织作对照研究。1．2方法1．2．1试剂羊抗人MK单克隆抗体及试剂盒购自美国SantaCrue公司，鼠抗人CD34单克隆抗体及试剂盒购自福州迈新公式。1．2．2免疫组化染色方法将原病理常规石蜡包埋的蜡块作4μm切片，每例作连续切片3张，分别作HE染色、MK，CD34免疫组织化学SP法染色。各组织切片常规脱蜡及水化后，依次按说明书完成免疫组化染色各步骤。所有切片均在同一实验室，由同一技术人员使用同一批号试剂完成免疫组织化学染色。用已知阳性对照片作阳性对照，用PBS代替一抗作阴性对照。1．3结果判断MK阳性判断：凡细胞质和/或细胞膜出现清晰的棕黄色染色的细胞即为阳性细

5、胞。结果以阳性细胞所占百分比表示。无MK抗体免疫反应细胞存在为阴性（-），MK抗体免疫反应细胞数≤30%为弱阳性（+），MK抗体免疫反应细胞＞30%为强阳性（++）。每张切片随机选取5个代表性的视野计数100个细胞。肿瘤MVD测定方法：按K蛋白表达与各临床病理指标间的关系处理采用χ2检验，MVD与临床病理指标间的关系处理采用方差分析。2结果2．1食管鳞癌组织中MK蛋白的表达特征与MVD的计数和分布特征在正常食管黏膜组织及癌旁组织中未见MK蛋白表达或仅见微弱表达，而在食管鳞癌中明显表达，主要位于胞质和胞膜上（图略）。45例食管鳞癌中35例为阳性，表达率为77.8%，其中14例为强阳性。食

6、管鳞癌细胞外间质中尚见纤维组织、小血管内皮细胞及弹力膜着色。血管密集处MK表达较高。食管鳞癌组织中血管内皮细胞阳性染色主要位于癌灶边缘（图略），且在肿瘤浸润前缘血管密度高于其他区域，MVD均值为37.31±6.89。2．2食管鳞癌组织中MK蛋白表达及MVD与临床病理的关系，见表1。表1MK的表达及MVD与食管鳞癌的临床病理的关系（略）2.3食管鳞癌组织中MK蛋白表达与MVD的关系MK表达阳性的食管鳞癌组织平均MVD为40.43±6.27，MK表达阴性的食管癌组织MVD为31.34±3.89，F值为21.5，两者有显著性差异(P＜0.01)。3讨论中期因子（MK）是一个新发现的肝素结合性

7、生长因子，已有报告指出，在KmRNA高水平表达,可能参与肿瘤发生、演进、生长及转移过程1,5,6，并且有人研究发现，中期因子对肿瘤新生血管的生成具有明显的促进作用7,8。我们在前期研究中发现，MK在食管鳞癌中高表达，表达率为77.8%。MK蛋白的表达与食管鳞癌的淋巴结转移无相关性（P＞0.05）；与肿瘤分化程度密切相关（P＜0.01）,与癌浸润深度相关（P＜0.05）。分化高与浸润深的食管鳞癌中表达高。这在一定程度上说明MK参与食管鳞癌的形成，