通腑法开通玄府对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤脑含水量的影响

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1、通腑法开通玄府对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤脑含水量的影响作者：胡建芳　余志辉　汪峰　黄培新　尤劲松【摘要】目的研究通腑醒神胶囊（简称TFXSJN，下同）通腑法开通玄府对大鼠急性局灶性脑缺血再灌注损伤模型脑含水量的影响。方法采用线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞模型,2h后拔线实现再灌注损伤，于拔线后1，3d及7d不同时间点观察神经功能评分、大鼠脑含水量及脑组织病理的改变。结果造模后模型组及治疗组大鼠的脑含水量在1d时均明显升高，与假手术组及正常组相比有显著性差异（P<0.05），3d时脑含水量最高，7d时基

2、本恢复正常，与假手术组及正常组相比无明显统计学差异(P>0.05)。而治疗组在3d时的脑含水量明显低于模型组，差异具有统计学意义(P<0.01)；而TFXSJN治疗后能有效降低模型鼠1，3d及7d时的神经功能缺损评分；明显减轻脑组织病理损伤程度。结论TFXSJN通腑法开通玄府能减轻大鼠急性局灶性脑缺血再灌注损伤的脑含水量，减轻脑组织损伤程度，从而减轻神经功能缺损症状。【关键词】局灶性脑缺血；缺血再灌注损伤；通腑法/中医药疗法；玄府　　脑水肿是缺血性中风早期常见的病理反应，其严重程度和持续时间与脑

3、缺血的预后有着密切的关系，严重者可导致颅内高压、脑疝的形成，甚至死亡。对于脑水肿的防治，目前常用的方法主要有脱水、激素、白蛋白等预防和治疗，但会出现水电解质平衡紊乱、低血容量、肾功能损害、反跳等一系列并发症［1］。研究认为以通腑法为主的治疗方法可以减轻脑水肿，起到与脱水药类似的效果，保护受损的脑细胞［2，3］。为了进一步探讨通腑法对缺血性脑水肿的治疗作用，我们建立了大鼠急性局灶性脑缺血再灌注损伤模型，观察TFXSJN通腑法对该模型大鼠脑水肿的影响，把通腑法与中医的玄府理论相结合，用玄府理论来阐释通腑法治疗中

4、风的实质内涵，有助于中风病临床疗效的提高和中医理论的创新及现代化。　　1材料与方法　　1.1试剂及仪器　　10％水合氯醛。白炽灯、眼科剪、眼科镊子、手术剪、直径0.22～0.28mm的渔线、0－4外科缝线、微动脉夹、微量精密天平仪、烘干箱等。　　1.2药物　　通腑醒神胶囊为广东省中医院自制药剂，由番泻叶、虎杖、人工牛黄、天竺黄、栝蒌仁等药物组成。　　1.3动物分组及给药　　选用健康雄性Sprague－Dal）或者蒸馏水2ml，上、下午各1次。各组动物如有死亡应及时补充。　　1.4大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模

5、型的建立　　大鼠大脑中动脉闭塞（Middlecerebralarteryocclusion，MCAO）模型制作参照koizumi线栓法［4］，从右侧颈总动脉（moncarotidartery，CCA）进线，栓线采用尼龙渔线，长约4cm，直径约0.26mm，术后2h拔出线栓约1.5cm形成缺血再灌注损伤。大鼠术中及清醒前均给予白炽灯（100，其余操作均同手术组。　　1.5观察指标及检测方法　　1.5.1脑含水量的测定　　模型组、TFXSJN组及假手术组于术后第1天、第3天、第7天时间点各取6只大鼠，同时取正常

6、大鼠6只做对照，评分后断头取脑，去除脑表面的硬脊膜、小脑及脑干部分，立即用微量精密天平称取脑湿重，然后放置烘箱里，80℃烘72h至恒重，计算脑含水量。脑含水量（%）=(湿重-干重)／湿重×100％。　　1.5.2动物神经功能评分　　参照Zealonga5分制评分标准。0分：无神经系统损伤症状；1分：不能完全伸展对侧前爪；2分：向对侧转圈；3分：向对侧倾倒；4分：不能自发行走；5分：意识丧失。累计一分以上即为成功模型。动物清醒后观察拔线时及再灌注后1，3，7d时的神经功能缺失评分。　　1.5.3脑组织的病理改

7、变　　各组大鼠于术后1，3d及7d观察神经功能评分后，分别取6只，并取6只正常大鼠作对照，断头处死，取脑，去除小脑、脑干，取视交叉为中心水平相当于前联合水平脑片，置入10％中性福尔马林溶液固定。常规脱水、透明、浸蜡、包埋、切片5μm厚，HE染色，观察组织学变化。　　1.6统计学方法　　所有数据均录入SPSS13.0统计软件进行数据统计与分析。两样本均数间比较采用t检验（方差齐）或t’检验（方差不齐），检验水平＝0.05。　　2结果　　2.1各组大鼠脑含水量的比较　　造模后模型组及TFXSJN组大鼠平均脑含水

8、量在1d时即明显升高，与假手术组及正常组对比，具有明显差异（P<0.05），3d时的脑含水量最高，7d时两组大鼠的脑含水量基本恢复正常，与假手术组及正常组相比无明显差异（P>0.05）。而TFXSJN组的脑含水量在3d时与模型组相比有明显下降，差异有统计学意义（P<0.01），表明TFXSJN治疗后可以抑制脑水肿高峰的形成，减少缺血性脑损伤的脑含水量。假手术组的脑含水量在任何时间点与正常组相比均