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时间:2018-11-18
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1、木聚糖酶法提取温莪术挥发油关键因子研究论文丁兴红温成平丁志山范永升【摘要】目的研究了木聚糖酶提取温莪术挥发油工艺条件。方法对温莪术粒径、木聚糖酶用量、酶解时间进行正交实验设计。结果以出油率为指标确定适宜的正交实验参数为:温莪术细粉100目、木聚糖酶用量50IU·(g温莪术)-1、酶解时间90min。结论该工艺条件下温莪术挥发油提取得率为2.42%,与未添加木聚糖酶提取工艺相比,温莪术挥发油提取得率增加3.40倍。【关键词】温莪术;挥发油;木聚糖酶;提取Abstract:ObjectiveTostudy
2、thefactorsaffectingtheyieldofessentialoilextractedfromRhizomaCurcumabyxylanase-assistantextraction(XAE)technology.MethodTheparticlesize,extractiontimeandxylanaseamountentstofindouttheoptimumoperatingconditionsfortheXAEofessentialoilextractedfromRhizomaC
3、urcuma.ResultsTheresultsoforthogonalexperimentsshoumoperatingconditions,theaddedamountofxylanaseaCurcumaresedue)-1,andthexylanaseextractiontimein.ConclusionUsingthementionedoptimumconditions,theessentialoilyieldreaches2.42%.Moreover,theresultsshoesiness
4、entialoilyieldparedaaaol/L,pH4.8柠檬酸缓冲液配制。木聚糖酶活力单位(IU)定义:在pH值为4.8,50℃条件下,每分钟分解底物释放1.0μmol还原糖(以木糖计)所需的木聚糖酶量为一个活力单位。2.2木聚糖酶法辅助提取温莪术挥发油根据单因素考察结果进行正交实验设计,以挥发油提取率为指标,选择温莪术粒径(65,80,100目)、木聚糖酶用量20,50,80IU·(g温莪术)-1、酶解作用时间(30,60,90min)3个影响因素按3因素3水平进行L9(34)正交实验设计(
5、第4列为空列,用来估计误差)。称取20g温莪术,加入适量木聚糖酶液,调节pH值为4.8,50℃反应。酶解作用一定时间后,离心,取上清液用石油醚萃取,萃取液用旋转蒸发器在常压下转数为25r/min浓缩,将石油醚蒸出(温度40℃左右),当冷凝管口无液滴滴下时即为浓缩终点,得温莪术挥发油,计算挥发油得率,并对结果进行方差分析,求出最佳提取工艺。3结果与讨论3.1木聚糖酶解法提取温莪术挥发油的结果与讨论木聚糖酶辅助提取法正交实验结果见表1,方差分析结果见表2。从表1和表2可知,木聚糖酶提取莪术挥发油的3因素中
6、,温莪术粒径影响最大,为显著性影响因素,其次为木聚糖酶用量,酶解时间影响最小。由此得出木聚糖酶提取莪术挥发油优选工艺为A3B2C3:即100目的莪术细粉在50IU·(g温莪术)-1木聚糖酶用量下提取90min。A3B2C3工艺未在表1中出现,故补做该试验,同时照《中国药典》2005版附录57测定温莪术中挥发油含量1。结果如表3所示。表1木聚糖酶法正交实验结果表2木聚糖酶法正交实验方差分析表3正交设计优化提取方法的出油率比较结果由表3可知,采用正交实验优选工艺A3B2C3进行3次平行试验,平均温莪术挥发
7、油得率为2.42%,与《中国药典》2005版所用方法测定值相比,低11.35%。采用木聚糖酶提取温莪术挥发油,可以将温莪术中挥发油充分提取出来,但是由于构成温莪术细胞壁的纤维素骨架仍然束缚挥发油溶出,导致挥发油提取不完全8。3.2木聚糖酶提取和未添加木聚糖酶提取温莪术挥发油的结果与讨论为了考察木聚糖酶对温莪术挥发油提取的影响因子,设计100目的莪术细粉在50IU·(g温莪术)-1木聚糖酶用量下反应时间进程和未添加木聚糖酶的时间进程曲线。结果见图1。由图1可知,采用木聚糖酶提取温莪术挥发油在90min左
8、右,挥发油得率为2.42%。而未添加木聚糖酶进行挥发油提取试验,挥发油得率一直维持在0.71%左右,随着反应时间延长没有增加趋势表明,木聚糖酶在温莪术挥发油提取过程中发挥了重要的作用,随着酶解进程推进,木聚糖酶不断地将温莪术细胞壁裂解,促使包藏在细胞壁中的挥发油不断释放出来,提高了挥发油提取效率9。【
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