dpph·体外清除实验研究萝芙木水溶性生物碱抗氧化活性

《dpph·体外清除实验研究萝芙木水溶性生物碱抗氧化活性》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、DPPH·体外清除实验研究萝芙木水溶性生物碱抗氧化活性【摘要】目的研究萝芙木水溶性生物碱(ethodsTheconditionlof6.5×10-5mol·L-1DPPH·+0.5mlofsamplesolutioneof30min.TherelationbetiningIC50valueslandIC50(TBHQ)=1.267×10-5g/ml.ConclusionRserpentinacanbeusedasnaturalantioxidant.　　Key等[11]报道了印度萝芙木标准提取物能够保护小鼠心肌免受过氧化自由基

2、的伤害。由于萝芙木的民间用药多为水溶性成分，为了对萝芙木传统的药理作用做进一步的应用研究，本实验以海南引种的催吐萝芙木RauvolfiavomitoriaAfzel.exSpreng为原材料制备水溶性生物碱，并对其进行体外清除DPPH·自由基活性的研究，测定自由基的清除能力，评价萝芙木的抗氧化活性。　　1材料与仪器　　1.1材料与试剂催吐萝芙木干根(海南省五指山市海南制药厂提供)粉碎过40目筛，TBHQ(广东省食品工业研究所)，有机溶剂均为国产分析纯。　　DPPH·母液：称取25.77mgDPPH·(2,2-二苯基-1-苦基肼

3、，sigma-Aldrich)溶于少量体积分数为95%乙醇中，最后定容至100ml(即6.5×10-4mol/L)，置于冰箱中冷藏备用。　　1.2仪器与设备722S可见分光光度计(上海棱光技术有限公司)，BT-244-S型电子天平(德国Sartorius)。　　2方法与结果　　2.1水溶性生物碱的制备以催吐萝芙木生药粉为材料制备乙醇提取物浸膏，然后采用雷氏铵盐沉淀法制得水溶性生物碱，具体方法见　　根据上述数据，可得催吐萝芙木水溶性生物碱清除DPPH·自由基的剂量-效应关系，如图2。由图2可知，在0.05～1.6mg/ml范围，

4、DPPH·自由基清除率随着样品质量浓度的增加而增大，在0.05mg/ml时，清除率为19.094%，而在1.6mg/ml时，清除率达到91.586%。　　图2催吐萝芙木水溶性生物碱对DPPH·自由基清除作用的剂量-效应关系　　2.2.4数据分析采用SAS(STATISTICALANALYSISSYSTEM)8.0统计软件对表2数据进行统计分析，以Reg过程进行一元非线性回归分析，建立催吐萝芙木水溶性生物碱对DPPH·自由基清除作用的剂量-效应回归方程。　　回归方程显著性分析见表3，模型Y=a+bX+cX2的参数a=17.588

5、48，b=127.70126，c=-51.17006，a达到显著水平(P<0.05)，b和c均达到极显著水平(P<0.01)，在此基础上建立的催吐萝芙木水溶性生物碱对DPPH·自由基清除作用的剂量-效应回归方程为式②。相关系数R2=0.9838，说明该回归方程具有可靠性，能较好的解释催吐萝芙木水溶性生物碱对DPPH·自由基清除作用的剂量-效应关系。Y=17.58848+127.70126X-51.17006X2②表3回归方程显著性分析　　2.2.5催吐萝芙木水溶性生物碱的抗氧化水平抗氧化剂清除DPPH·自由基能力采

6、用IC50表示。IC50的物理意义为当抗氧化剂对DPPH·自由基清除率达到50%时的质量浓度，IC50值越低，抗氧化剂清除自由基的能力越强。由回归方程计算出DPPH·自由基清除率为50%时所需的样品质量浓度IC50=2.627×10-4g/ml。　　3结论　　研究催吐萝芙木水溶性生物碱对DPPH·自由基体系吸光值的变化，认为采用分光光度法测定催吐萝芙木水溶性生物碱对DPPH·自由基体外清除实验的条件是反应体系经30min后在517nm波长下测定吸光值。　　提出以IC50值作为评价样品清除DPPH·自由基能力的指标，通过测定不同

7、质量浓度的催吐萝芙木水溶性生物碱对DPPH·自由基清除率曲线，计算出其IC50值为2.627×10-4g/ml。特丁基对苯二酚(TBHQ)是现今食品医药行业广为应用的合成抗氧化剂，在与ullerJM,SchlittlerE,BEinHJ.Reserpin,thesedativeprinciplefromRauRauvolfiabahiensisA.DC.(Apocynaceae)[J].Phytochemistry，2002,60(3):315.　　[6]ItohA,KumashiroT,YamaguchiM,etal.Ind

8、olealkaloidsandotherconstituentsofRauisDL,CapodiceJL,GorroochurnP,etal.Anti-prostatecanceractivityofabeta-carbolinealkaloidenrichedextract