DPPH体外清除实验研究萝芙木水溶性生物碱抗氧化活性

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1、DPPH·体外清除实验研究萝芙木水溶性生物碱抗氧化活性【摘要】目的研究萝芙木水溶性生物碱(WSAR)的抗氧化活性。方法根据DPPH·体系吸光值的变化研究催吐萝芙木水溶性生物碱清除自由基的能力，DPPH·反应体系为2.5ml6.5×10-5mol·L-1DPPH·+0.5ml样品溶液，反应时间30min。考察了不同浓度WSAR和特丁基对苯二酚(TBHQ)与DPPH·自由基清除率的关系。结果DPPH·自由基的清除能力IC50(WSAR)=2.627×10-4g/ml,IC50(TBHQ)=1.267×10-5g/ml。结论萝芙木水溶性生物碱具有抗氧化活性，可以开发为天然抗氧化剂。【关键词】水

2、溶性生物碱;抗氧化;自由基;萝芙木AntioxidantPotentialofWaterSolubleAlkaloidsfromRauvolfiaStudybyDPPH·invitroAssay　　Abstract：ObjectiveTostudytheantioxidantpotentialofwatersolublealkaloidsfromRauvolfia(WSAR)bystudyingabsorptionspectrumofDPPH·reactionsystem.MethodsTheconditionwasdrawnasfollows,DPPH·reactionsystemwa

3、s2.5mlof6.5×10-5mol·L-1DPPH·+0.5mlofsamplesolutionwiththereactiontimeof30min.TherelationbetweenDPPH·radical10scavengingrateandtheconcentrationofWSARandTBHQwerestudied,andIC50(thevalueofantioxidantconcentrationforscavenginghalfofDPPH·radical)wasusedastheindextoevaluatescavengingcapacity.ResultsThe

4、determiningIC50valueswereasfollows:IC50(WSAR)=2.627×10-4g/mlandIC50(TBHQ)=1.267×10-5g/ml.ConclusionWatersolublealkaloidsfromRserpentinacanbeusedasnaturalantioxidant.　　Keywords：Watersolublealkaloids;Freeradical;Antioxidant;Rauvolfia　　现代医学研究表明，适量的自由基在免疫反应、细胞分化、细胞凋亡和其它生化代谢过程中起着重要的作用，然而过量的自由基则在机体中引起一

5、系列生物学反应，导致组织细胞、亚细胞和分子结构的破坏，并随着破坏层次逐渐扩展造成功能损伤，引起心血管疾病、癌症和衰老等，它是构成很多疾病的病理学基础。因此合理地使用抗氧化剂可以有效地预防和治疗某些疾病，延缓衰老[1]。　　合成抗氧化剂往往具有一定的毒副作用，使得它们的使用受到严格控制。而天然抗氧化剂副作用较小，因此，寻找高效、价廉、低毒甚至无毒的天然抗氧化剂的工作备受关注。10　　夹竹桃科萝芙木有135种，主要分布在美洲、非洲、大洋洲和亚洲，我国分布有9种和4变种[2]。萝芙木在非洲和印度被广泛作为民间草药[3]。自从1952年Muller等[4]从印度萝芙木(Rauvolfiaserp

6、entina)中提取出利血平并发现它具有降压和安定作用之后，各国科学家对萝芙木脂溶性成分进行了大量研究，发现了一系列单萜吲哚类生物碱[5～7]，并对其中一些成分进行抗炎、降血脂、降血压和镇静等药理研究[8～10]，但是对萝芙木抗氧化活性的研究报道甚少，2007年，Al-qirim等[11]报道了印度萝芙木标准提取物能够保护小鼠心肌免受过氧化自由基的伤害。由于萝芙木的民间用药多为水溶性成分，为了对萝芙木传统的药理作用做进一步的应用研究，本实验以海南引种的催吐萝芙木RauvolfiavomitoriaAfzel.exSpreng为原材料制备水溶性生物碱，并对其进行体外清除DPPH·自由基活性

7、的研究，测定自由基的清除能力，评价萝芙木的抗氧化活性。　　1材料与仪器　　1.1材料与试剂催吐萝芙木干根(海南省五指山市海南制药厂提供)粉碎过40目筛，TBHQ(广东省食品工业研究所)，有机溶剂均为国产分析纯。　　DPPH·母液：称取25.77mgDPPH·10(2,2-二苯基-1-苦基肼，sigma-Aldrich)溶于少量体积分数为95%乙醇中，最后定容至100ml(即6.5×10-4mol/L)，置于冰箱中冷藏备用。　　1.2