白背叶提取物wf对2215细胞分泌hbsag和h

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1、白背叶提取物WF对2215细胞分泌HBsAg和H【摘要】目的研究白背叶提取物ethods2215cellsorphologicalalterationof2215cells.Thesupernateofcultureelinkedimmunosorbentassay(ELISA)inetheHBsAgandtheHBeAglevelsinthesupernate.ResultsThenon-toxicconcentrationofSO(博大泰克公司产品);0.25%胰蛋白酶(美国HycloneLab

2、公司产品);乙肝表面抗原测试盒(上海荣盛生物技术有限公司，批号:20070605);乙肝e抗原测试盒(上海荣盛生物技术有限公司，批号:20070709)。　　1.3仪器DLF560型超净工作台(荷兰clearAirTechniekbv公司产品);311二氧化碳培养箱(美国ThermoForma公司产品);倒置显微镜(德国LEICABMIRB产品);酶标仪(奥地利SUNRISE产品);培养瓶(加拿大BIOFIL公司产品);96孔板(美国Corning公司产品);微量移液器(法国Gilson公司产品);

3、十万分之一电子天平(美国赛多利斯仪器系统有限公司产品)。　　1.42215细胞2215细胞由美国MountSinai医学中心构建，中国医学科学院医药生物技术研究所惠赠。　　2方法　　2.1细胞培养液配制MEM培养液100ml：含胎牛血清10%，谷氨酰胺300μg/ml，G-418380μg/ml，卡那霉素750μg/ml。用5%NaHCO3调pH值至7.2～7.4。　　2.22215细胞培养2215细胞于含10%胎牛血清的MEM培养液中，置37℃、5%CO2培养箱培养，2～3d换培养液1次，约7～1

4、0d长满培养瓶。　　2.3白背叶提取物uench法将细胞受损百分率高于25%的认为药物有细胞毒性，低于25%的即认为细胞未受药源性损伤，由此确定最大无毒浓度。收集最大无毒浓度及低于该浓度WF培养的各孔上清，供HBsAg和HBeAg测定用。　　2.4白背叶提取物WF对2215细胞分泌HBsAg和HBeAg的抑制作用[6]取“2.3”中备用上清，按HBsAg和HBeAg酶联免疫试剂盒说明书测定HBsAg和HBeAg的OD值。抗原抑制率、IC50分别按下式计算。　　抗原抑制百分率(%)=细胞对照OD值-给

5、药实验OD值细胞对照OD值×100%(公式一)　　IC50=　　lg-1[50-小于50%抑制百分率B+(大于50%抑制百分率-小于50%抑制百分率)×(A-B)](公式二)　　其中：A=lg(抑制率大于50%的药物浓度)　　B=lg(抑制率小于50%的药物浓度)　　2.5统计分析实验结果均以±s表示。采用t检验分析各组间差异，P<0.05即认为差异达到显著。　　3结果　　3.1白背叶提取物].北京:中国医药科技出版社,1996:272.　　[2]张晓刚,吕志平,谭秦湘,等.白背叶根抗乙型肝炎

6、病毒的体外实验研究[J].时珍国医国药,2006,17(8):1437.　　[3]徐舒,吕志平,蔡红兵,等.白背叶根抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究[J].中西医结合学报,2006,4(3):285.　　[4]赵进军,吕志平,王晓东,等.白背叶根在肝纤维化动物模型中抗氧化作用的实验研究[J].中药材,2002,25(3):187.　　[5]赵进军,吕志平,张绪富.白背叶根对过氧化氢所致大鼠肝细胞损伤的保护作用[J].华西药学杂志,2003,18(4):257.　　[6]郑作文.藤茶总黄酮在2215细胞培养

7、中对乙型肝炎病毒HBsAg，HBeAg和HBV-DNA的抑制作用[J].山东中医杂志,2003,22(9):561.