初探硫酸镍致雌性小鼠卵巢损伤功能

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1、初探硫酸镍致雌性小鼠卵巢损伤功能【目的探索硫酸镍致小鼠卵巢细胞凋亡的毒功能及其机制，为防治镍毒性导致的卵巢早衰提供科学依据。方法健康昆明种雌性小鼠以每次以10?0，5?0，2?5mg/kg硫酸镍(NiSO4)腹腔注射染毒，0?2ml/(10g·bg/kg)的1/4，1/8，1/16进行，以NiSO4计分别为10?0，5?0，2?5mg/kg，对照组以生理盐水0?2ml/(10g·buticycle软件分析亚二倍体峰及细胞周期，得出各细胞周期百分率，并按以下公式计算增殖指数(PI)〔3〕：PI=SG2/MG0/G1SG2/M×100%。　　1?4统计分析采用SPS

2、S11?5统计软件进行处理。流式细胞术检测结果以Muticycle软件分析，统计细胞周期不同时相细胞比例及凋亡率。　　2结果　　2?1一般状况染毒早期动物出现稍微兴奋表现，于染毒后期表现为不同程度精神萎靡、活动减少、拥挤蹲伏、毛发蓬松等。　　2?2NiSO4对雌性小鼠动情周期的影响(图1～4)实验结果显示，对照组小鼠动情周期较规律，各染毒组小鼠表现为非动情期延长，主要是动情前期延长且不规则，光镜下可见有大量上皮细胞，呈粒状胞浆，尚有少量角化上皮细胞，但无白细胞，尤以高剂量组更为明显。可见染毒组小鼠在染毒期间动情周期受到抑制。　　图1动情前期（略）　　图2动情期（

3、略）　　图3动情后期（略）　　图4动情间期（略）　　2?3NiSO4导致小鼠卵巢细胞凋亡的形态学变化(表1)表1数据表明，低剂量组小鼠卵巢细胞的凋亡情况和对照组比较，差异无统计学意义(P>0?05)；中剂量组小鼠卵巢细胞的凋亡情况和对照组比较，差异有统计学意义(P<0?05)；高剂量组小鼠卵巢细胞的凋亡情况和对照组比较，差异有统计学意义(P<0?01)。　　表1小鼠卵巢细胞凋亡的形态学变化（略）　　注：和对照组比较，aP<0?05，bP<0?01；n=12　　2?4腹腔注射硫酸镍对小鼠卵巢细胞周期的影响(表2)　　表2NiSO4对小

4、鼠卵巢细胞周期的影响（略）　　由表2可见，不同剂量组细胞周期分布均以G0/G1期为主，而且随剂量增加G0/G1期细胞比较增高，表明该期细胞阻滞；G2、S期细胞比率下降；随剂量增加细胞凋亡率增加、PI降低(促进凋亡)、DI增加。　　3讨论　　卵巢的主要功能表现为周期性的排卵及其分泌相应激素水平的周期性变化，同时伴有***上皮细胞学的周期性变化〔4〕。雌性动物发情周期有4个时期〔5〕，不同时相***脱落细胞学细胞形态不同。判定小鼠生理周期的主要依据是***上皮细胞类型〔6〕，其成熟程度和体内雌激素水平成正比〔7〕，大量白细胞和有核上皮说明体内雌激素水平较低，处于动情

5、间期，持续出现该现象预示动情周期被抑制和紊乱。王学习等〔8〕探究亦显示，腹腔注射硫酸镍染毒后大鼠动情周期延长。可能机制是过量镍进进机体，损伤卵巢功能，使雌激素分泌水平下降所致。　　流式细胞仪能正确快速的分析细胞周期、测定细胞DNA含量〔9-11〕，确定细胞周期是非和不同时期的比例变化情况。细胞按G1?S?G2?M顺序完成增殖过程，细胞凋亡和细胞周期密切相关，阻断细胞周期进程可引起细胞凋亡，而凋亡也常伴有生长阻滞〔12，13〕。不同因素诱导的凋亡发生在细胞周期不同时相〔14〕。以往探究证实，过量镍进进机体后，Ni2和DNA碱基结合，使有序的DNA氢系统不稳定，引起

6、DNA?蛋白质交联和DNA单链断裂，导致DNA损伤和细胞毒性功能。本探究进一步表明，硫酸镍导致卵巢损伤是通过抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡途径实现的。这可能是NiSO4诱发机体卵巢早衰的原因之一。【