梅毒检测方法的研究进展

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1、梅毒检测方法的研宄进展刘祥波(辽宁省丹东市第一医院皮肤科辽宁丹东118001)【摘要】梅毒是危害人类健康的普遍存在的性病之一，它主要是由梅毒螺旋体亚种(TP)感染而引起的疾病。快速、灵敏和特异性高的梅毒检测方法在不断的完善中。木文从血清检测方法、病原体直接检测方法及PCR检测方法三个方面来阐述梅毒检测方法的进展，并且侧重对PCR检测方法进行了论述。梅毒(syphilis)是一种比较普遍的性传播疾病，它主要是由梅毒螺旋体亚种(TP)感染而引起的疾病，人是梅毒的唯一传染源［1］。梅毒(syphilis)检

2、查己经成为临床上检测的一个重要指标，检测的方法也由以前单一的检测方法发展多样性。梅毒检测方法多样性，但是大致可以归为三类：血清学检测方法、病原体直接检测方法和PCR检测的方法，木文重点将阐述PCR检测的方法。1血清学方法现在各医院主要釆用的血清方法的检测手段，有双抗原夹心酶联免疫法(ELISA法)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)、化学发光免疫分析法(CUA法)、梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、胶体金法、荧光螺旋体抗体吸收试验(FTA一ABS)和蛋白质印迹法。这些方法研究较多，方法的适

3、用性各有所不同。其中，双抗原夾心酶联免疫法(ELISA法)是医院最常采用的方法，这种检测方法是检验科常规的操作技术，灵敏性高并且操作简单，试剂价格也比较便宜，适合医院大批量体检和梅毒感染的早期检查。但是它的一个缺陷是不能作为疗效的检测手段，因为梅毒梅毒IgM和IgG的混合抗体，而IgG抗体在治愈后相当长的时间内很可能还是存在显示阳性。2病原体直接检测方法病原体直接检测梅毒的方法一般只是适用在起病初期，其中最常用和经典的检测方式是暗视野显微镜检查和活检两种方法，但是这两种方法对于区别梅毒螺旋体和它的类似

4、梅毒螺旋体的物质很网难，敏感性低，所以在实际运用中受到限制。但是近来国内一般运用MDI法，该方法是一种综合相差对比、暗视野及其偏振光的可变投影显微镜，标本不要染色，也不需要任何加工处理，直接进行观察的方法。据相关研究［2】,MDI可以作为检测I期梅毒患者生殖溃疡分泌物中梅毒螺旋体苍白亚种的比较有价值的方法。不过，该仪器价格昂贵，各医院还没没有能够推广使用。3PCR检测方法PCR检测梅毒的方法在临床中很少应用，现今主要是实验室作为一种研宄梅毒的手段。PCR检测法主要分为常规PCR法和荧光PCR法。该技术

5、的优点是对于I期梅毒、神经梅毒、伴艾滋病梅毒的诊断敏感性低，能够区分母体梅毒与胎传梅毒，能够探明梅毒的间接传播途径。常规PCR法：常规PCR法是现今最广泛运用的基因检测方法，能够直接、快速的检测出梅毒螺旋体特异性的基因片段，拥奋特异性强和敏感性高等优点。Liu［3］等人针对rPpolA基因设计引物，证实了常规PCR方法检测梅毒具有高度特异性。另外，也有相关报道，利用多重PCR法和逆转录PCR法来检测梅毒。但是后来研宄发现，常规PCR检测梅毒的方法对于TP含量极低或者存在不容易除去的Taq酶抑制因子的全

6、血/血清的敏感性低。针对这一问题，曾铁兵［4］、郑和平［5】等提出巢式polAPCR的敏感性比常规PCR的敏感性高。荧光PCR法：荧光PCR法是在常规PCR基础上添加荧光探针，能够定量检测出DNA的拷贝数，并且可以从计算机屏幕上读出DNA的定量数据，又称之为荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法。这个技术在国内，大概在21世纪陆续才有相关研究报道，较之于常规PCR法，它具奋更高的特异性和敏感性。特异性来说，关于FQ-PCR技术检测梅毒的相关报道都表现出一致性,特异性均为100%；但是对于它的敏感性，结

7、果不尽统一。HeymansR［6］曾报道，FQ—PCR检测方法对I期梅毒敏感性高，但是对于II期梅毒检测敏感性只有43%。李钟洙［7］等研究证实了梅毒的螺旋体DNA(TP-DNA)在常温下也能保持稳定，并且II期的敏感性达到了90%,该实验应用FQ—PCR技术检测了早期(I期和II期)梅毒各种形态的皮损、全血以及患者所接触的可疑污染物中的TP。另外，FQ—PCR检测梅毒主要靶基因是polA和TP47。4小结在临床当中，梅毒的检测现今还是主要以血清学方法为主，病原体直接检测方法次之，但是对于神经梅毒、伴

8、发性艾滋病的梅毒等，血清检测方法和病原体检测方法都会受到限制，然而PCR检测方法可以得到可靠地结果，并且利用这个技术还可以阐明梅毒的间接传播途径。当然，PCR检测方法还存在缺陷，这是以后研究的方向。参考文献[1】郭二兵，白旭华.梅毒螺旋体实验诊断及疫苗研究进展[j].中国感染与化疗杂志，2008,03.[2】朱慧兰，武明昌.多功能显微诊断仪在I期梅毒诊断中临床价值的初步评价[J].中国麻风皮肤病杂志,2001，17(1)：33.[3]LiuH,Rodes