梅毒实验室检测方法的研究进展.pdf

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1、48·文献综述·March2015，Vo1．13，No．7梅毒实验室检测方法的研究进展刘兵冯文莉(1山西医科大学，山西太原030001；2山西医科大学第二医院皮肤性病科，山西太原030001)【摘要】梅毒是一种严重危害人类健康的性传播疾病，临床上主要借助实验室检测对其进行诊断。近年来，快速、灵敏和特异性高的检测方法在不断更新完善中。本文主要从病原学、血清学、分子生物学、脑脊液四方面对梅毒实验室诊断的最新进展作一综述。【关键词】梅毒；病原体；血清学；分子生物学；脑脊液中图分类号：R759．1文献标识码：A文章编号：1671—8194(2015)07—0048—03梅毒(

2、syphilis)是由苍白密螺旋体的苍白亚种即梅毒螺旋体良后的方法，改良措施是在抗原悬液中加人了二胺四乙酸二钠灭活补(Treponemapallidum，TP)所引起的一种慢性、接触性传染病，近年体从而使悬液更加稳定可保存4个月，又在悬液中加入了氯化胆碱可来其发病率有明显上升趋势。TPl~tFritzSchaudinn和ErichHofmann于对待测血清直接化学灭活从而减少了加热灭活步骤，从而在检测时更1905年首次发现，为纤细的密螺旋体，运动活泼，可以旋转、蛇行、加快速、方便。缺点是需要借助显微镜，主观性强，易出现漏检。伸缩三种方式运动，感染机体后可产生两类抗体：

3、一类为非特异性抗2．1．4快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)：利用从牛心中提取出体，该类抗体能与广泛分布于生物组织中的类脂抗原发生非特异性反来的有效成分一心磷脂、卵磷脂及胆固醇组成抗原，然后用特制的活应，另一类为特异性抗体。针对TP生物学及免疫学特性，梅毒实验室性炭颗粒进行吸附，通过肉眼观察白色纸板上有无黑色凝集颗粒出现诊断技术主要是从病原体、血清学、分子生物学、脑脊液四方面开展。而直接进行结果判断。该方法操作简便、迅速，适用于大批量标本1病原体直接检测检测。缺点是当抗体含量过高时，易出现假阴性反应，即前带现象1．1暗视野显微镜检查TP(DF)：暗视野显微镜可直接观

4、察到病灶分(promnephenomenon)，会有漏检l还易出现生物学假阳性反应，泌物中运动活跃的苍白螺旋体，结合临床症状可直接诊断梅毒。该法但是RPR试验可检测抗体滴度变化，RPR滴度变化是观察治疗效果、操作简单，且经济、快速，但敏感性较低，检测阳性率为65％~70％，复发或再感染的重要指标。主要受病程、某些外加因索以及检测人员技术水平影响，而且对部分2．1．5甲苯胺红不加热血清反应素试验(TRUST)：该法用类脂质二期梅毒皮疹、隐性梅毒或口腔病灶标本不适用。(从牛心提取的心磷脂和从鸡蛋黄提取的卵磷脂及胆固醇)为抗原来1．2镀银染色方法检查TP(Wartbinst

5、arry)：由于TP具有亲银性，可检测血清中的抗类脂质抗体，原理与RPR试验类似，只是以甲苯胺红将TP染成棕褐色或黑褐色，且层次清楚，反差明显，形态清晰，背景染料颗粒代替活性炭颗粒做吸附剂。试验结果清晰易读，简便快速，为黄色，TP易被着色辨认，封片后可以永久保存标本。缺点是镀银染稳定性好，但对一期梅毒、三期梅毒及隐性梅毒进行检测时会出现假色液需新鲜配制，且不能观察TP的运动方式，易与类似1]P的其他物质阴性反应，尤其是三期梅毒。混淆，故临床应用很少，多用于科研和教学。2．2特异性抗体检测1．3免疫荧光抗体染色：该法将TP用异硫氰酸荧光素标记的抗TP抗体2．2．1荧光密

6、螺旋体抗体吸收试验(FTA—ABS)：试验以非致病性密螺或单克隆抗体染色，利用抗原抗体特异性反应，荧光显微镜观察抗原旋体Reiter株作为抗原来吸收待测血清，排除了同属抗原交叉结合的抗体复合物出现绿色荧光，表明检测标本中含有TP，但需要荧光显微可能性，特异性好。而且该法因采用了整条螺旋体进行检测，敏感性镜设备，技术条件要求较高。高。文献报道FTA-ABS对各期梅毒检测的特异性达到92％，对一期梅2梅毒血清学检测毒的敏感性为80％，二期为99％~100％，三期为95％~100％pl缺点是梅毒血清学检测根据所用抗原不同可分为非特异性抗体检测和特使用了活菌，存在一定的潜在危

7、险性。而且需要使用荧光显微镜，对异性抗体检测两大类】。设备和操作要求较高，所以该法的使用受到了限制。2．1非特异性抗体检测2．2．2TP血球凝集试验(TPHA)：用羊或火鸡红细胞做抗原载体，吸附2．1．1康瓦试验：是最早检测梅毒患者体内抗体的方法，这种试验的抗从兔睾丸中提取的粗制TP粉碎物抗原，检测血清中TP特异性抗体。由原采自牛心肌粉酒精浸液。此试验操作复杂，易出现假阳性，目前这于试剂制备过程排除了各种非特异性反应，敏感性和特异性均较高。种试验已被临床淘汰。但试剂成本较高，操作较麻烦，且易发生自凝现象和生物学假阳性。2．1．2性病研究实验室试验(V