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《sars患者血清中sars相关冠状病毒抗体产生规律的初步分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、SARS患者血清中SARS相关冠状病毒抗体产生规律的初步分析-->[摘要]目的:了解严重急性呼吸综合征(SARS)患者血清中SARS病毒特异性IgM、IgG抗体产生的规律。方法:随机选取32例SARS患者55份血清标本,应用ELISA分别检测抗SARS病毒IgM、IgG抗体。结果:IgM抗体阳性率为56.4%,平均出现时间为(5.88±2.62)d,其中2例患者在发病后第2天即出现阳性,平均消失时间为(14.25±2.97)d;IgG抗体阳性率为41.9%,平均出现时间为(11.40±4.20)d,其中2例患者在发病后第3天即为阳性;Ig
2、M和IgG抗体的总体阳性漏检率为6.25%。结论:SARS患者于发病后3~7d血清中出现特异的IgM抗体,可用于实验室诊断;同时进行IgM和IgG抗体的检测可用于发病8~14d左右的实验室排查检测。①严重急性呼吸综合征(severeacuterespiratorysyndrome,SARS),又称急性传染性非典型性肺炎,具有急性发病、早期出现肺部病变、病死率高等特点,已经成为严重危害人类健康的世界性问题。根据世界卫生组织(抗体的检测[7]。对于这种方法的敏感性、准确性,以及SARS-CoVIgG、IgM抗体在患者血液中产生的特点等仍然需要
3、大量标本的验证。我院在此次与SARS的斗争中收治了大量的SARS患者,本研究中我们应用间接ELISA方法,对SARS-CoV感染后特异性抗体产生的规律进行了初步探讨。1材料和方法1.1血清标本随机选取32例我院临床确诊SARS患者的血清标本55份,标本采集时间为发病的第1~60天,其中第1~3天18例,第4~7天5例,第8~14天8例,第15~21天8例,>21d16例;32例患者中有12例进行血清动态检测。血清均于-80℃保存。1.2试剂SARS患者血清IgM、IgG抗体检测采用SARS-CoV全抗原包被ELISA试剂盒(北京华大吉比爱
4、生物技术有限公司)。1.3血清中SARS-CoV抗体的检测方法按试剂盒操作说明进行,每次实验设空白对照、阳性对照各1孔、阴性对照2孔。空白孔不加液体;阴、阳性对照无须稀释,直接取50μl加入阴、阳性对照孔中;其余检测孔为相应稀释后的标本。充分混匀,置37℃温育30min(IgM检测为60min)。洗板5次。除空白孔外,每孔加入酶标抗人IgG(或IgM)工作液100μl,置37℃温育20min。洗板5次。每孔加入底物液A、B各50μl,轻拍混匀,置37℃避光温育10min。显色完毕后,每孔加入终止液50μl,轻拍混匀,立即以空白孔调零,45
5、0nm处测定光密度(D)值。2结果2.1抗体检测结果IgG检测中待测标本D值>0.13+阴性对照平均D值(如果阴性对照D值0.11+阴性对照平均D值(如果阴性对照D值3讨论目前卫生部公布SARS诊断标准,主要依据是临床指征及流行病接触史。进行血清学的特异抗体检测无疑可对SARS的诊断提供有利的依据。我们对32例患者发病后不同时期的55份血清同时进行了抗SARS-CoVIgM、IgG抗体的检测,结果显示32例患者总的抗体检出阳性率为93.75%(30/32),55份血清标本中IgM抗体检出率为56.36%(31/55),IgG为41.82%
6、(23/55)。综合IgM和IgG抗体的总体阳性,发现于病程的第8~14天最高(表1)。IgM抗体最早出现在病程的第1天,在第8~14天阳性率最高,平均产生于病程的第(5.88±2.62)天,最早消失于病程的第10天,平均于第(14.25±2.9本论文出自7)天消失;IgG抗体最早出现在病程的第2天,平均产生于病程的第(11.40±4.20)天(表3),随着病程的延长阳性率逐渐增加,本组病例中未见IgG抗体消失现象。本研究中IgM和IgG抗体分别最早出现在病程的第1和第2天,不甚符合病毒感染后机体产生体液免疫反应的一般规律。通过分析其流行
7、病学资料发现,此2例患者均有明确的接触史,如果以接触时间计算IgM和IgG抗体应分别产生在第4天和第9天。因此,可以推测患者在接触传染源,感染SARS-CoV后机体便启动了体液免疫反应,并按一般时间规律首先产生IgM抗体随后发生IgM与IgG抗体的转化。本研究中有2例患者未出现抗体,可能的原因是:(1)实验所使用的试剂盒灵敏度低,不能检测出所有的病例;(2)由于目前尚无特异的临床诊断标准,不能排除误诊的可能;(3)由于治疗过程中使用了糖皮质激素,干扰了正常的体液免疫反应;(4)患者体质较差,体液免疫低下,不能正常产生抗体。通过本次实验研究
8、我们发现,绝大部分SARS患者在病程中会产生抗体,但一般要到发病后1周左右才会出现IgM抗体,IgG抗体产生时间则更长,这显然不能作为早期的实验室诊断指标。而通过PCR扩增病毒核酸的方法也存在
