酶工程—生工二班试题

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1、20112-2013学年《酶工程》第二学期期末试题生工二班一名词解释：1酶(Enzyme)：酶是生物体内进行新陈代谢不可缺少的受多种因素调节控制的具有催化能力的生物催化剂。2膜分离技术(membraneseparationtechnique):借助于一定孔径的岛分子薄膜，将不同大小、不同形状和不同特性的物质颗粒或分子进行分离的技术称为膜分离技术3固定化酶(ImmobilizedEnzyme):通过物理的或化学的手段，将酶束缚于水不溶的载体上，或将酶朿缚在一定的空间内，限制酶分子的自由流动，但能使酶充分发挥催化作用；曾称

2、其为水不溶酶或固相酶4溶菌酶(lysozyme):主要是由吞噬细胞合成并分泌的一种小分子粘性蛋白，属乙酰多糖酶。存在于唾液、乳汁、泪液和鼻及气管等分泌物中，能溶解革兰K阳性细菌。由于它的高等电点(pHll.O),使它能与细菌牢固结合，并水解细菌细胞壁肽聚糖，使细菌裂解死亡。5核酶(ribozyme)：具有催化功能的RNA分子，是生物催化剂。又称核酸类酶、酶RNA、核酶类酶KNA。6抗体酶(abzyme):抗体酶乂称催化抗体(catalyticantibody)一种新型人T.酶制剂，是一种具有催化功能的抗体分子。是抗体的

3、高度选择性和酶的高效催化能力巧妙结合的产物，本质上是一类具有催化活力的免疫球蛋白，在其可变区赋予了酶的属性。7连续易错PCR(Sequentialerror-pronePCR):将一次PCR扩增得到的有益突变基因作为下一次PCK扩增的模板，连续反复进行随机诱变，使得每一次获得的少:W:突变累积而产生重要的有益突变。8酶的分子定向进化(directedevolution):又称蛋白质分子定向进化，是蛋白质工程的新策略，主要利川分子生物学手段，在分子水平上创造分子的多样性，在事先不了解酶的空间结构和催化机制的情况下，通过模

4、拟自然进化，在体外改造酶的基因，以改进的诱变技术结合灵敏的筛选方法，定向选择有价值的非天然酶。二选择题：1、酶工程是(C)的技术过程。A、利用酶的催化作用将底物转化为产物B、通过发酵生产和分离纯化获得所需酶C、酶的生产与应用D、酶在工业上大规模应用2、A、C、3、A、C、4、A、(A)的技术过程。改变酶的催化特性提高酶的稳定性B、具有催化活性的RNA分子D、催化抗体生成的酶酶的改性是指通过各种方法改进酶的催化特性B、提高酶的催化效率D、抗体酶是(A)具有催化活性的抗体分子催化抗体水解的酶纤溶酶原激活剂是(D)催化纤溶酶

5、水解反应的酶B、催化纤维蛋白水解反应酶C、催化纤维蛋白原水解反应酶D、催化纤溶酶原水解反应的酶5、在凝胶层析的洗脱过程中，(A)a、分子质y:最大的分子最先流出b、分子质量最小的分子最先流出C、蛋白质分子最先流出I)、盐分子最先流出三简答题：1简述细胞破碎方法及其原理(1)机械破碎，通过机械运动产生的剪切力，使组织、细胞破碎。如：捣碎法，研磨法,匀浆法(2)物理破碎，通过各种物理因素的作川，使组织、细胞的外层结构破坏，而使细胞破碎。如：温度差破碎法，压力差破碎法，超声波破碎法(3)化学破碎，通过各种化学试剂对细胞膜的作

6、用，而使细胞破碎。如：有机溶剂：甲苯、丙酮、丁醇、氯仿，表而活性剂：Triton、Tween(4)酶促破碎，通过细胞本身的酶系或外加酶制剂的催化作用，使细胞外层结构受到破坏，而达到细胞破碎。如：自溶法，外加酶制剂法。2固定化酶的优点(1)、极易将固定化酶与底物、产物分开；产物溶液屮没有酶残留，简化了提纯工艺。(2)、可以在较长时间内反使用，有利于工艺的连续化、管道化。(3)、酶反应过程可以严格控制，有利于工艺自动化和微电脑化。(4)、在绝大多数情况下提高了酶的稳定性。(5)、酶的使用效率提高，产物得率提高，产品质量有保

7、障，成本低。3举例说明酶在医学上有广阔的用途。(1)医药用酶：a.消化用酶：＜3、P—淀粉酶、胰酶、胰蛋白酶b.消炎用酶：木瓜蛋白酶、菠萝酶c.溶纤维酶：尿酸酶、链激酶、溶栓酶d.肿瘤用酶：I.一天冬酰胺酶、谷鉍酰胺酶(2)诊断用酶：a.尿酸酶：用于检测血液和尿液中的尿酸含量b.甘汕激酶：由于检测血液中甘汕三酯的含量(3)检测用酶：a.脱羧酶：由于检测L一赖氨酸和L一谷氨酸b.虫荧光素酶：用于检测ATP4核酶的功能：1.核苷酸转移作用。2.水解反应，即磷酸二酯酶作用。3.磷酸转移反应，类似磷酸转移酶作川。4.脱磷酸作用

8、，即酸性磷酸酶作用。5.RNA闪切反应，即RNA限制性内切酶作用。5定向进化的过程(1)通过随机突变和(或)基因体外重组创造基因多样性；(2)导入适当载体后构建突变文库；(3)通过灵敏的筛选方法，选择阳性突变子。这个过程可重复循环，直至得到预期性状的酶。四论述题1论述DNA改组步骤:（1）目的DNA片段的获得；（2）目的基因的随机