紫外分光光度法测定虎杖中白藜芦醇的含量

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1、紫外分光光度法测定虎杖中白藜芦醇的含量【关键词】虎杖白藜芦醇紫外分光光度法  Abstract:ObjectiveToestablishthedeterminationmethodforresveratrolinextractofPolygonumcuspidatum.MethodsUVspectrophotometry.ResultsThereethodissimple,rapid,accurate.  Keycuspidatum;Resveratrol;UVspectrophotometry  虎杖PolygonumcuspidatumSied.et

2、Zucc,又名斑根紫金龙、活血龙、阴阳莲[1],其根茎具有活血定痛、清热利湿、止咳化痰作用。主要用于关节麻痹、湿热黄疸、经闭、咳嗽痰多、水火烫伤、跌打损伤等症的治疗[2]。现代药理研究表明其主要有效活性成分白藜芦醇具有抗癌、抗氧化、抗血小板凝聚、抗菌、调节脂类代谢等多种功能。目前定量检测白藜芦醇的方法主要有高效液相色谱法(HPLC)[3]、气相色谱/质谱法(GC/MS)[4]以及气相色谱法(GC)[5]等。国内还未见有关用紫外分光光度法测定虎杖中白藜芦醇含量的报道。本实验应用紫外分光光度法测定了虎杖提取液中白藜芦醇含量。现报道如下。  1仪器与试药  1

3、.1仪器  GoldS54紫外可见分光光度计(上海棱光技术有限公司);AB204-N电子天平(Mettler-Toledo设备有限公司);FC-160型锤式粉碎机(上海中药机械厂制造)。  1.2试剂  虎杖药材购自江西省药材公司(产地江西樟树),经江西医学院冯江教授鉴定为正品虎杖,白藜芦醇对照品由中国药品生物制品检验所提供,水为重蒸馏水,其他试剂均为分析纯。  2方法与结果  2.1对照品溶液的制备精密称取干燥恒重的白藜芦醇对照品5.4mg,于50ml棕色容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得到0.108mg·ml-1的对照品溶液。  2.2供试

4、品溶液的制备准确称量细块状虎杖10.0g,加10倍量的水,在沸腾状态下提取180min,提取1次,冷却后将提取液过滤,滤液定容至一定体积,即为供试样品液。精密称取一定量试液于50ml容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。  2.3测定波长的选择将白藜芦醇对照品和供试品溶液按实验方法操作,在200~500nm进行波长扫描。结果表明,对照品和供试品溶液均在305nm处有最大吸收,且两者光谱形状极为相似,满足分光光度法测定的基本要求。因此,选定305nm作为测定波长。  2.4标准曲线的绘制分别精密吸取“2.1”项下对照品溶液0,0.3,0.

5、6,0.9,1.2,1.5ml各置于10ml容量瓶中,以甲醇定容至刻度,摇匀,即得浓度分别为0,3.24,6.48,9.72,12.96,16.20μg/ml的对照品溶液。以甲醇做参比,分别测定305nm吸光度,以吸光度(A)对浓度(C)进行线性回归,得回归方程A=0.13427C+0.04859(r=0.9990)。结果表明,白藜芦醇检测浓度在3~16μg/ml范围内与吸光度线性关系良好。见表1及图1。表1白藜芦醇标准溶液的浓度与吸光度(略)  2.5重复性实验取同一批虎杖样品,精密称取4份,按“2.2”项下方法分别制备成4份供试品溶液。在305nm下

6、分别测定其吸光度并计算白藜芦醇的含量。结果(见表2)表明,4份提取液中白藜芦醇的平均含量为1.46%,RSD=2.41%(n=4)。表2白藜芦醇含量测定结果(略)  2.6回收率实验采用加样回收法,精密吸取已知含量为3.32μg/ml虎杖提取液2ml于25ml容量瓶中,加入3.24μg/ml对照品溶液2ml,各4份,用甲醇稀释至刻度,摇匀,测定吸光度,计算回收率。结果得到平均回收率为98.8%,RSD为1.35%。  3小结  本实验建立了紫外分光光度法测定虎杖提取物中白藜芦醇的方法。实验表明,本法具有操作简单、速度快、准确度高的优点。其加样回收率和重复

7、性均较好,可作为一种虎杖提取液中白藜芦醇含量测定的方法。【参考文献】  [1]苏文强,杨磊,朱明华,等.中压柱层析法分离白藜芦醇的研究[J].林产化学与工业,2004,24(1):40.  [2]江海燕,朱华,黄慧学,等.炮制对虎杖中白藜芦醇苷和大黄素的影响[J].中草药,2003,34(3):412.  [3]杨红美,陈波,曾建国,等.HPLC同时测定虎杖及其提取物中4种有效成分的含量[J].中国中药杂志,2006,31(3):202.  [4]马亭,李攻科,李晓东,等.葡萄酒中白藜芦醇的固相萃取GC/MS法测定及其生理活性的初步研究[J].高等学校化

8、学学报,2000,20(7):1023.  [5]于贞,张影陆,赵光鳌.葡萄酒中

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