高效液相色谱法测定虎杖中白藜芦醇的含量.doc

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1、反相高效液相色谱法测定虎杖中白藜芦醇的含量白祖海，文刚，张艳（长沙市疾病预防控制中心，长沙）摘要：采用HPLC法测定虎杖中白藜芦醇含量。以聚酰胺柱对样品进行预处理，排除其它成分的干扰，获得较好分离度和高回收率。选用自填装ODS-C18色谱柱(200mm×4.6mm，5μm)，以乙醇-水(2：3,v/v)作流动相，流速为0.6ml/min，紫外光检测波长304nm，柱温为25℃。白藜芦酵在0.05-0.40μg/mL范围内具有良好的线性关系。r=0.9996，平均回收率为98.51%(n=5)。结论：该方法简便、准确可靠，适合于中药材虎杖中白藜芦醇含量的测定。关

2、键词：白藜芦醇；虎杖；反相高效液相色谱法DeterminationofResveratrolinthePolygonumCuspidatumbyReversed-PhaseHPLCBAIZu-hai,WENGang,ZHANGYan(ChangshaMunicipalCenterforPreventionandControlofDiseases,Changsha,China)Abstract：AsimpleandsensitiveReversed-PhaseHPLCmethodforthedeterminationofresveratrolintheroots

3、ofPolygonumcuspidatumwasdescribed，includingthepretreatmentofsamplesbypoamidecolutah.TheseparationwasperformedonanODScolumn(200mm×4.6mm，5μm)，withthemobilephaseofCH3CH2OH-H2O(2：3,v/v).Theflowrate0.6ml/minandthedetectionwavelengthwas304nm，thetemperatureofthepillarisindoortemperature.Re

4、sveratrolhavegoodlinearrelationshipintherangeof0.05-0.40μg(r=0.9996).Theaveragerecoveries(n=5)ofresveratrolwere98.51%..Asimple，accurateandsensitivemethodwithgoodreproduciabilitytodetermineresveratrolsimultaneouslyinPolygonumcuspidatumSieb.etZucc.isestablished．Keywords：Resveratrol；Po

5、lygonumcuspidatum；Reversed-PhaseHPLC.虎杖(PolygonumcuspidatumSieb.etZucc)是蓼科蓼属植物，广泛分布于华东、中南、辽陕甘川滇等地。虎杖根茎中主要含有蒽醌类和芪类化合物，其中芪类成收稿日期：2011-09-28修订日期：2012-07-20作者简介：白祖海（1978—），男，湖南岳阳人，长沙市疾病预防控制中心，主管检验师，硕士学位分白藜芦醇(resveratro1)和白藜芦醇苷(piceid)，具有活血定痛、清热利湿、止咳化痰作用[1]。白藜芦醇具有抗氧化、抗癌、抗血小板凝聚、抗菌、调节脂类代谢、

6、保护心血管系统和神经系统等多种功能[2]，被列为抗心血管病、抗癌最有前途的药物之一。虎杖中白藜芦醇含量最高[3]。目前对白藜芦醇的测定方法不少[4,5]，主要有分光光度法[6]、胶束薄层色谱法[7]、电化学发光法[8]、高速逆流色谱法[8-9]、高效液相色谱法[10-11]等。建立准确可靠和简便的测定虎杖中白藜芦醇的含量方法对于虎杖资源的充分开发利用产生重要的实际意义，为其研究开发提供科学的依据。本研究对虎杖样品进行初步处理，以乙醇-水为流动相，建立了测定虎杖中白藜芦醇的反相高效液相色谱方法，该测定方法操作简单，测定结果稳定可靠。1实验部分1.1仪器与试剂HL

7、PCPump装柱机（BT3020，德国）；高效液相色谱仪（安捷伦，1200系列，美国），RE-52A旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)；WF-4000微波系统（上海屹尧分析仪器有限公司）；高频数控超声波发生器(KQ－80TDB型,昆山市超声仪器有限公司),FA2104型电子天平。乙醇(色谱纯，湖南师大试剂厂)；乙醇(化学纯，湖南师大试剂厂)；乙酸乙酯（分析纯，和氏璧化工）；白藜芦醇对照品(美国Sigma公司，纯度99％)；虎杖药材购自湖南九芝堂药材公司。1.2溶液的制备1.2.1对照品溶液的配制称取白藜芦醇2.5mg，置25ml容量瓶中，乙醇溶解，并稀释至刻度。

8、摇匀，得含白藜芦醇0.10mg/ml的