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时间:2018-11-12
《神经节苷脂对大鼠缺血后脑水肿脑组织中aqp4mrna表达的影响》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、神经节苷脂对大鼠缺血后脑水肿脑组织中AQP4mRNA表达的影响【摘要】目的探讨神经节苷脂对大鼠缺血后脑水肿脑组织中AQP4mRNA表达的影响。方法线栓法复制脑缺血大鼠模型,于缺血后6h、1、3、5、7d观察模型大鼠脑组织含水量及AQP4mRNA的表达。结果手术组大鼠脑组织水含量及AQP4mRNA的表达于6h后升高,3d达高峰,较假手术组和神经节苷脂组显著升高(P<0.05)。结论神经节苷脂能够降低脑梗死大鼠脑组织水含量及AQP4mRNA的表达,减轻脑水肿。【关键词】脑水肿;水通道蛋白
2、4;神经节苷脂【Abstract】ObjectiveToobservetheeffectofGM1onexpressionofAQP4mRNAafterischemicbrainedemainrats.MethodsTheratmodelofcerebralischemicRNAinedaftercerebralischemicat6h,1d,3d,5d,7d.ResultsThebrainRNAofsurgerygroupincreasedat6handreachedthepeakat3d,th
3、eyabyreducingbrainRNA. 【Keya;AQP4;GM1 神经节苷脂(GM1)系细胞膜的重要成分之一,在中枢神经系统中最丰富,具有促进神经再生、神经轴突生长、突触形成和恢复神经支配功能。研究表明GM1对缺血神经元具有保护作用,其机制之一为减轻脑水肿[1]。水通道蛋白(aquaporinAQP)是近年来发现的一组与水通透有关的细胞膜转运蛋白,与缺血性脑水肿的发生关系密切,脑组织中主要是水通道蛋白4(AQP4)[2]。但GM1对AQP4的影响报到尚少,本实验通过研究GM1对AQP4
4、的影响,进一步阐明GM1的脑保护机制。 1材料与方法 1.1实验动物健康雄性SD大鼠75只,体质量250~300g,随机分3组:假手术组、手术组、神经节苷脂组,各25只。各组分别按6h、1、3、5、7d时间点成5个亚组,每个亚组5只。 1.2动物模型制备大脑中动脉闭塞(MCAO)模型参照ZeaLonga线栓法。以水合氯醛腹腔麻醉分离并结扎左颈总、颈外动脉,在左颈总动脉近交叉约5mm处切口,用直径0.26mm的鱼线插入颈内动脉,深度18~20mm,结扎颈内动脉。假手术组颈内动脉不插鱼线。鱼线插入
5、组鱼线插入并固定后腹腔注入鱼线插入(10mg/kg,)以后每24h一次。 1.3指标检测 1.3.1脑组织含水量测定:取大鼠右侧脑组织称湿重,后于95~100℃烤箱中烘烤24h后称干重,按如下公式计算脑组织含水量百分比:脑组织含水量=(湿重-干重)/湿重×100%。 1.3.2AQP4mRNA的测定:分别对各组脑组织制备匀浆,采用Trizol提取脑组织总RNA,紫外分光光度仪测定RNA含量,采用MMLV试剂盒中步骤将RNA逆转录成cDNA,再将cDNA进行PCR扩增,取扩增产物进行电泳,用凝
6、胶图像分析系统进行电泳条带光密度分析,计算AQP4产物和βactin产物光密度积分的比值,作为AQP4mRNA表达的指标。 1.4统计学处理各实验组数据用±s表示,多组之间采用单因素方差分析。采用SPSS13.0统计软件进行统计学处理。 2结果 表1各实验组脑水含量的变化(略) 注:与假手术组相比,△P<0.05;与手术组相比,▲P<0.05 2.1脑组织水含量测定结果手术组脑组织水含量于6h开始升高,3d达高峰,而后下降,7d仍高于正常。GM1组与手术组比较,各时间点脑组
7、织水含量均显著下降(P<0.05),见表1。 2.2AQP4mRNA的表达手术组脑组织AQP4mRNA的表达较假手术组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),GM1组与手术组比较,各时间点脑组织AQP4mRNA的表达均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。 表2各实验组AQP4mRNA的变化(略) 注:与假手术组相比,△P<0.05;与手术组相比,▲P<0.05 2.3脑组织水含量与AQP4mRNA表达的相关分析由表1和表2分析得出:
8、r=0.776,P<0.01,提示水含量与AQP4mRNA的表达正相关。 3讨论 本实验采用线栓法致大鼠脑缺血,诱发脑水肿,与脑梗死后水肿形成的病理生理过程相似。脑组织水含量于6h开始升高,3d达高峰,而后下降,7d仍高于正常。手术组各时间点脑组织水含量均高于假手术组(P<0.05)。 水通道蛋白是一个高选择性、低活化能转运水分子的跨膜通道蛋白家族。目前已鉴定出至少11种水通道蛋白,依次命名为AQP0~10。AQP家族可分两类:一类只允许水分子通过
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