白术茯苓汤及水煎液提取分离组分对脾气虚大鼠vip受体的影响

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1、白术茯苓汤及水煎液提取分离组分对脾气虚大鼠VIP受体的影响作者：罗云波，贾波，祝捷，贺晓芳，张楠，刘兴隆，彭腾，彭成，欧晓红【摘要】　　目的观察白术茯苓汤及其水煎液提取分离组分与组分配伍对脾气虚大鼠VIP受体的调控作用。方法以大黄厚朴枳实加饥饱失常法复制脾气虚证的动物模型，采用ELISA法检测，观察白术茯苓汤水煎液提取分离组分对脾气虚大鼠肠组织VIP受体的影响。结果与模型组比较：①白术茯苓汤组、总多糖高剂量组、白术内酯Ⅲ中剂量组、组分配伍中剂量组能降低VIPR1水平（P<0.05）；络合物高剂量组能显著降低VIPR1水平（P<

2、0.01）。②白术内酯Ⅲ高剂量组、络合物高剂量组、组分配伍中剂量组能降低VIPR2水平（P<0.05）；白术茯苓汤组、总多糖高剂量组、络合物中剂量组能显著降低VIPR2水平（P<0.01）。结论白术茯苓汤及各提取分离组分对VIP受体皆有不同程度地下调作用。【关键词】白术茯苓汤；提取分离组分；脾气虚证；VIP受体中医脾气虚证与VIP及其受体密切相关。我们前期研究表明白术茯苓汤能下调血管活性肠肽（VasoactiveIntestinalPeptide，VIP）水平［1～4］，近期研究证实白术茯苓水煎液提取分离的总多糖、总络合物、白

3、术内酯Ⅲ亦能明显降低脾气虚大鼠VIP水平（另文发表）。为进一步探索白术茯苓汤及提取分离组分对VIP受体是否具有调节作用，课题组观察了上述组分及组分配伍对脾气虚大鼠VIP1受体(VIPR1)和VIP2受体(VIPR2)影响。　　1材料　　1.1动物SPE级SD大鼠90只，体质量（200±20）g，雌雄各半。由成都中医药大学实验动物中心提供，合格证号：0015593。　　1.2药材厚朴、枳实、大黄药材购于成都同仁堂，白术、茯苓购于北京本草方源药业有限公司，由成都中医药大学中药鉴定教研室卫莹芳教授鉴定。　　1.3试剂VIP受体试剂盒由美国adl

4、公司提供。　　2方法　　2.1脾气虚模型的建立与分组SD大鼠90只，随机分为15组，每组6只。空白组：生理盐水4ml灌服，隔日1次，连续42d；脾气虚证模型组：小承气汤煎液4ml（1ml药液含原生药0.25g）隔日灌胃1次，喂药当日禁食，饮水不限，次日喂饲不限，连续42天，复制脾气虚模型［1］；余为白术茯苓汤组；总多糖高、中、低剂量组；总络合物高、中、低剂量组；白术内酯Ⅲ高、中、低剂量组，上述3组分配伍之高、中、低剂量组，均于第43天分别给予相应浓度药液4ml，1次d/，连续7d。　　2.2供试药物制备　　2.2.1白术茯苓汤组白术茯苓汤

5、：称取重量为1∶1的白术茯苓生药材饮片，混合浸泡30min，煎煮30min，过滤，共煎2次，合并药液，浓缩为1∶1（即1毫升药液含原生药1g）药液,4℃冰箱保存备用。　　2.2.2各提取分离组分配制见表1。表1各组分药液配制浓度表（略）　　2.3标本采集与处理各组动物在末次给药后禁食24h，饮水不限。实验时处死大鼠，自距肛门2cm以上取肠组织1段（300mg），用PBS液冲洗，剪碎，加入生理盐水1ml匀浆，加PBS液稀释成1∶10混悬液，4℃3000r/min离心15min，取上清液，装于子弹头，-80℃保存，待测肠组织VIP受体。　　2

6、.4测定采用ELISA法检测，由成都中医药大学实验中心测定。　　2.5数据统计各组数据均采用±s表示，用SPSS13.0统计软件进行数据处理，单因素方差分析，均数间两两比较。　　3结果　　3.1动物造模情况造模后第3天起模型大鼠开始出现饮水减少，糊状稀便，食欲下降，体重下降，倦怠、懒动，喜聚堆等体征；7d后模型大鼠相继出现嗜卧懒动，大便溏，食欲明显下降，体质量、体温下降，毛色不荣等症状；造模15～20d大鼠以上症状持续加重；造模35～42d大鼠饮食量大幅度下降，身体虚弱，毛色晦暗发黄，精神萎靡。　　3.2各组大鼠血浆及结肠组织VIP受体变

7、化比较见表2。表2各组VIP受体含量变化的比较（略）　　4讨论　　脾虚证是中医临床的常见证候，病变涉及到消化吸收功能障碍,自主神经功能紊乱，内分泌功能失调，免疫功能低下，以及血液系统,运动系统和能量代谢等方面的诸多异常。其中，脾气虚证内分泌激素尤其是胃肠道激素分泌异常是近年来研究的重要内容［1～5］。已有研究证实脾气虚证时机体胃肠功能呈紊乱状态与脑肠肽的调节密切相关，临床观察到脾气虚证患者血浆及乙状结肠粘膜VIP含量明显增加［6～8］。我们的前期研究也表明脾气虚大鼠血浆和肠组织VIP明显升高［1～4］。本次研究则发现脾虚大鼠尚存在VIP受

8、体水平的升高。可见，VIP及其受体水平的变化可能是中医脾气虚证的基本病理变化之一。VIP是肠神经系统中最具代表性和研究得最深入的神经肽，是最重要的脑肠肽和肽类神经递质之一。VIP在体内分布十分