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时间:2018-11-18
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1、白术提取液及成分对唾液淀粉酶活性的影响【关键词】白术;,,白术内酯Ⅰ;,,白术内酯Ⅲ;,,白术提取物;,,唾液淀粉酶 摘要:目的研究白术提取液及成分对唾液淀粉酶活性的影响。方法采用淀粉酶比色测量法,进行了白术的水煎液、醇提液、白术挥发油及白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ对酶活性影响的实验。结果白术水煎液能明显增加酶的活性,白术醇提液及白术内酯Ⅰ对酶活性也有增强作用,而白术挥发油及白术内酯Ⅲ却抑制酶的活性。结论白术内酯Ⅰ可以作为白术健脾运脾的效应成分之一。 关键词:白术;白术内酯Ⅰ;白术内酯Ⅲ;白术提取物;唾液淀粉酶 Effects
2、ofAtractylodesmacrocephalaextractsanditsponentsontheActivitiesofSalivaryAmylase Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectsAtractylodesmacrocephalaextractsanditsponentsontheactivityofsalivaryamylase.MethodsAmylasecolorimetricmethodinetheactivitiesofsalivaryamylaseaff
3、ectedbyAtractylodesmacrocephalaylaseincreasedobviouslybyAtractylodesmacrocephalaextract,anditacrocephalainvigoratingthespleen. Keyacrocephala;AtractylenolideⅠ;AtractylenolideⅢ;Extract;Salivaryamylase 中药白术为菊科苍术属植物白术AtractylodesmacrocephalaKoidz的根茎,具有健脾益气、燥湿利水、止汗、安胎
4、的功效;适用于脾虚气弱、运化失常所致的食少便溏、脘腹胀满、倦怠无力以及痰饮水肿等症。白术的化学成分主要为挥发油类成分(苍术酮、苍术醇等)、白术内酯类(白术内酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ等),还含有白术三醇的甲基丁酸酯、炔类化合物和白术多糖等。药理研究表明:白术煎剂及挥发油(如杜松脑)能明显拮抗乙酰胆碱和氯化钡所致肠管痉挛[1,2];白术内酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ为抗炎有效成分[3],白术挥发油和白术内酯Ⅲ有抗癌作用[4],但有关白术健脾消食益气的活性成分研究较少。白术为健脾益气、燥湿利水之要药,中医有“脾主涎”“涎为脾液”的论述。本文采用酶学研究方法[5
5、],进行了白术提取液及白术化学成分对唾液淀粉酶活性的影响实验研究,以期探讨白术健脾运脾的物质基础,为研究白术的活性部位和活性成分提供药理学依据。 1材料 1.1药材及药液 1.1.1生白术购于浙江省磐安县医药公司,经我校中药鉴定室王春根教授鉴定,为AtractylodesmacrocephalaKoidz.的根,粉碎成40目粉末。 1.1.2麸炒白术将蜜制麸皮撒入热锅内,待冒烟时,加入白术片,不断翻动,炒至白术呈深焦黄色,取出,筛去蜜制麸皮,放冷,得率90%,粉碎成40目粉末。 1.1.3生、炒白术水煎液取药材粉末以
6、水煎煮后,离心,得上清液,用PBS缓冲液(pH=8.0)配成所需浓度。再用醋酸乙酯萃取3次,得到水煎液的煎脂部分和煎水部分。煎脂部分蒸干醋酸乙酯,用缓冲液配成所需浓度。煎水部分用缓冲液配成所需浓度。 1.1.4生、炒白术醇提液取药材粉末用70%乙醇液冷浸过夜,回收乙醇液,用缓冲液稀释至所需浓度。按 3结果 3.1最适唾液淀粉酶浓度的确定固定底物(淀粉)浓度为0.04%,加入不同浓度(0.10%,0.025%,0.05%,0.1%,0.15%,0.25%,0.5%)的唾液淀粉酶,按上法操作,结果表明,当唾液淀粉酶的浓度为0
7、.1%(即1∶1000)时,酶活性较稳定,故最适酶浓度选择为1∶1000。结果见表1、图1。 表1最适唾液淀粉酶浓度的选择(略) 图1最适唾液淀粉酶浓度的选择(略) 3.2生、炒白术各部分对唾液淀粉酶活性的影响随时间的变化固定底物浓度和酶浓度,现测生、炒白术的水煎液、醇提液的测量值随时间的变化。结果见图2。由图2可见,在0~10min内酶的活性较弱,而在10min以后酶活性较强,为缩短分析时间,故选择酶活性测定时间15min为佳。 图2生、炒白术提取液对酶活性的影响随时间的变化(略) 3.3不同浓度生、炒白术各部分对
8、唾液淀粉酶活性的影响在底物浓度为0.04%,酶浓度为0.1%(1∶1000),酶响应时间15min的条件下,观测不同浓度生、炒白术各部分对酶活性的影响,结果见图3,图4。与PBS缓冲液对照,白术水煎液部分及醇提液部分的光密度值均小于对照值,表明均有不同程度增强酶活性的作用;而
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