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时间:2018-11-18
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1、白术提取液及成分对唾液淀粉酶活性的影响论文【关键词】白术;,,白术内酯Ⅰ;,,白术内酯Ⅲ;,,白术提取物;,,唾液淀粉酶摘要:目的研究白术提取液及成分对唾液淀粉酶活性的影响。方法采用淀粉酶比色测量法,进行了白术的水煎液、醇提液、白术挥发油及白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ对酶活性影响的实验。结果白术水煎液能明显增加酶的活性,白术醇提液及白术内酯Ⅰ对酶活性也有增强作用,而白术挥发油及白术内酯Ⅲ却抑制酶的活性。结论白术内酯Ⅰ可以作为白术健脾运脾的效应成分之一。关键词:白术;白术内酯Ⅰ;白术内酯Ⅲ;白术提取物;唾液淀粉酶EffectsofAtractylod
2、esmacrocephalaextractsanditsponentsontheActivitiesofSalivaryAmylaseAbstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectsAtractylodesmacrocephalaextractsanditsponentsontheactivityofsalivaryamylase.MethodsAmylasecolorimetricmethodinetheactivitiesofsalivaryamylaseaffectedbyAtractylodesmac
3、rocephalaylaseincreasedobviouslybyAtractylodesmacrocephalaextract,.freelacrocephalainvigoratingthespleen.Keyacrocephala;AtractylenolideⅠ;AtractylenolideⅢ;Extract;Salivaryamylase中药白术为菊科苍术属植物白术AtractylodesmacrocephalaKoidz的根茎,具有健脾益气、燥湿利水、止汗、安胎的功效;适用于脾虚气弱、运化失常所致的食少便溏、脘腹胀满、倦怠无力
4、以及痰饮水肿等症。白术的化学成分主要为挥发油类成分(苍术酮、苍术醇等)、白术内酯类(白术内酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ等),还含有白术三醇的甲基丁酸酯、炔类化合物和白术多糖等。药理研究表明:白术煎剂及挥发油(如杜松脑)能明显拮抗乙酰胆碱和氯化钡所致肠管痉挛[1.freelacrocephalaKoidz.的根,粉碎成40目粉末。1.1.2麸炒白术将蜜制麸皮撒入热锅内,待冒烟时,加入白术片,不断翻动,炒至白术呈深焦黄色,取出,筛去蜜制麸皮,放冷,得率90%,粉碎成40目粉末。1.1.3生、炒白术水煎液取药材粉末以水煎煮后,离心,得上清液,用PBS缓冲液(pH=
5、8.0)配成所需浓度。再用醋酸乙酯萃取3次,得到水煎液的煎脂部分和煎水部分。煎脂部分蒸干醋酸乙酯,用缓冲液配成所需浓度。煎水部分用缓冲液配成所需浓度。1.1.4生、炒白术醇提液取药材粉末用70%乙醇液冷浸过夜,回收乙醇液,用缓冲液稀释至所需浓度。按文献方法[6]从浙江产白术分离得到对照品,经UV,IR,NMR,MS等波谱鉴定为白术内酯Ⅰ(atractylenolideⅠ)、白术内酯Ⅲ(atractylenolideⅢ)。取对照品适量,以1%二甲亚砜的PBS缓冲液配成所需浓度,供实验用。1.2试液1.2.11/15mol/LPBS缓冲液(pH=
6、8.0)称取磷酸二氢钠约8.0g,加生理盐水稀释至1L,用10%氢氧化钠调pH值为8.0。1.2.20.04%可溶性淀粉溶液烧杯内放入可溶性淀粉0.2g,加蒸馏水5ml,摇匀成混悬液。另称取无水磷酸氢二钠13.3g及苯甲酸4.3g,加蒸馏水250ml,煮沸后,加入淀粉溶液,继续煮沸1min,冷却后,加蒸馏水稀释至500ml。1.2.30.1mol/L碘贮备液精密称取碘酸钾3.567及碘化钾45g,置于1L容量瓶中,加蒸馏水约800ml,然后缓缓加入浓盐酸9ml,摇匀,再加蒸馏水定容,置冰箱中备用。1.2.40.01mol/L碘应用液取0.1m
7、ol/L碘贮备液50ml,加蒸馏水稀释至0.01mol/L。盛于棕色瓶中置冰箱内备用。1.2.5淀粉酶液淀粉酶贮备液5ml,加PBS缓冲液稀释至500ml,备用。2方法2.1取50ml刻度试管2只,一只作对照管,另一只作测定管。两管内各加0.04%可溶性淀粉溶液5ml。2.2将测定管置于37℃水浴内预温5min后加入待测样品液0.1ml及唾液淀粉酶溶液(1∶1000)0.5ml混匀,再置于37℃水浴内15min后取出。2.3于对照管、测定管中各加入0.01mol/L碘应用液5ml,并用蒸馏水稀释至50ml刻度。2.4立即混匀,在570nm处进
8、行比色测定,以PBS缓冲液校正光密度到零点,读取各管光密度值。比较各种溶液对酶活性的影响。光密度值(O.D)减小,则酶活性增强;光密度值增大,则酶活性变弱。3结果3
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