食品添加剂维生素b2的质量规格要求、生产使用工艺和检验方法，食品中该添加剂的检验

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1、食品添加剂的质量规格要求、生产使用工艺和检验方法，食品中该添加剂的检验方法或者相关情况说明1维生素B2的质量规格要求质量规格要求符合日本《食品添加剂公定书》中维生素B2的相关要求：项目规格检测方法性状黄色～橙黄色的结晶或结晶性粉末，微臭，有苦味符合《食品添加物公定书》确认试验符合注1纯度试验（1）比旋光度：-128.0～142.0°注2（2）感光黄素不比比较液的颜色浓注3干燥减量≤1.5%注4灼烧残渣≤0.30%注5含量98.0～102.0%注6【注1】确认试验：本品水溶液（1→100,000），呈

2、淡黄绿色，发强烈的带黄绿色的荧光，如果加入盐酸（1→4）或氢氧化钠溶液（1→25）后此荧光会消失。【注2】纯度试验·比旋光度：干燥本品，精密称取0.1g，加入氢氧化钾溶液（1→150）4ml使之溶解，再加入新煮沸又冷却后的水10ml，一边加入乙醇4ml一边充分振荡溶液，再加入新煮沸又冷却后的水定容至20ml，30分钟内测定比旋光度。【注3】纯度试验·感光黄素：称取本品0.025g，加入无醇三氯甲烷10ml，振荡5分钟，滤过，其滤液的颜色不比以1/60mol/L重铬酸钾溶液3.0ml加水配成的1000

3、ml溶液的颜色深。【注4】干燥减量：1.5%以下（105℃，2小时）。【注5】灼烧残渣：0.3%以下。【注6】含量：本品干燥后，含有核黄素（C17H20N4O6）98.0～102.0%。62维生素B2的生产使用工艺2.1维生素B2作为一种水溶性的营养强化剂可以添加到多类食品中。目前GB14880及其公告中液态饮料类只有饮液、乳饮料类可以添加维生素B2，本次预申请维生素B2在“果蔬汁类”饮料中来使用。2.2添加了维生素B2的果蔬汁饮料生产工艺2.2.1添加了维生素B2的系列果汁、果肉或果浆的饮料生产工

4、艺成品溶解、搅拌质量检查包装杀菌、冷却质量检查填充质量检查混合、搅拌质量检查混合、搅拌搅拌加热溶解混合、搅拌将称量好的原料1投入有离子交换水的搅拌罐中溶解、搅拌均匀将称量好的原料2、原料3投入搅拌罐中，混合搅拌均匀将称量好的原料4和各种维生素及矿物质加入搅拌罐中，混合搅拌均匀将称量好的原料5加入搅拌罐中，混合搅拌均匀2.2.2添加了维生素B2的胶原蛋白果汁饮料生产工艺6配方1：原料称量搅拌、溶解过滤配方2：搅拌、溶解品质确认过滤储存杀菌过滤填充杀菌外观检查贴标签印字包装品质检查成品63维生素B2的检

5、验方法3.1将待测样品干燥后，精密称取0.015g，加入乙酸（1→400）800ml，加温溶解，冷却后，加水定容至1000ml，以此作为检测溶液。3.2另外称取核黄素标准品，采用与上述检测溶液同样的操作，制成标准溶液。3.3对于检测溶液与标准溶液，以水作对照溶液，在波长445nm测定它们的吸光度AT和AS。3.4在上述检测溶液与标准溶液5ml中分别加入连二亚硫酸钠（Na2O4S2）0.02g，振动摇匀后使之脱色后，马上测定吸光度AT’和As’，按以下公式求得添加剂维生素B2中核黄素含量。以上操作需避

6、免直射阳光，在遮光容器里进行。核黄素（C17H20N4O6）含量＝本方法参考：日本《食品添加物公定书》（第8版）维生素B2（核黄素）的定量检测方法。64食品中维生素B2的检验方法（高效液相色谱法＊1（公定法））4.1仪器和试剂4.1.1附带荧光检测器的高效液相色谱仪（HPLC（FL））4.1.2色谱柱：反相分配型，内径4.6mm，长度150mm4.1.3标准维生素B2：日本药典标准品「核黄素标准品」（日本公定书协会）4.1.4酶溶液：取维生素B2定量用高峰淀粉酶B0.5g，在临用时溶于10ml醋酸缓

7、冲液(pH4.5)中，过滤或离心分离后使用其上清液。4.1.5合成沸石：活性吸附剂，吸附维生素B2定量用4.1.625w/v%氯化钾・0.1mol/l盐酸溶液(洗脱液)：加入8.5ml浓盐酸至1L25w/v%氯化钾溶液中。4.1.7其他试剂若无特别说明,均使用色谱纯。4.1.8玻璃容器选用褐色的玻璃容器。4.2试验溶液的配制精密量取样品(1～10g)放入100ml提取瓶中。加入0.1mol/l盐酸50ml,沸水浴中加热30分钟，时而搅拌进行提取.在50℃以下冷却，用4mol/l醋酸钠溶液调整pH值至

8、4.0～4.5。添加5ml酶溶液，在37℃下保温一晚后，加入醋酸缓冲液(pH4.5)定容至100ml。过滤后的滤液作为样品溶液＊2。精确注入适量的样品溶液(含1～5μg维生素B2)至已用水填充了活性合成沸石(1.5g)的吸附柱中，以1ml/min的流速让其吸附。用5ml水冲洗吸附管内壁,然后用30～60ml沸水清洗色谱柱后,用沸腾的洗脱液以1秒1滴(3ml/min)的流速洗脱，分取大约25ml的溶出液。降到室温后,用洗脱液定容至25ml，作为HPLC用试验溶液。4.3