质量规格要求、生产使用工艺和检验方法,食品中该添加剂的食品检验方法食品添加

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1、质量规格要求、生产使用工艺和检验方法，食品中该添加剂的检验方法或者相关情况说明（一）质量规格要求乳铁蛋白的质量标准1范围本标准适用于食品添加剂乳铁蛋白。2规范性引用文件本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注明日期的文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。GB5009.3食品中水分的测定GB5009.4食品中灰分的测定GB5009.5食品中蛋白质的测定GB5413.21婴幼儿食品和乳品中钙、铁、锌、钠、钾、镁、铜的测定GB5009.12食品中铅的测定GB4789.2食品

2、微生物学检验菌落总数的测定GB4789.3食品微生物学检验大肠菌群计数GB4789.4食品微生物学检验沙门氏菌检验GB4789.10食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验3技术要求3.1原料要求3.1.1生乳：应符合GB19301的规定3.1.2乳和乳制品：应符合GB19644的规定3.1.3其他原料：应符合相应的安全标准和/或有关规定3.2感官要求：应符合表1规定表1感官要求项目要求检验方法色泽具有均匀一致的橙红色泽取适量式样置于50mL烧杯中，在自然光下观察色泽和组织状态，闻其气味，用温开水漱口，品尝滋味滋味、气味具有产品特有的滋味、气味、无异味

3、组织状态干燥均匀的粉末状产品、无结块、无正常视力可见杂质3.3主要成分指标：应符合表2规定表2主要成分指标项目指标检验方法蛋白质/（%）≥93GB5009.5蛋白质中的乳铁蛋白/（%）≥90附录A铁/（mg/kg）≤350GB5413.213.4理化指标：应符合表3规定表3理化指标项目指标检验方法水分/（%）≤5　GB5009.3灰分/（%）≤1.5　GB5009.43.5污染物限量：应符合表4的规定表4污染物限量项目指标检验方法铅/（mg/kg）≤0.2GB5009.12（铅）3.6微生物限量：应符合表5规定表5微生物限量项目采样方案及限量a（

4、若非指定，均以CFU/g或CFU/ml表示）检验方法ncmM菌落总数52100010000GB4789.2大肠菌群5210100GB4789.3平板计数法金黄色葡萄球菌5210100GB4789.10平板计数法沙门氏菌500/25g_GB4789.4a样品的分析及处理按GB4789.1和GB4789.18执行。4包装、标签、贮存4.1包装包装所用容器、包装材料采用符合卫生标准和卫生要求的原材料。4.2标签符合GB7718的规定4.3贮存室温阴凉干燥处密封保存。不得露天存放，不得与有毒有害物质或其他杂物混存。附录A高效液相色谱法（HPLC）测定乳铁

5、蛋白的纯度1.范围适用于高效液相色谱法检测乳铁蛋白的纯度。2.原理用高效液相色谱法(HPLC)测定原料乳铁蛋白中乳铁蛋白的纯度。用纳米级纯水稀释样本，经聚乙烯苯-二乙烯基苯色谱柱分离，用20-90%乙腈进行线性梯度洗脱。在214nm波长下，经二极管阵列检测。3.试剂和仪器1).纳米级纯水：所用水经纳米级纯水净化系统出处理（电阻率达18兆欧姆）2).纯化的乳铁蛋白，西格玛公司生产3).乙腈（CAN），色谱级或以上4).三氟乙酸（TFA），色谱级或以上5).一次性塑料或玻璃移液管6).硅烷化色谱瓶(安捷伦5183-4507号)7).ResourceR

6、PC3-mL聚乙烯苯-二乙烯基苯色谱柱（通用电气医疗集团17-1182-01号)8).HP1100高效液相色谱系统(配二极管阵列检测器)4.步骤4.1标准样品的制备准确称取13.2mg的乳铁蛋白标准品，定量转移到100mL的容量瓶中，用纳米级的纯水稀释后，用移液管吸取部分标准溶液到硅烷化的HPLC色谱瓶中。4.2样本的制备准确称取13.2mg的乳铁蛋白样品，定量转移到100mL的容量瓶中，用纳米级的纯水稀释后，用移液管吸取部分标准溶液到硅烷化的HPLC色谱瓶中。4.3仪器设置HP1100高效液相色谱仪·100mL注射器·流速1mL/min·Res

7、ourceRPC3mL聚乙烯苯－二乙烯基苯色谱柱·二极管阵列检测器（214nm）·洗脱时间30分钟流动相A-0.1%体积比的三氟乙酸水溶液流动相B-0.09%体积比的三氟乙酸,90%体积比的乙腈水溶液线性洗脱梯度时间(分钟)%流动相B02012064016451950205023702410025100272030204.4分析先注射3次标准样品溶液，接着再注射样本溶液，最后再注射3次标准样品溶液。记录乳铁蛋白的峰面积值。注射顺序如下:第一次:标准样品第二次:标准样品第三次:标准样品第四次:样本1第五次:样本2第六次:标准样品第七次:标准样品第八

8、次:标准样品5.计算计算样本中乳铁蛋白的纯度:乳铁蛋白的纯度%=其中：样本峰面积=样本中乳铁蛋白的峰面积标准品峰面积=6次注射的乳铁蛋白