大乌泡叶中总黄酮含量测定

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1、大乌泡叶中总黄酮含量测定：程伟,秦文杰,陈素红,叶祖光【摘要】目的为大乌泡资源的合理开发和利用提供试验依据。方法采用60%甲醇提取大乌泡叶总黄酮,分光光度法测定其含量；并通过稳定性、重复性、精密度和回收率试验检验了该方法的可靠性和重复性。结果标准液和供试液均在510nm处有最大吸收。重复性、精密度、加样回收率试验的RSD值分别为2.11%、0.97%、2.34%,含量测定结果表明大乌泡叶中总黄酮含量为3.8%。结论以60%甲醇提取、硝酸铝显色、510nm测定的分光光度法适用于大乌泡叶中总黄酮含量的测定。【关键词】大乌泡；总黄酮；含

2、量测定；分光光度法Abstract：ObjectiveTosupplyscientificbasisforthereasonabledevelopmentandutilizationofRubusmultibracteatusLevl.etVant.resources.MethodThetotalflavonoidsRubusmultibracteatusLevl.etVant.ethanolanditscontentinedbyspectrophotometry.Thereliabilityandrepeatabilityoft

3、hemethodents.ResultBothstandardandtestedsolutionshadthemaximumabsorbanceat510nm.TheRSDvaluesofrepeatability,accuracyandrecoveryexperimentsinationshoultibracteatusLevl.etVant.ethanol,colorediniumnitrateanddeterminedbyspectrophotometryat510nminationoftotalflavonoidsinRu

4、busmultibracteatusLevl.etVant..KeyultibracteatusLevl.etVant.；totalflavonoids；contentdetermination；spectrophotometry大乌泡为蔷薇科悬钩子属植物大乌泡(RubusmultibracteatusLevl.etVant.),又名倒生根、黄水泡、无刺乌泡、糖泡叶、马莓叶,以根及全株入药。全国大部分地区均有分布,主产于四川、云南、贵州等地。其味苦、性凉,入脾、肝二经,具清热解毒、祛风除湿、凉血、止血、接骨的功效。大乌泡为苗药的常

5、用药,但目前尚未见对大乌泡化学成分研究的报道,我们通过对大乌泡叶的化学成分的系统研究,发现其中含有许多黄酮类成分(另文报道),现就大乌泡叶中总黄酮的含量测定方法报道如下。　　1仪器与试药UV-757CRT紫外分光光度计(上海UNICO),AB135-S电子分析天平(瑞士梅特勒-托利多公司),CQ-250超声波清洗器(上海超声仪器厂),电热恒温水浴锅(北京市永光明医疗仪器厂),索氏提取器。芦丁对照品(中国药品生物制品检定所提供,批号10080-200306)。本研究所用大乌泡叶于2007年7月采集于贵州省黔西南州普安县,经秦文杰副研

6、究员鉴定为蔷薇科悬钩子属大乌泡(RubusmultibracteatusLevl.etVant.),标本存放于中药复方新药开发国家工程研究中心。甲醇为分析纯,5%亚硝酸钠、10%硝酸铝、4%氢氧化钠等均采用分析纯自配。　　2方法与结果　　2.1供试品溶液的制备干燥大乌泡叶粉末约2.0g,精密称定,置索氏提取器中,加入60%甲醇100mL,于恒温水浴锅上90℃提取6h,过滤,减压浓缩并定容至50mL容量瓶中,得供试品溶液。　　2.2芦丁对照品溶液的制备精密称取干燥至恒重的芦丁对照品4.75mg,用少量60%甲醇溶解,置50mL容量瓶

7、中,用60%甲醇定容至50mL,摇匀,静置,配成浓度为95μg/mL的芦丁对照品贮备液。　　2.3测定波长的选择以芦丁为对照品测定大乌泡叶中总黄酮的含量。精密吸取对照品液、供试品液各适量分别加入到25mL容量瓶中,按“2.4”项下方法操作,并在400～600nm范围内扫描,结果均在510nm处有最大吸收波长,其他成分对测定无干扰,故选择510nm为测定波长。　　2.4标准曲线的绘制精密吸取浓度为95μg/mL的芦丁对照品溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL,分别置于25mL量瓶中,分别加入5%亚硝酸钠溶液1.

8、0mL,摇匀,放置6min后各加入10%硝酸铝溶液1.0mL,摇匀后放置6min,分别加入4%氢氧化钠溶液10mL,用60%甲醇稀释至刻度,摇匀,放置10min,在510nm处测定吸光度。回归方程为：Y＝0.0012X＋0.001,r＝0.9996