油橄榄叶中总黄酮含量测定方法探讨

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1、第３１卷，第２期光谱学与光谱分析Ｖｏｌ．３１，Ｎｏ．２，ｐｐ５４７－５５０２０１１年２月ＳｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙａｎｄＳｐｅｃｔｒａｌＡｎａｌｙｓｉｓＦｅｂｒｕａｒｙ，２０１１油橄榄叶中总黄酮含量测定方法探讨郑媛媛１，２，李辰２，３，封士兰１，黄新异２，刘永峰２，４，陈小芬２，４，邸多隆１，２＊１．兰州大学药学院，甘肃兰州７３００００２．中国科学院兰州化学物理研究所，中国科学院西北特色植物资源化学重点实验室和甘肃省天然药物重点实验室，甘肃兰州７３００００３．五邑大学应用物理与材料学院分析测试中心，广东江门５２９０２０４．中国

2、科学院研究生院，北京１０００４９摘要建立以芦丁为对照品的油橄榄叶中总黄酮含量的测定方法。采用Ａｌ（ＮＯ３）３－ＮａＮＯ２－ＮａＯＨ和ＡｌＣｌ３两种显色法测定油橄榄叶中总黄酮的含量，并分别考察了两种方法对测定结果的影响。结果表明，ＡｌＣｌ３显色法适宜于油橄榄叶总黄酮的含量测定。该法操作简便，线性关系良好，准确度、重复性和稳定性较好，可用于油橄榄叶总黄酮含量测定，并为中药和天然产物中总黄酮的含量测定提供参考。关键词油橄榄叶；总黄酮；紫外－可见分光光度法；ＡｌＣｌ３显色法中图分类号：Ｏ６５７．３文献标识码：ＡＤＯＩ：１０．３９６４

3、／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－０５９３（２０１１）０２－０５４７－０４［９］。薄层色谱扫量时，该方法需要较多的黄酮化合物对照品引言描法和超临界流体色谱法存在灵敏度低，重现性差的缺点，也需要较多的黄酮化合物对照品。紫外分光光度法是测定天油橄榄（ＯｌｅａｅｕｒｏｐａｒｅＬ．）为木犀科（Ｏｌｅａｃｅａｅ）木樨榄属然产物中总黄酮最常用的方法之一，具有仪器廉价、操作简（Ｏｌｅａ）植物，主要分布在欧洲地中海沿岸国家和美国加州地便，检测成本低等优点，不需要总黄酮中各黄酮化合物对照区。自６０年代起，油橄榄开始在我国引种，甘肃陇南市是我品，在分析

4、工作中无需对总黄酮中各黄酮化合物同时定性定［１，２］。现代药理学研究表明，国油橄榄最大的种植基地之一量，因此得到广泛应用。但由于中药和天然药物提取物成分油橄榄叶提取物具有抗氧化、抗真菌、降血压、降血脂等活复杂，在应用紫外分光光度法测定含量时很难避免基质对测［３，４］。油橄榄叶中的化学成分包括裂环烯醚萜类、黄酮类、性定结果的干扰。本文针对油橄榄叶中的总黄酮，选用紫外分游离醇、甾醇、烷烃类及挥发性成分等。其中，裂环烯醚萜光光度法在不同显色体系中进行含量测定，探讨干扰测定的类和黄酮类是其主要有效成分。油橄榄叶所含裂环烯醚萜类主要基

5、质因素，以期为中药或天然产物复杂基质中总黄酮含主要是橄榄苦苷。黄酮类化合物主要有木犀草苷、芹菜苷、量测定方法提供参考。［１，５］。油橄榄叶中黄酮类化合物含槲皮素、芦丁、山奈酚等量丰富，其药理活性主要表现在抗氧化及清除自由基作用，１仪器、试剂与材料对心血管系统的作用，抗肿瘤、抗癌作用，对平滑肌的作用，抗炎、抗菌、抗病毒作用，雌激素作用，对中枢神经系统的Ｔ６新世纪紫外－可见分光光度计（北京普析通用仪器有作用，降血糖作用，镇痛止泻、防治溃疡的作用。此外，还可限责任公司），ＲＥ－５２Ｃ型旋转蒸发仪（巩义市予华仪器有限［６］。作为功能

6、食品添加剂、天然抗氧化剂食用责任公司），ＢＴ２２４Ｓ型电子天平（北京赛多利斯仪器系统有目前，总黄酮的含量测定方法主要有分光光度法、薄层限公司）。色谱扫描法、高效液相色谱法、超临界流体色谱法和毛细管芦丁对照品（批号为１０００８１－２００７０７）购于中国药品生物［７，８］。其中，高效液相色谱法和毛电泳法等几种主要的方法制品检定所。橄榄苦苷对照品为本实验室自制：油橄榄叶乙细管电泳法具有较高的准确性和灵敏度，但在测定总黄酮含酸乙酯部位提取物，以氯仿－甲醇（９：１，φ）为洗脱液经硅胶收稿日期：２０１０－０５－１０，修订日期：２０１０－

7、０８－２０基金项目：中国科学院“百人计划”项目和中国科学院“科技支甘”项目资助作者简介：郑媛媛，女，１９８６年生，兰州大学药学院在读硕士研究生ｅ－ｍａｉｌ：ｈｎ＿ｚｙｙ＠１６３．ｃｏｍ＊通讯联系人ｅ－ｍａｉｌ：ｄｉｄｌ＠ｌｉｃｐ．ｃａｓ．ｃｎ５４８光谱学与光谱分析第３１卷柱色谱反复分离重结晶得到化合物，经１１３为纵坐标进行线性回归，得线性回归方程、相关系数分别ｙＨＮＭＲ和Ｃ－ＮＭＲ确定化合物为橄榄苦苷，并由ＨＰＬＣ－ＤＡＤ法－面积归一化法２＝８．３５５ｘ＋０．０３６９，Ｒ＝０．９９３９，ｎ＝６。由此可知，芦丁对测得其含量大于

8、９５％。油橄榄叶（干燥品）采于甘肃省陇南照品溶液在０．００７８８－０．０４７３ｍｇ·ｍＬ－１的浓度范围内呈市。现良好的线性关系。Ａｌ（ＮＯ３）３，ＮａＮＯ２，ＮａＯＨ和ＡｌＣｌ３为分析纯，实验用２．３．２ＡｌＣｌ３显色法乙醇为工业纯，实验用水为蒸馏水。分别精密量取芦丁对照品溶液Ⅰ０．０，１