教育论文-类风湿关节炎动物模型的研究进展

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1、类风湿关节炎动物模型的研究进展摘要：类风湿性关节炎是一种以关节滑膜炎为特征的慢性全身性自身免疫性疾病。研究此类疾病的有效方法是建立动物模型。但是不同的动物模型有着不同的特点，应根据不同的实验要求来选择正确的动物模型。关键词：类风湿性关节炎；发病机制；动物模型类风湿性关节炎（rheumatoidarthritis）是一种以关节滑膜炎为特征的慢性全身性自身免疫性疾病。滑膜炎持久反复发作，可导致关节内软骨和骨的破坏，关节功能障碍，甚至残废。类风湿性关节炎的动物模型有多种，本文将对集中关节炎模型的发病机制、制备方法、造模特点等方

2、面进行研究。1卵蛋白诱导的关节炎模型1.1卵蛋白关节炎模型的制备（1）试剂的制备:将鸡卵蛋白用无菌生理盐水配置成浓度为20mg/ml的溶液，与同体积的弗氏完全佐剂混匀，完全乳化，滴于冰水上5至10分钟内完全不扩散为合格。（2）致敏及检测：驱上述乳化液1ml在动物背部皮下分5个部位皮下注射，第2周及第4周分别用相同的方法加免疫一次。（3）检测：第6周取鸡卵蛋白溶液0.1ml（10微克）在动物后臀皮下注射，20h-48h内皮试呈阳性反应（产生至少16mm的皮肤红色隆起）为致敏成功。（3）关节炎模型的诱发：在动物的胫骨节最高点

3、与髌骨下缘连线之中点的髌韧带两侧，且垂直于皮肤注射0.5ml鸡卵蛋白溶液(含鸡卵蛋白5mg)。1.2卵蛋白关节炎的发病机制卵蛋白诱导的关节炎模型的病理改变有滑膜增生、血管翳形成、软骨及骨破坏。关节注入抗原后24h出现关节肿胀，病理表现为急性滑膜炎，大量渗出液。诱导1周后，模型组织学观察可见滑膜衬里层细胞的增多，衬里下层炎性细胞侵润及纤维素样变性坏死［1］。1-4周后，关节滑膜明显增生，血管翳形成，滑膜细胞由1-3层增至6-10层，以单核细胞和巨噬细胞为主，其次为淋巴细胞。4周后出现不可逆的关节软骨和骨破坏，有软骨细胞的坏

4、死、软骨下新骨形成、软骨纤维化，最后可出现股病变。Trauner*：21的研究表明，卵蛋白诱导的关节炎模型的发病机制主要是由于关节内抗原的持续存在，刺激滑膜细胞分泌抗体，形成抗原-抗体-C3复合物，使滑膜炎持续存在，滑膜增生，血管翳形成。2佐剂性关节炎(AdjuvantArthritis)模型佐剂性关节炎，又称弗氏佐剂性关节炎，是研究免疫性关节炎动物模型的基本方法［3］［4］。弗氏佐剂性关节炎分为完全佐剂(CFA)和不完全佐剂(IFA)。完全佐剂是用液体石蜡与无水羊毛脂按2:1或者6:4的比例混合液lml,高压灭菌加入8

5、0°C灭活lh的减毒卡介苗或者干燥结核死菌lOing制成。不加卡介苗的为不完全佐剂。1.1佐剂性关节炎模型的制备：配制成弗氏完全佐剂(CFA)，大鼠右足垫皮内注射(0.05ml/只)致敏大鼠，原发病变表现为致炎侧的关节肿胀，致敏后即可出现，继发病变一般于致炎12〜14d后出现，表现为非致炎侧及双前肢的关节肿胀。1.2佐剂性关节炎的发病机制：佐剂性关节炎的发病机制主要是分子模拟理论：结核杆菌的一个蛋白分子与关节滑膜上的一个糖蛋白分子结构相似，可以被同一株T细胞克隆所识别，从而诱发残生针对关节的免疫反应。1.3佐剂性关节炎模

6、型的特点：佐剂性关节炎的炎症以踝关节为重，可侵及足垫、全足。［5］佐剂性关节炎大鼠模型的制作方法简单，易于制作，其病理表现与类风湿性关节炎相似，但其病变有一定的自限性，与类风湿性关节炎的病理生理学特点存在较大差别。因此单独使用佐剂性关节炎模型作为研究类风湿性关节炎的模型，有一定的局限性。3胶原诱导性关节炎(collagen-inducedarthritis,CIA)模型Trentham等首次发现50%的RA患者血清中存在有抗II型胶原的自身抗体。Foidartdeng［6］则报道，多发性软骨炎患者体内具有抗天然II型胶原

7、的抗体。II型胶原诱导的关节炎模型是Trentham等［7］.于1977年创立的，将纯化的天然胶原溶于0.lmol/L醋酸，制成质量浓度为lg/L的溶液，与等量的弗氏佐剂或IFA混合而成的稳定乳剂。II型胶原是目前较为公认的关节软骨特异性抗原［8］。3.1胶原诱导性关节炎模型的制备（大鼠）：将II型胶原用0.lmol/ml的冰醋酸溶解后配成2g/L的溶液，加等体积的不完全佐剂（IFA），使终质量浓度为lg/L。大鼠背部剃毛，自鼠尾部开始，分5-6个部位皮内注射，每个部位0.1ml。7d后加强免疫注射一次，建立胶原诱导的大

8、鼠实验模型。动物致敏后7d，部分大鼠出现踝关节皮肤发红，肿胀；14d后部分大鼠出现踝关节肿胀，足部充血，活动受限。系列实验研究表明［9_12］。动物致敏7d后，不分大鼠的踝关节皮肤发红，轻度肿胀，病理切片显示轻度炎症；14d后大部分大鼠踝关节出现肿胀，足踝部皮肤发亮、充血，关节活动受限，病理切片显示滑膜组织增生肥厚，