探讨用酶联免疫吸附实验法(elisa)和时间分辨荧光免疫法(trfia)检测乙肝两对半的差异

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1、探讨用酶联免疫吸附实验法(ELISA)和时间分辨荧光免疫法(TRFIA)检测乙肝两对半的差异(海南省文昌市人民医院海南文昌571300)【摘要】目的：探讨采用酶联免疫吸附实验法(ELISA)和时间分辨荧光免疫法(TRFIA)检测乙肝两对半的结果差异。方法：对197例血液样本分别采用ELISA法和TRFIA法进行HBV定量和定性检测，观察两种检测方法阳性率和符合率。结果:两种方法检测HBsAg、HBeAb、抗-HBe阳性率比较无差异性(P>0.05)；TRFIA法组抗-HBs、抗-HBc检测阳性率和抗-HBs、抗-HBe和抗-HBc阳性符合率均显

2、著高于ELISA法组(P<0.05)。结论：TRFIA法检测乙型肝炎血清标志物阳性符合率高，能提高乙型肝炎的诊断和病情评估，效果优于传统ELISA法。【关键词】乙型肝炎;ELISA；TRFIA【中图分类号】R446.6【文献标识码】B【文章编号】1003-5028(2015)7-0344-02我国是乙型肝炎高发国，酶联免疫吸附法(EUSA)是A前检测乙型肝炎病毒(HBV)感染最主要的病原学标志，也是临床诊断和治疗的直接证据之一【1】。ELISA检测乙型肝炎病毒(HBV)感染血清标志物应用早，阳性率高，临床应用广泛。但ELISA法只能定性检测HB

3、V,不能直接反映HBV血淸标志物贪量，无法判断药物治疗效果及评估乙型肝炎病情的动态变化【2】。为克服这一弱点,笔者特选取197例血液样本，分别用酶联免疫吸附实验法(ELISA)和时间分辨荧光免疫法(TRFIA)检测乙肝两对半，现将两种检测方法的结果差异报道如下。1资料与方法1.1临床资料本研宂抽取2012年10月一2014年9月间，在我院需做乙型肝炎HBsAb测定的197例患者纳入研宂，其屮男性101例，女性96例，年龄12-58岁，平均(36.25±4.67)岁。所有患者均抽取外周静脉血6ml,高速(3000r/min)离心lOmin

4、后取血清标本，置于零下(70〜80)°C冰箱中保存待检。1.2方法197例血清标本均分别采用采用酶联免疫吸附实验法(ELISA)和吋间分辨荧光免疫法(TRFIA)进行HBsAb定量和定性检测。本研究TRFIA试剂盒由广东省广州市达瑞公司生产，所用的SYM810型吋间分辨荧光免疫分析仪及洗板机由上海新波生物技术冇限公司提供。ELISA法试剂盒由上海荣盛生物技术冇限公司生产，ELISA法检测所用的RT6100酶标仪及KT3100全自动洗板机由深圳雷杜生命科学股份有限公司提供。严格按照《全国临床检验操作规程》和试剂盒说明书进行操作，并选用卫生部临检中心提供

5、的HBV血清学标志物质控品进行质控。TRFIA法根据不同浓度标准品判断检测的结果，ELISA法定性结果判断参照试剂说明书。1.3观察指标观察两种检测方法的HBsAg、HBeAb、抗-HBe、抗-HBs及抗-HBc阳性率，对比两组检测方法的阳性符合率。1.4统计处理选用SPSS15.0统计学软件包进行分析处理，检测阳性率及阳性符合率均行卡方检验，以P<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1两种检测方法阳性率比较两种检测方法检测HBsAg、HBeAb、抗-HBe检测阳性率比较无差异性(P>0.05)；TRFIA法组抗-HBs、抗-HBc阳性

6、率显著高于ELISA法组，组间比较差异有统计学意义(P<0.05)o见表1。3讨论ELISA法检测HBV血清标志物开展早，阳性率高，II操作简单，是-•种早期诊断HBV感染的良好方法。ELISA法在临床中应用广泛，是0前检测乙型肝炎患者血清标志物的首选方法［3］。大量研究证实，ELISA检测法只能进行血清标志物定性分析，无法反应血清学标志物含量及动态变化。TRFIA检测法是一种新型免疫标志检测技术，采用稀土标记，是继放射免疫分析之后标记物发展的一个新的里程碑【41TRFIA法是在荧光分析(FIA)的基础上发展而来的一种超灵敏度检测技术，它以核酸

7、探针和细胞等为特征，具冇特异性和敏感性高的特点，对低浓度HBsAg检出率更高，从而降低了漏诊率和误诊率。同吋TRFIA检测法能对乙肝血清标志物进行定量检测，以判断乙肝病情严重程度，为评估乙肝患者病情及传染性、拟定治疗方法提供重要的参考依据【5】。本研宄对血液标本分别采用TRFIA和ELISA两种检测进行乙肝两对半检测，结果显示两种检测方法检测HBsAg、HBeAb、抗-HBe检测阳性率比较无差异性，但TRFIA法组抗-HBs、抗-HBc阳性率显著高于ELISA法组，另外,TRFIA法检测抗-HBs、抗-HBe和抗-HBc阳性符合率显著高于ELISA法

8、。和覃小梅【6】相关报道基本一致。由此可见，TRFIA法检测乙型肝炎血清标志物能为临床早期诊断和治疗提供病原