灵芝多糖的分离纯化和药理活性及在功能食品中的应用

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1、维普资讯http://www.cqvip.com118《食品研究与开发>2005年2月第26卷第1期灵芝多糖的分离纯化和药理活性及在功能食品中的应用张熳张兰江苏食品职业技术学院淮安223002摘要：就近10年来对灵芝多糖的研究进行了归纳总结，并对其在功能食品中的应用进行了展望。传统的提取工艺结合现代层析技术和离子交换技术是提取高纯度、高活性的多糖成分的有效手段。灵芝多糖的免疫调节、抗肿瘤、抗辐射、抗衰老、抗氧化作用已经过大量的试验验证。关键词：灵芝多糖；分离纯化；药理活性；作用机制灵芝为多孔菌科真菌灵芝的子实体。在我国酵液中提取。作为药物已有2000多年的历史。灵芝的有效成陈

2、文星等人[2]，对从子实体中提取灵芝多糖进分非常丰富，目前已知的有多糖、麦角字醇、三萜行了比较研究，研究表明，灵芝子实体经水浸，沸水类、蛋白质、氨基酸、多肽、等十大类，150多种。煎煮30min，反复收集滤液，浓缩，过离子交换柱，灵芝多糖是灵芝最主要的生理活性成分。目前分透析，真空干燥，可得多糖含量为80％的提取产物。离到的灵芝多糖达200种之多，大部分为B型该产物较其他方法有明显的抗肿瘤作用，可明显抑葡聚糖，分子量从数千到数万不等，不溶于高浓制B。6Bk肿瘤细胞在鼠体内的生长，降低S．舳接种度乙醇，可在热水中溶解。灵芝多糖的药理活性小鼠的死亡率。主要取决于多糖中的糖苷键和立

3、体结构，其中以罗立新等[3对灵芝菌深层培养产物菌丝体B一(1—3)、(1—6)连接或B一(1—4)、(1—6)的糖苷和发酵液由提取方法进行了探讨，发酵液胞外键活性较高⋯。现代研究表明，灵芝多糖具有抗多糖的提取：发酵液离心，取上清液80~90℃血栓、抗肿瘤、抗辐射、抗氧化、免疫调节、保肝、浓缩后流水透析至无还原糖，然后加入95％乙降压。醇5～10℃下静止沉淀12h以上，沉淀物分别1灵芝多糖的分离纯化以无水乙醇、丙酮、乙醚、洗涤后真空干燥。此1．1分离提取提取物多糖含量为69．2％，杂蛋白含量为目前灵芝多糖的生产主要从野生或人工栽培20．6％。的灵芝子实体和灵芝菌深层培养产物菌丝

4、体和发菌丝体胞内多糖的提取：菌丝体上浓缩离t70．5MNaOH25℃厂———————上清(弃去)沉淀物(水溶性多糖)残渣上清液厂—————]去⋯⋯冷=：上清液残渣(弃去)玑涎仞L城提水冶多话上透析沉淀沉NN(g~提水溶多糖)1．2粗多糖纯化]糖溶于热水后，以1：4的丁醇氯仿混合液振荡粗多糖的纯化第一步是去除杂蛋白。灵芝至有机层澄清为止。对于杂蛋白含量高的子实菌深层培养产物菌丝体和发酵液提取粗多糖，体提取物则应先用蛋白酶处理再用Sevag法除杂蛋白含量少，可采用Sevag法除去，即将粗多去杂蛋白。维普资讯http://www.cqvip.com《食品研究与开发))2005年2月

5、第26卷第1期119除蛋白后的多糖还含有较多其他杂质。可通过免疫细胞直接作用和通过机体神经一内分泌一免疫柱层析进一步除去。方法如下：将除杂蛋白后的多系统的相互调节。糖溶于0．1MNaC1中，加入DEAE-SephadexA-25T淋巴细胞是重要的免疫细胞，灵芝多糖能层析柱内以0．1MNaC1洗至无糖检出，再继续进行显著的促进小鼠脾脏T细胞的增殖；李明春1研梯度洗脱，然后透析，无水乙醇沉淀。最后取样品溶究认为，GLB能迅速提高静息T细胞中三磷酸于尽可能少的0．1MNaC1中，上Sephadexg-200层肌醇IP，；的浓度且被Gp蛋白抑制剂PTX所抑析柱，继续用0．1MNaC1

6、以10mL／h的流速洗脱后收制，还可显著促进静息T细胞中二酰基甘油集，测定含糖部分，合并相同峰，经透析，乙醇沉淀，DAG的合成，而对活化T细胞则无作用。实验结丙酮，乙醚洗涤，真空干燥的纯度96％以上的白色果表明，灵芝多糖作用并激活T细胞的机制之多糖纯品。一是通过IP，／Ca与DAG／PKC信号传递途径。罗立新等在分离纯化灵芝多糖的过程中，大蛋白激酶是催化体内蛋白磷酸化的酶类，而蛋量多次使用有机溶剂，获得了高含量高纯度的灵白磷酸化是体内各种生物反应最终起作用的通芝多糖纯品。但有机溶剂作用激烈，使蛋白质变性路，蛋白激酶的活化是激活T细胞中必要条件。的同时，多糖的结构也会发生改变，

7、导致多糖活李明春【1研究证明，灵芝多糖可使小鼠静息T细性被抑制或丧失，因此该法提取的灵芝多糖的胞中PKA和PKC活性明显升高，并使PKA发药理生理活性还有进一步验证。陈文星等采用生质膜转位，并拮抗Staurosporine对T细胞离子变换法替代有机溶剂的作用取得了高药理PKC活性的抑制。因此，增强T细胞蛋白激酶活活性的多糖，因此可考虑以温和的离子交换法改性是灵芝多糖发挥免疫增强和抗肿瘤作用的重进罗立新等研究方法，以期获得高纯度高活性的要途径。灵芝多糖。2．3抗衰老、抗氧化1．3灵芝多糖含量测定[41很多