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1、2008年第25卷增刊实验动物科学LABOfLAToRY州IMALSCIENCE·45·蜂胶对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用刘浩1董娟1崔美芝2杨昕蕾2(哈尔滨医科大学第一临床医学院1.检验科,2.实验动物中心,哈尔滨150001)摘要:目的研究蜂胶对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用。方法大鼠喂高脂高糖饲料4W后腹腔注射链尿佐菌素(STZ)造模。将造模成功大鼠随机分成两组:2型糖尿病组(A组,继续喂养上述高脂高糖饮食)和加蜂胶喂养组(B组,另加蜂胶喂养12W,0.99d。1只一)。另设正常大鼠对照组(c组,
2、仅喂基础饲料)。分别于4、8、12w时测血糖、血肌酐、尿素氮、尿量、尿蛋白定量;处死大鼠后取左肾做病理切片光镜下观察肾组织变化。结果B组与A组比较:血糖、血肌酐、尿素氮、尿量、尿蛋白定虽均有统计学差异(P(0.01),病理学观察显示B组大鼠肾组织的病理变化较A组大鼠轻微,但与C组比较仍存在病理改变。结论蜂胶有降血糖作用对2型糖尿病大鼠的肾脏具有保护作用。关键词:蜂胶;2型糖尿病;大鼠;Wistar蜂胶(Propolis)是工蜂从植物嫩芽中有选择地采集而来的树脂、混入蜜蜂上腭分泌物及少量蜂蜡加工而成的粘
3、胶状混合物。蜂胶的成分相当复杂,用现代科学方法分析蜂胶中含有305种化合物,其中黄酮类71个、芳香酸及芳香酸酯类59个、氨基酸25个,同时还含有醛、醇、酚、甾体类、烃类⋯。因此蜂胶具有抗氧化增强免疫力、抗病原微生物、调节人体内分泌、降低血糖、血脂、血压、血液黏度、改善微循环、净化血液清除自由基、促进组织修复保肝护肝及抗癌等功效¨1。但是蜂胶对2型糖尿病肾病的作用如何鲜见报道,本文将动物实验结果报道如下。1材料和方法1.1实验动物与分组选择健康的雄性Wismr大鼠36只,体重150~1609,由哈尔滨医
4、科大学第一临床医学院实验动物中心提供,许可证号为:SCXK黑20064914;实验完成地点为本院中心实验室,实验室许可证号:SYXK黑20020009。将大鼠按随机数字表法分成2组,正常对照组(C)10只,2型糖尿病模型组(T2DM)26只。1.2造模方法1.2.1正常大鼠对照组(C组)大鼠喂基础饲料,T2DM组大鼠喂高糖高脂饲料(10%猪油、20%蔗糖、2.5%胆固醇、1.O%胆酸盐、66.5%基础饲料)∞,4],喂养4W后测大鼠血清甘油三酯(Serumtriglyceride,’rG)、胆固醇(T
5、otalcholesterol,TC)、空腹血糖(Fastingbloodglucose,FBG)、及空腹胰岛素(Fastinginsulin,FINS)计算胰岛素敏感指数(1/FBG×FINS)。l,2.2将空腹12h的T2DM组大鼠以30mg/kg剂量一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ),C组大鼠注射等量的柠檬酸缓冲液。72h后测大鼠FBG及FINS,空腹血糖值≥11.1mmol/L大鼠为糖尿病。FINS测定采用放射免疫法,按Linco公司操作手册进行。STZ溶液的配制方法:将STZ溶解于0.1mm
6、ol/L(pH4.4)柠檬酸钠一柠檬酸缓冲液中,新鲜配制成3.og/LSTZ溶液p1。I.3药物干预治疗将造模成功的21只T2DM大鼠再次分成2组即T2DM对照组11只(A组,继续喂养高脂高糖饲料),蜂胶喂养组(B)10只。正常对照C组大鼠喂基础饲料,B组大鼠喂养高脂高糖饲料加蜂胶。按人与大鼠体表面积折算的等效剂量确定大鼠用量为0.99/ks。(蜂胶购自黑龙江省东北黑蜂开发有限责任公司)。1.4标本采集1.4.1于实验的4W、8W、12W时将大鼠置代谢笼中收集24h尿液,计尿量、新鲜尿样3000r/r
7、ain离心15rain,取上清液4ml置于一加℃冰箱保存,待测尿蛋白。1.4.24W、8W时眼球采血,12W时股动脉采血约3~4mL,3000r/min离心10min,取血清置于一20℃冰箱保存,待测血肌酐、尿素氮。1.4.3处死大鼠取左肾用中性10%甲醛溶液固定,丙酮脱水,二甲苯透明,石蜡包埋,制成5pjn切片,分别进行HE和PAS染色,观察肾脏组织病理变化。.46·MBORA篇黧笳SCIENCE2008年第25卷增刊1.5检测指标及方法血糖采尾血用血糖仪测定(保灵曼公司产品);血尿素氮(BUN)、
8、肌酐(Scr)、尿蛋白定量(Pro)采用日立7150型全自动生化仪测定;肾组织形态学观察用OLYMPUSBXS0型显微镜。1.6统计学方法用SPSSl0.0软件分析,数据以(i4-s)表示,组间比较用t检验。2结果2.1高脂高糖饲料喂养4W后大鼠的体重、TC、TG、FBG、FINS及胰岛素敏感指数的变化结果见表l、2。从表1、2看出高糖高脂饮食导致T2DM大鼠血脂升高、体重增加过快,FBG、FINS水平升高,胰岛素敏感指数下降,两组比较差异显著(P<0.
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