莪术对小鼠免疫功能影响的研究

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1、莪术对小鼠免疫功能影响的研究【关键词】莪术；,,,小鼠；,,,白介素摘要：目的探讨莪术对小鼠免疫功能的影响。方法用100%莪术对水煎液定期给小鼠连续灌胃10d，1次/d，检测其对小鼠抗体产生能力、淋巴细胞增殖以及白介素2产生的影响。结果莪术对以上免疫学指标均有明显增强作用，与对照组比较有显著性差异。结论莪术对小鼠免疫功能具有一定增强作用。关键词：莪术；小鼠；白介素2；抗体生成能力；淋巴细胞Abstract:ObjectiveThisexperimentistodiscusstheinfluenceofZedorayonm

2、ouse'simmunefilledthestomachesofratswith100%Zedoraywaterextractcontinuouslyonceadayfor10days,thentheeffectsofZedorayonmice'santibodyproductionability,lymphocyteproliferationandIL-productionabilitywerehadobviousrEinforcementactionontheimmunologyindexeswithcontrolg

3、roup,thedifferencewassignificant(P＜).ConclusionZedorayhasdefiniterEInforcementactiononmouse'simmunefunction.Keywords:Zedoray;Mouse;IL-2;Antibody;Lymphocyteproiferation　　莪术为姜科植物莪术、郁金或广西莪术的根茎，味辛、苦、性温，归肝、脾经，有行气破淤、消积止痛之功效，临床上主要用于治疗积滞胀痛、血淤腹痛、肝郁肿大、血滞经闭、跌打损伤等疾病［1］。本文通过检

4、测3个免疫学指标研究并探讨了其对小鼠免疫功能的影响，旨在为莪术的临床应用提供新的思路及理论依据。　1材料与方法材料药品和试剂莪术购于潍坊医学院中药房，100g加水1000ml，温火煎煮h，去渣浓缩200ml备用；RPM1640为GIBCO分司产品；小牛血清为杭州四季青公司产品；LPS和ConA为美国Sigma公司产品；MTT为Fluca公司产品；二甲基亚砜购自上海生工生物工程分司；电泳仪；眼科手术器械等。主要仪器Model450型酶标仪；CO2培养箱；低速冷冻离心机；超净工作台；100目不锈钢网；50ml离心管等。动物分

5、组与给药健康BALB/C小鼠24只，体质量18~2g，雌雄各半，由潍坊医学院动物中心提供。将动物随机分为两组，每组12只，Ⅰ组为生理盐水对照组，Ⅱ组为莪术处理组。Ⅰ组和Ⅱ组分别用生理盐水和莪术原液灌胃，1次/d，/，两组持续灌胃共10d。检测指标和方法定量溶血分光光度测定法本法用体外B细胞分泌的抗体裂解红细胞所释放的血红蛋白量表示，其结果可反映机体体液免疫功能。实验第5天分别将5%的绵羊红细胞注入各组小鼠腹腔内，第11天眼球放血，颈椎脱臼处死小鼠，常规取脾脏，然后进行脾细胞计数。调细胞浓度至1×10ml加1ml，取脾细胞

6、1ml，1∶10新鲜豚鼠血清1ml，%绵羊红细胞1ml混匀，37℃水浴1h，100r/min离心10min，以上清液于全自动酶标仪450nm波长处测OD值，作为QHS反应值［2］。淋巴细胞增殖反应无菌制备小鼠脾细胞悬液，用RPMI1640不完全培养液洗涤3次，每次100r/min离心10min，然后每含10%牛血清的完全培养液配成1×10ml，取100μl加入96孔细胞培养板，加入终浓度为μg/ml的ConA，置37℃，5%CO2培养箱中培养4h后，无菌条件下加入MTT10μl孔，37℃5%CO2温箱掺入h，不再继续培养

7、1h，最后加入DMSO100μl，微量振荡器充分震荡后静置20min，全自动酶标仪用560nm波长进行比色分析［3］。小鼠腹腔巨噬细胞和IL-2的诱生与检测无菌制备小鼠脾细胞悬液：用RPMI1640不完全培养液洗涤2次，每次1000r/min离心10min，然后用含10%牛血清的完全培养液配成1×10ml，置细胞培养瓶中，37℃，5%CO2培养箱中培养4h，离心收集上清液，置-20℃冰箱保存备用。制备活化的脾淋巴细胞：无菌取正常小鼠脾脏，制成1×10ml细胞悬液，加入ConA使其终浓度mg/L，置37℃，5%CO2培养箱

8、中培养4h，收集细胞，离心洗涤2次，用完全RPMI1640配成悬液作为检测ⅠL2的反应细胞。IL-2活性检测：取-20℃冰箱保存的IL-2上清液，作1/2和1/4的稀释，在96孔平底培养板中，每孔加入IL-2上清液或不同稀释度的IL-2上清液100μl以及上述反应细胞100μl；阴性对照只加100μlRPMI1640