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时间:2019-01-03
《韭子对老年小鼠免疫功能影响的实验研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果韭子对老年小鼠免疫功能影响的实验研究【摘要】目的研究韭子水煎剂对老年小鼠免疫功能的影响。方法以韭子水煎剂灌胃老年小鼠30d,应用流式细胞技术检测小鼠T淋巴细胞亚群、放射免疫方法检测血清白介素2含量,ELISA方法检测血清中免疫球蛋白G的含量。结果 老年组脾脏T淋巴细胞亚群比例失调,血清IL2和IgG含量下降;老年韭子水煎剂治疗组脾脏T淋巴细胞亚群由失衡恢复到平衡,血清IL2和IgG
2、含量提高。结论韭子水煎剂具有恢复老年小鼠免疫功能的作用。【关键词】韭子水煎剂;老年小鼠;免疫功能中药韭子为百合科植物韭的种子,含有生物碱、挥发油、皂甙、硫化物、蛋白质、氨基酸、油脂、维生素C等成分。研究表明,中药韭子具有补肝肾,暖腰膝,壮阳,抗炎抑菌、祛痰等药理作用〔1〕,并能增强小鼠非特异性免疫和体液免疫功能〔2〕。但对老年个体的免疫功能调节作用目前尚未见报道。本实验通过检测老年小鼠T淋巴细胞亚群,IL2活性以及IgG含量,探讨韭子对老年小鼠免疫功能的影响。 1材料与方法11 材料课题份量和难易程度要恰当,博士生
3、能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果韭子购于佳木斯市药材公司。抗小鼠CD3、抗小鼠CD4、抗小鼠CD8单克隆抗体:北京医科大学免疫系。IL2试剂盒:解放军总医院科技开发中心放免所;IgGELISA检测试剂盒:北京邦定生物试剂公司。1对象健康昆明种小鼠来自本校实验动物中心,30只,雌雄各半,青年组(2月龄)10只,体重g,老年组(12月龄)2
4、0只,体重(50±5)g。13方法131中药制备韭子50g,按传统方法水煎煮2次,合并两次滤液后加热浓缩制成含生药量为1g/ml的韭子水煎液。132实验分组实验分为三组,青年组10只,老年组10只,老年韭子水煎剂治疗组10只。治疗组根据每鼠体重灌胃给予韭子水煎剂0ml每日1次〔2〕;老年组、青年组,灌服生理盐水0ml/只,每日1次。连续30d后,取小鼠眼球血,离心分离血清,冻存,待检;小鼠断髓处死,无菌取脾,于Hanks液中研碎,制成1×106/ml脾细胞悬液。1指标检测141T淋巴细胞亚群测定将脾
5、细胞悬液分别加入2个试管内,1ml/管。第1管加入FITC标记的抗小鼠CD3+单克隆抗体40课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果μl、第二管同时加入PE标记的抗小鼠CD4+单克隆抗体和FITC标记的抗小鼠CD8+单克隆抗体各20μl,作用30min后,加入1ml荧光洗液,200r/min离心min,去上清。加入1
6、ml荧光保存液,流式细胞仪检测106个细胞中各细胞亚群的百分率。14血清IL2的检测采用放射免疫法测定法,按试剂盒说明书操作。14血清IgG检测ELISA法,按试剂盒说明书操作。1统计学处理实验各项指标以x±s表示,通过SPSS100软件进行统计学处理,组间进行方差分析、q检验。 结果1韭子水煎剂对老年小鼠T淋巴细胞亚群的影响见表1。老年组与青年组比较,CD4+亚群的比例、CD4+/CD8+的比值明显降低,统计学有显著性差异,说明模型成功;应用韭子水煎剂治疗后,治疗组CD4+亚群和CD4+/CD8+的比
7、值与青年组比较无明显差异。表1韭子水煎剂对衰老小鼠脾脏T淋巴细胞亚群功能的影响(略)韭子水煎剂对老年小鼠血清IL2和IgG含量的影响课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果 见表2。老年组与青年组比较,血清IL2和IgG水平明显降低,具有显著性差异,说明模型成功;应用韭子水煎剂治疗后,治疗组与青年组比较,血清
8、IL2和IgG含量水平无明显差异。表韭子水煎剂对小鼠血清IL2的影响(略) 讨论 在衰老个体,免疫器官出现萎缩,淋巴细胞总数下降,各亚群的功能也降低,CD4细胞和CD8细胞比例改变,表面的CD4受体和CD8受体的密度也下降;淋巴细胞分泌的细胞因子如IL2的含量也发生了改变,造成个体一生中第二个发病高峰〔3〕。通过本实验证明,
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