高糖对体外培养视网膜色素上皮细胞toll样受体2表达的影响

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1、高糖对视网膜色素上皮细胞TLR2表达的影响陈雪梅张学东宗元娟沈强重庆医科大学附属第一医院眼科、眼科学重庆市市级重点实验室，重庆400016【摘要】目的观察高糖对体外培养的ARPE-19细胞TLR2表达的影响及机制。方法各组ARPE-19细胞刺激48h,实验组（不同浓度D-葡萄糖糖：5.5mmol/L、15.5mmol/L、25.5mmol/L)，PKC抑制剂组（25.5mmol/LD-葡萄糖糖和10mmol/lGo6979PKC-α药物抑制剂）,高渗对照组（5.5mmol/LD-葡萄糖和20mmol/L甘露醇）。qRT-PCR和Wesrernbl

2、ot方法对比分析不同糖浓度组ARPE—19细胞TLR2蛋白和mRNA表达水平、PKC-α蛋白转位，以及PKC药物抑制剂对ARPE—19细胞在高糖环境下表达TLR2蛋白的影响。结果与正糖组相比，高糖组和中度高糖组TLR2的mRNA和蛋白表达，以及PKC-α转位均增加（P<0.05），并且高糖组高于中度高糖组（P<0.05）；PKC-α抑制剂可以消弱高糖上调表达ARPE-19细胞TLR2的作用（P<0.05）。结论高糖可以上调ARPE-19细胞TLR2的mRNA和蛋白表达,刺激PKC-α转位；高糖可能是通过PKC-α通路上调ARPE-19细胞TLR2

3、表达。【关键词】糖尿病视网膜病变；ARPE-19；Toll样受体2；高糖中图分类号：R779.6TheexpressionofToll-likereceptor-2inARPE-19byHighglucoseChenXuemeiZhangXuedongZongYuanjuanshengqiang(DepartmentofOphthalmology,theFirstHospotal,Chongqing400016,China;MedicalUniversity;ChongqingKeyLaboratoryofOphthalmology)[Abstr

4、act]ObjectiveToobservetheeffectionofhighglucoseonexpressionoftheToll-likereceptor-2inARPE-19anditsmechanism.MethodARPE-19weredividedintodifferentglucoseconcentrationgrape(5.5mmol/l、15.5mmol/l、25.5mmol/lD-glucose)，inhibitiongrape(10mmol/lGo6976,PKC-alphapharmacologicalinhibito

5、r,+25.5mmol/lD-glucose);andanosmoticcontrolgrape(20mmol/lmannitol+5.5mmol/lD-glucose).ARPE-19wereculturedindifferentconditionfor48h.ThenWesternblotandReal—TimeReverseTranscription—PolymeraseChainReaction(RT—PCR)wererespectivelyusedtodetermineTLR-2proteinandmRNA1evels、PKC-alph

6、atranslocationindifferentconcentrationglucose,andeffectionofGo6976,PKC-alphapharmacologicalinhibitoronexpressionofTLR-2protieninhighglucose.Resultshighglucose(15.5mmol/l、25.5mmol/l)increasedTLR2mRNAandprotein,andPKC-alphatranslocation(P<0.05),andthe25.5mmol/lgroupewerehighert

7、hanthe15.5mmol/lgroup(p<0.05).PharmacologicalinhibitionofPKC-alphaactivitysignificantlydecreasedeffectionofhighglucoseonTLR2proteininARPE-19(P<0.05).ConclusionExpressionofTLR2wasincreasedinARPE-19byhighglucose,andtheaboveeffectioncanbesuppressedpartlybyPKC-alphainhibitor.Keyw

8、ordsdiabeticretinopathy；ARPE-19cells；Toll-likereceptors2；highglucose