实验五磺胺嘧啶腹腔注射药时曲线及药动学参数计算

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1、实验五　磺胺嘧啶非静脉给药后的药时曲线及药动学参数计算一、实验目的了解磺胺嘧啶非血管内一次给药后血药浓度随时间变化的规律。二、实验内容（1）制作磺胺嘧啶钠浓度标准曲线；（2）兔静脉注射磺胺嘧啶钠溶液，定时采血测血药浓度，绘制血药浓度——时间曲线；三、实验原理、方法和手段已知磺胺嘧啶等磺胺类药物在酸性环境下其苯环上的氨基（—NH2）将被离子化而生成铵类化合物（—NH3+）。后者与亚硝酸钠反应可发生重氮化反应进而生成重氮盐（—N＝N+—）。该化合物在碱性条件下可与麝香草酚生成橙黄色化合物。在525nm波长下比色，其光密度与磺胺嘧啶的浓度成正比。

2、具体反应过程为：根据上述原理，在给受试家兔一次给予一定剂量的磺胺嘧啶后，于不同时间点采集其静脉血样，采用比色法对各样品中磺胺嘧啶的血药浓度进行定量分析，并以血药浓度对相应时间作图，从而获得磺胺嘧啶的静脉给药后的药时曲。四、实验组织运行要求五、实验条件动物3kg左右家兔一只药品20％磺胺嘧啶（sulfadiazine，SD）、7.5％三氯醋酸、0.1％SD标准液、0.5％亚硝酸钠、0.5％麝香草酚（用20％NaOH配制）、1000u/mL肝素生理盐水、3％戊巴比妥钠、蒸馏水。器材721分光光度计、离心机、磅秤、手术器械、动脉夹、尼龙插管（或玻

3、璃插管、硅胶管）、兔手术台、注射器（5mL）及针头、移液器（0.01～1mL）、吸头、试管、离心管、试管架、玻璃记号笔、药棉、纱布、计算机。六、实验步骤（1）麻醉：全麻或局麻均可。取兔一只（实验前禁食12小时不禁水），记录体重和性别，耳缘静脉注射3％戊巴比妥钠0.8～1.0mL/kg麻醉，仰位固定于兔手术台上。（2）手术：颈部手术区剪毛，切皮约6cm左右，钝性分离皮下组织和肌肉，气管插管，分离出颈总动脉约2～3cm左右，在其下穿两根细线，结扎远心端，保留近心端。（3）耳缘静脉注射1000u/mL肝素1mL/kg。（4）插管：用动脉夹夹住动脉

4、近心端，再于两线中间的一段动脉上剪一“V”型切口，插入尼龙管，用线结扎牢固，以备取血用。（5）取血：打开动脉夹放取空白血样0.4mL，分别放入1号管（空白管）和2号管（标准管）各0.2mL摇匀静置。而后腹腔注射20％SD1.5mL/kg，分别于注射后5、15、30、45、75、120、180、240、300分钟时由动脉取血0.2mL加到含有7.5％三氯醋酸2.7mL的试管中摇匀。标准管加入0.1％SD标准液0.1mL，其余各管加蒸馏水0.1mL摇匀。（6）显色：将上述各管离心5分钟（1500-2000转/分），取上清液1.5mL，加0.5％

5、亚硝酸钠0.5mL，摇匀后，再加入0.5％麝香草酚1mL后溶液为橙色。（7）测定：于分光光度计在525nm波长下测定各样品管的光密度值。表1磺胺类药物血药浓度测定的步骤试管时间（min）　7.5％三氯醋酸（mL）血液（mL）蒸馏水（mL）充分摇匀后离心5分，取上清液1.5mL0.5％亚硝酸钠（mL）充分摇匀0.5％麝香草酚（mL）光密度浓度μg/mL空白管0　2.70.20.10.510标准管02.70.2标准液0.10.5116.7给药后12.70.20.10.5132.70.20.10.5152.70.20.10.51152.70.20

6、.10.51302.70.20.10.51452.70.20.10.51602.70.20.10.51902.70.20.10.511202.70.20.10.51（8）计算血中药物浓度：根据同一种溶液浓度与光密度成正比的原理，可用空白血标准管浓度及其光密度值求算出样品管的磺胺药物浓度。公式如下：=样品管光密度(OD)　样品管浓度(μg/mL)标准管光密度(OD’)标准管浓度(μg/mL)=样品管浓度(μg/ml)样品管光密度(OD)×标准管浓度标准管光密度(OD’)血药浓度(μg/mL)=样品管浓度×稀释倍数（30）【结果与处理】将所得数

7、据填入表1中，并用计算机软件绘制药物的药时曲线。七、实验报告实验报告内容应包括：【实验目的】、【实验原理】、【器材】、【药品与试剂】、【结果】及【讨论】等部分。【结果】要对所得实验数据进行统计分析；【讨论】要对实验中遇到的问题进行描述并分析原因。